摘要：采用脱脂乳粉平板初筛法,从开菲尔粒中分离得到10株有明显水解圈的蛋白酶产生菌,对脱脂牛奶平板上透明圈/菌落直径比(HC)>2.00的KX-1、Kx-3、Kx-7三株菌通过时间-酶活曲线进行复筛,得到酶活最高(发酵30 h、酶活146.43 U/mL)的菌株Kx-7。利用单因素试验对培养基进行优化,在此基础上利用Plackett-Burman(PB)试验设计法对影响蛋白酶活性的重要因素进行筛选,结果表明果糖,酪蛋白和Triton X-100,3个因素对产酶影响显著。

摘要：目的:通过对嗜麦芽窄食单胞菌(Kx-7)的发酵培养基进行优化来提高蛋白酶活力。方法:首先利用单因素实验确定影响Kx-7产蛋白酶的碳源、氮源及表面活性剂的种类和浓度范围;在此基础上,应用Box-Behnken实验设计对影响蛋白酶活力的显著因素进行优化,最终建立了以蛋白酶活力为响应值的二次回归方程模型,获得了最适的Kx-7产蛋白酶发酵培养基。结果:具有显著效应的三个因素分别为D-果糖,酪蛋白和Triton X-100,三者最佳浓度分别19.15g/L、4.05g/L和5.1mL/L。优化后嗜麦芽窄食单胞菌Kx-7产酶酶活提高到324.56U/mL,比初始酶活146.43U/mL提高了1.2倍。结论:响应面实验优化了Kx-7发酵培养基,大大提高蛋白酶的产量,有望用于大规模生产。

摘要：以切达干酪的乳清为原料,采用浓缩结晶的方法分离乳糖,利用响应面优化结晶工艺。通过Box-Benhnken试验设计方法,在单因素实验的基础上,以结晶乳糖得率为指标,研究了结晶时间、结晶温度以及乳清pH因素及相互作用对得率的影响,得到了最佳的结晶工艺条件:结晶温度38.4℃、结晶时间24.7 h、乳清pH 5.1,此条件下,乳糖结晶得率达到最大值47.7%。

摘要：【目的】建立快速定性、定量检测益生菌产品中植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ的方法,为其实际应用提供参考。【方法】根据植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ与NCBI库中3株已知序列的植物乳杆菌全基因组序列差异,设计菌株特异性引物,进行菌株特异性PCR验证和定性检测;然后建立荧光定量PCR,并检测益生菌制品中菌株ST-Ⅲ含量。【结果】设计的引物具有良好的菌株特异性;经PCR扩增,含有ST-Ⅲ的检验样本出现预期特征条带,与预期目的片段(242bp)相近。建立的荧光定量PCR标准曲线方程为y=-3.369lgx+39.84,R2为0.9990,符合Real-time PCR定量的要求,其检测限为2.85×103CFU/mL。经检测,样品中植物乳杆菌ST-Ⅲ的数量分别为3.25×105、1.28×106、4.55×106CFU/mL。【结论】建立的植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ定性、定量检测方法快速灵敏、测定时间短,可以在实际生产中应用。

摘要：选择适用于婴幼儿配方粉的3株双歧杆菌作为研究菌株,通过设计不同的平板类型和培养方式来验证适用于以上3株双歧杆菌的最优计数方式。结果:双层平板(下层为20 mL MRS,上层为10 mL石蜡)可以无需厌氧培养箱即可实现对含动物双歧杆菌Bb-12、乳双歧杆菌Bi-07或乳双歧杆菌HN019产品的可靠计数,而且检测结果与厌氧培养箱法无显著差异。

摘要：单胺氧化酶(MAO)是体内具有代谢作用的一种黄素蛋白酶,单胺氧化酶在体内活性或含量的异常增高会导致精神和神经异常疾病,因而作为治疗此类疾病的MAO抑制剂(MAOIs)受到广泛关注。鼠李糖乳杆菌KF7在脱脂乳中发酵后的发酵液具有MAO抑制作用,为得到具有较高MAO抑制作用的发酵液,采用Box-Behnken响应面实验设计对鼠李糖乳杆菌KF7在脱脂乳中的发酵条件进行优化,并且选取接种量、培养温度、培养时间进行3因素3水平实验设计。通过结果分析得到较优的发酵条件:接种量3.29%,培养温度34.71℃,培养时间74.4 h,MAO抑制率理论值72.18%,验证值为71.98%。

