摘要：目的:观察利用小干扰RNA(siRNA)手段下调人胰腺癌BxPC-3、AsPC-1细胞中S100A4表达后对细胞凋亡、增殖、吉西他滨化疗敏感性的影响。方法:设计合成针对S100A4特异的siRNA转染人胰腺癌BxPC-3、AsPC-1细胞,以RT-PCR检测转染前后S100A4蛋白表达变化;转染前后BxPC-3细胞生长曲线检测BxPC-3、AsPC-1细胞增殖能力;TUNEL法检测转染前后细胞凋亡变化;MTT检测不同浓度吉西他滨对胰腺癌细胞半数抑制浓度(IC50)。结果:RT-PCR结果显示BxPC-3、AsPC-1细胞转染S100A4siRNA 48h后,S100A4mRNA表达明显下调;S100A4siRNA转染后BxPC-3、AsPC-1细胞增殖下降;TUNEL结果显示转染后凋亡明显增加;MTT结果显示,BxPC-3细胞对照组吉西他滨IC50为(9.95±0.34)mmol/L;阴性转染组吉西他滨IC50为(9.641±0.434)mmol/L;干扰组吉西他滨IC50为(1.182±0.175)μmol/L;AsPC-1细胞对照组吉西他滨IC50(64.15±3.41)mmol/L;阴性转染组吉西他滨IC50为(65.19±4.4)mmol/L;干扰组吉西他滨IC50为(1.962±0.113)mmol/L,P<0.05。结论:S100A4沉默后抑制胰腺癌细胞增殖、促进凋亡并提高吉西他滨化疗敏感性,提示S100A4可能是治疗胰腺癌的有效靶点。

摘要：目的:肝癌分子靶向治疗是目前研究的热点,肝癌相关基因mcl-1在肝癌增殖及凋亡中的作用尚不明确,本研究拟探讨mcl-1特异性siRNA对体外培养肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响。方法:设计、合成有效的mcl-1特异性siRNA序列,体外转染HepG2细胞;通过绘制细胞生长曲线和MTT实验检测mcl-1特异性siRNA对HepG2细胞增殖的影响;通过Annexin V/PI双标记流式细胞仪检测mcl-1特异性siRNA对HepG2细胞凋亡率的影响。结果:通过绘制细胞生长曲线发现,mcl-1特异性siRNA能够抑制HepG2细胞的增殖(P<0.05),MTT实验提示转染mcl-1特异性siRNA 24 h、48 h、72 h后,HepG2细胞存活率均显著下降(P<0.05);流式细胞仪检测分析发现,转染mcl-1特异性siRNA后Annexin V+/PI-细胞百分率显著增高(P<0.01),提示mcl-1具有促进HepG2细胞凋亡的作用。结论:Mcl-1蛋白具有促进肝癌细胞增殖,抑制肝癌细胞凋亡的作用,这种分子特性符合肿瘤靶向治疗的要求,Mcl-1可能成为肝癌靶向治疗的潜在靶点。