摘要：目的对发热伴出疹症候群(RFS)监测预警研究进行系统综述,为我国RFS监测与防控提供参考。方法以“发热”“出疹”“监测”以及“fever”“rash”“surveillance”为中英文检索词并补充其自由词,系统检索中国知网、万方数据知识服务平台、PubMed、Web of Science数据库,语种限定为中文及英文,对纳入文献信息进行摘录整理及汇总描述。结果共纳入36篇文献,中英文分别为21篇和15篇。RFS病原学监测共19篇,病原体主要包括麻疹病毒、水痘-带状疱疹病毒、风疹病毒、肠道病毒、人类B19病毒、登革病毒、A组链球菌、伤寒/副伤寒沙门菌、人疱疹病毒、腮腺炎病毒和腺病毒;重大活动/突发自然灾害监测8篇,监测时段集中在2010-2015年,包括运动会、世界博览会、地震、热带风暴和宗教集会等;异常病例/聚集性疫情监测预警8篇,以国外研究为主,监测症候群范围广,监测场所为医疗机构,主要依靠《国际疾病分类》第九版(ICD-9)编码或患者主诉中诊断及症状进行自动判别预警;仅1篇针对预测研究,为蒙古国开展的基于传染病监测数据预测研究。36篇文献的分析方法包括描述性分析法、基于时间的预警模型(如回归分析法、固定阈值法、休哈特控制图法及累积和控制图法)和时间序列分析方法。结论未来RFS监测体系方向应聚焦已知病原和可能的未知病原监测预警相结合的模式,可进一步完善预警系统设计,实现无感化病例监测与早期预警,应用当下的信息抓取技术和智能建模方法,提高RFS监测预警的敏感度和特异性。

摘要：目的探究布鲁氏菌104M疫苗株A抗原的主要成分,从A抗原中筛选潜在候选蛋白,为布鲁氏菌新型疫苗的研制提供基础。方法本研究利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝染色、鲎试剂检测脂多糖、脂多糖银染对布鲁氏菌104M疫苗株A抗原的主要成分进行解析,通过与免疫绵羊血清的蛋白免疫印记实验,选取有印迹的部分切胶酶解,利用液相色谱–串联质谱对这部分蛋白进一步解析,通过抗原分析工具VaxiJen和毒力蛋白分析工具VirulentPred,筛选布鲁氏菌A抗原评分0.6以上的毒力相关蛋白作为潜在的候选疫苗。结果布鲁氏菌A抗原是一种淡黄色棉花糖状、质量较轻的物质,主要由蛋白和脂多糖构成,对A抗原的蛋白质组鉴定显示,104M A抗原共有1142种蛋白,能够与绵羊血清反应的蛋白有172种,VaxiJen抗原性评分在0.6以上的有87种蛋白,其中毒力相关蛋白有38种。结论布鲁氏菌104M疫苗株A抗原的主要成分是蛋白质和脂多糖,对筛选到的A抗原中的候选蛋白需要进一步的实验来测试这些蛋白质的免疫原性和保护水平以设计出针对布鲁氏菌病更为有效和安全的疫苗。

摘要：目的建立一种基于临床标本核酸的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)核酸检测及基因分型方法。方法通过基因组学比对,选取Mp Genotype 1型和Genotype 2型菌株特异性靶序列设计合成引物和探针,建立Mp双荧光探针PCR检测分型方法,同时评价该方法的特异度、准确度、检测限和重复性。采用建立的荧光PCR方法对临床标本核酸进行检测,并与已报道的荧光PCR方法进行比对。结果对与Mp种属关系相近的其他种支原体以及常见呼吸道细菌、病毒等18种病原体的核酸进行检测,结果显示均无交叉反应;对90份Mp核酸的检测及分型的准确度为100%。该方法对于Genotype 1型和Genotype 2型Mp检测限均为1.0拷贝/μl的核酸样本,组内、组间重复性实验变异系数均小于2.5%。对88份临床标本核酸的检测中,与已报道的荧光PCR方法RepMp1体系的检测结果相比,Kappa值为0.675,P值为0.267,显示出高度的一致性。结论本研究所建立的Mp核酸检测及基因分型方法敏感度和特异度高,分型准确,可应用于各级省市疾控系统对Mp的监测与防控,促进Mp防控体系的完善,增强监测能力,对Mp的预警预测具有重要意义。