摘要：雌马酚是大豆异黄酮重要的代谢终产物,由黄豆苷元在体内某些特定肠道菌的作用下代谢得到,具有较高生理活性。试验以提高菌株产雌马酚能力为目的,对前期分离得到的产雌马酚菌株HY-1,HY-2的培养基条件进行优化。以BHI培养基为基础,补充不同碳源、氮源、无机盐后,首先Plackett-Burman设计对培养基因素进行考察,确定乳糖、柠檬酸、硝酸钠产物雌马酚的提高有显著影响。利用最陡爬坡试验确定显著因素的最佳取值区域,采用Box-Benhnken中心组合试验设计及响应面分析确定最佳条件为BHI脑心浸液38 g·L-1,乳糖2.59 g·L-1,柠檬酸1.48g·L-1,硝酸钠1.26 g·L-1,硫酸铵1.25 g·L-1,磷酸氢二钾0.5 g·L-1,硫酸二氢钾0.4 g·L-1,L-半胱氨酸0.06 g·L-1,验证试验得到雌马酚质量浓度为1.47μg·mL-1,较未优化前提高了1.45倍。

摘要：文章讨论了不同稳定剂对于奶浆稳定性的影响,并以感官评分、膨胀率、融化率作为评价指标,在稳定性单因素实验的基础上,筛选出卡拉胶、微晶纤维素、瓜尔豆胶、刺槐豆胶4种稳定剂进行复配,并设计正交实验得到复配稳定剂的最佳配方为卡拉胶0.02%、刺槐豆胶0.05%、微晶纤维素0.15%、瓜尔豆胶0.05%,此条件下得到的软冰淇淋奶浆稳定性最佳,口感细腻,膨胀率和融化率俱佳,奶浆无分层,冰淇淋品质较高。

摘要：根据荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）促旋酶（gyrase）的B亚单位基因以及金属蛋白酶（apr）基因设计出两对引物，经过反应条件的优化，建立了用于荧光假单胞菌快速检测的双重聚合酶链式反应（PCR）方法，并对该体系进行评价。结果显示，Pseudomonas，zuorescens菌株经普通PCR扩增均可见2条特异性条带（384bp和194bp），而其它阴性对照菌株PCR扩增均为阴性。基于基因组DNA的双重PCR检测灵敏度为16．9fg／uL（3～4拷贝／uL），1．8CFU／mL的uHT牛奶样品（250mL）经增菌24h后用该双重PCR方法均可检出。本研究建立的双重PCR检测方法具有良好的特异性和灵敏度，能克服乳制品样品基质的干扰，可应用于乳制品中荧光假单胞菌的快速检测。

摘要：【目的】建立特异性检测植物乳杆菌的方法,排除近缘菌的干扰。【方法】利用SMM系统筛选植物乳杆菌种特异序列,根据特异序列设计引物进行不同乳制品的多重PCR检测。【结果】设计的7对引物具有良好的种特异性,其中3对引物可以排除戊糖乳杆菌和副植物乳杆菌的干扰,可扩增获得植物乳杆菌的特异条带101bp(引物LP-1和LP-2)、189bp(引物LP-5和LP-6)、378bp(引物LP-9和LP-10)。该方法的检测限为2.2×10CFU/mL。采用多重PCR检测与琼脂糖凝胶电泳图谱分析对自制含有各种乳酸菌酸奶产品、自然发酵产品及市售酸乳产品中植物乳杆菌进行定性检测,可以特异性检测出植物乳杆菌,准确区分植物乳杆菌的近缘菌株。【结论】该多重PCR方法成本低、步骤简单、耗时短、灵敏度高,具有特异性,可作为快速检测植物乳杆菌种的方法在生产中使用。