摘要：目的初步探讨自制套管单孔后腹腔镜肾上腺肿瘤切除术的可行性和安全性。方法 2010年1月-2012年11月,对21例肾上腺肿瘤患者行单孔后腹腔镜下解剖性肾上腺肿瘤切除术。男14例,女7例,平均43（19-56）岁,平均体质量指数23.4 kg/m2;均为腹膜后入路。结果瘤体直径1.5-4.0 cm,左侧8例,右侧13例;无功能皮质腺瘤4例,醛固酮瘤13例,肾上腺囊肿2例,淋巴血管瘤1例,嗜铬细胞瘤1例。21例手术均顺利完成,无中转开放及转为标准腹腔镜手术,手术时间（92.8±21.6）min,出血量（64.3±11.3）mL,术中无并发症发生,术后第1天疼痛评分0-3分,未用镇痛剂,术后平均住院时间4 d,短期随访无术后并发症发生,醛固酮瘤患者血钾均恢复至正常范围,2例血压下降但仍需服用降压药物。结论采用自制套管行单孔后腹腔镜下解剖性肾上腺肿瘤切除术具有安全、有效及操作方便等优点,具有良好的应用前景。但具体收益尚需更进一步的来自良好实验设计的数据来论证。

摘要：目的:构建膜-细胞骨架联接蛋白Ezrin基因特异性短发卡RAN表达载体(small hairpin RNA,shRNA),探讨其对肾癌细胞株786-0细胞凋亡、增殖的影响。方法:以Ezrin为靶基因,以Pgenesil-1质粒为载体,设计和构建重组体,设计2条发夹式RNA(shRNA),合成后克隆入载体Pgenesil-1,扩增并中量提取质粒,应用脂质体Lipofectamine 2000转染进786-0细胞,重组质粒转染786-0肾癌细胞株,用运实时荧光定量PCR进行筛选鉴定,筛选出抑制率较高的重组质粒载体shRNA-Ezrin1,用shRNA-Ezrin1转染786-0细胞,采用MTT、流式细胞仪、电镜检测,观察RNA干扰Ezrin后肾癌细胞株786-0细胞增殖能力的改变。结果:shRNA干扰后786-0细胞增殖活性减弱,G0/G1时段明显延长(P<0.01),PI缩短(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.01)。结论:Ezrin与肾癌细胞凋亡、增殖有关,有望成为肾癌基因治疗的一个新靶点。

摘要：目的比较普通聚合酶链反应(PCR)与降落聚合酶链反应(Touchdown PCR,TD-PCR)在临床医学科研中的价值。方法以人类外周血基因组DNA为模板,设计VHL基因3个外显子的3对引物,根据普通PCR及TD-PCR原理设计包括3个外显子片段在内的PCR程序,通过试验选择PCR最佳反应条件,在同一程序中分别对3个片段进行扩增,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,纯化后PCR产物测序分析两种试验方法的差别。结果电泳检测及纯化后DNA产物测序分析均显示TD-PCR扩增产物条带特异性、效率较普通PCR扩增产物高。结论成功建立了TD-PCR方法,TD-PCR方法较普通PCR更为高效实用,为临床基因突变筛查研究提供了快速可靠的手段。