摘要：近十年来随着真实世界数据的应用增多,在弥补随机对照临床试验证据方面真实世界证据(Real-world evidence,RWE)研究为药品监管决策提供了重要的技术和证据支撑,一些国家药品监管机构出台了一系列RWE研究的规范和政策。新型冠状病毒感染疫情推动了RWE研究的进程和范围,尤其在评价疫苗有效性和安全性上取得了长足进步。RWE研究监管体系建设起步较晚,RWE研究质量体系和证据产生的机制尚需不断完善。目前RWE研究的相关概念、目的、数据源、研究设计框架等仍需规范。本文从疫苗评价的角度,对RWE研究的相关概念、应用范围、优势和局限性、监管法规和指南、数据源、设计类型、研究设计框架、应用实例、面临的挑战及其对策等进行概述,为开展RWE研究提供参考。

摘要：本研究旨在探讨人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)小疏水蛋白(Small hydrophobic protein,SH)T细胞表位肽的免疫原性和保护效果。通过设计并合成覆盖SH蛋白序列全长的10条多肽,利用HRSV感染小鼠的脾淋巴细胞进行IFN-γ-酶联免疫斑点(Enzyme-linked immunospot assay, ELISpot)的检测,筛选出5条能显著刺激IFN-γ产生的SH蛋白T细胞表位多肽。将其与CpG和磷酸铝(AL)佐剂配制成混合多肽疫苗,两次皮下给药的方式免疫C57BL/6J小鼠,评价其免疫原性和保护效果。结果显示,与佐剂对照组相比,SH蛋白混合多肽疫苗可以诱导免疫后的小鼠产生抗原特异性IgG抗体和Th1偏向的T细胞免疫应答,降低HRSV感染后肺病毒载量,并减轻肺脏病理损伤。研究结果表明,SH蛋白混合多肽通过免疫小鼠可以引起良好的免疫原性,并保护小鼠抵抗HRSV的感染。为进一步研究基于SH蛋白的HRSV多肽疫苗提供了科学依据。

摘要：疫苗上市后保护效果(Vaccine effectiveness,VE)评价是对疫苗在真实世界应用后预防控制疾病效果的流行病学评估。间接队列设计(Indirect cohort design,ICD)是一种利用疫苗针对疾病患者的疫苗接种史和感染病原体血清型的个体水平数据计算VE的方法,可以有效减少样本量、降低研究成本且具有较高可信度。本文对ICD的原理、在疫苗上市后VE评价中的应用、优势和局限性等方面进行了综述,旨在帮助研究人员更好地了解和合理运用ICD。

摘要：自身对照病例系列研究(Self-controlled case series study,SCCS)是一种只需要病例信息且以病例自身为对照,研究瞬时暴露与事件之间关联性的流行病学研究。SCCS最初用于评估疫苗安全性,可以比较快速地获得疫苗与不良事件之间的潜在因果关联。本文总结了SCCS的原理、研究设计和常见问题的解决思路。

摘要：传染性疾病样本是开展传染性疾病流行病学、疾病发生发展、临床诊断和治疗、药物筛选和疫苗研发等研究工作的重要基础性科技资源.通过顶层设计、统筹规划、依法合规、系统规范建设传染性疾病样本资源库,健全完善样本采集、检测、保藏、利用等单位间资源共建共享机制,形成连续、协同、整合的传染性疾病样本资源保藏体系,最大程度保护和有效利用这些珍贵资源,不仅对于传染性疾病科研、防控等工作至关重要,更关系国家生物安全.

摘要：目的通过优化启动子、终止子、信号肽及胞内序列末端氨基酸来增加SARS-CoV-2 S-EABR蛋白在293T细胞系中的分泌性表达。方法首先构建四种含有不同元件(启动子和终止子)组合的PCDNA3.1(-)真核载体质粒(Mb、MS、Ab、AS),插入按照人密码子优化的S-EABR-1目的序列,瞬时转染293T细胞,48 h后收取细胞培养上清液和细胞裂解液,通过Western Blot和ELISA检测上清S蛋白的表达水平。然后选择表达最好的元件组合载体,插入S-EABR-1和S-EABR-2(于S-EABR-1尾部添加4个氨基酸——HSLP)目的序列,比较上清S蛋白的表达水平。最后基于上述表达效果最好的元件组合载体及插入目的序列,构建替换SARS-CoV-2 S蛋白原始信号肽的5种载体质粒(tPA,AZ,IFNα2,HSA,GLUC),比较上清S蛋白表达水平。同时利用计算机模拟SRP54亚基与信号肽核酸序列的分子对接,将对接分值(Docking Score)作为对接评价标准,预测两者的结合情况。结果在293T细胞中,Ab组合的载体分泌表达S-EABR水平最高,产量相较于Mb增加了125%。基于Ab组合载体,S-EABR-2序列表达分泌S-EABR的水平较S-EABR-1增加了约50%,进一步替换成HSA信号肽后的S-EABR表达分泌水平较S蛋白原始信号肽增加了约83%。此外,计算机模拟结果显示HSA与SRP54亚基的对接分值最高,为1505.861。结论通过真核表达元件(启动子、终止子和信号肽)及胞内序列的优化可进一步提高经密码子优化后的S-EABR在293T细胞中的分泌性表达。信号肽与SRP54亚基亲和力的计算模拟对接分值与S-EABR分泌表达水平基本吻合的结果也为后续提高目的基因分泌性表达的信号肽筛选提供了一种设计思路和筛选策略。

摘要：目的探讨儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后人巨细胞病毒感染的危险因素以及人巨细胞病毒感染对移植后免疫重建的影响。方法采用回顾性队列研究设计,将2020年1月至2022年3月在北京首都儿科研究所血液科接受allo-HSCT治疗的81例患儿纳入研究,并随访1年。采用实时荧光定量PCR方法检测患儿allo-HSCT后的人巨细胞病毒(HCMV)的阳性检出情况,采用多因素logistic回归模型分析导致HCMV感染的危险因素,并采用广义估计方程模型分析HCMV感染对接受allo-HSCT后患儿T细胞的影响。结果81例患儿年龄M(Q_(1),Q_(3))为5.1岁(10个月,13.8岁),男性50例(61.7%)。截至随访终点,共检出HCMV阳性50例,HCMV检出率为61.7%。多因素logistic回归模型结果显示,与移植后0~1级相比,2~4级aGVHD患儿HCMV感染风险较高[OR(95%CI)值:2.735(1.027~7.286)]。广义估计方程模型分析结果显示,移植后HCMV阳性患儿CD3+T细胞数量高于HCMV阴性组[RR(95%CI)值:1.34(1.008~1.795)];CD4^(+)T/CD8^(+)T细胞比值小于HCMV阴性组[RR(95%CI)值:0.377(0.202~0.704)];CD8^(+)T细胞数高于HCMV阴性组[RR(95%CI)值:1.435(1.025~2.061)];效应记忆型CD8^(+)T细胞数量高于HCMV阴性组[RR(95%CI)值:1.877(1.089~3.236)]。结论急性移植物抗宿主病可能是导致allo-HSCT后患儿感染HCMV的危险因素;移植后HCMV感染促进了记忆型CD8^(+)T细胞数量增殖,影响免疫细胞重建。