摘要：目的·探讨RNA干扰技术(RNAi)沉默人肝癌HepG2细胞中高尔基体蛋白73(GP73)基因表达后,对细胞迁移和侵袭能力的影响。方法·应用阳离子脂质体法将设计合成的GP73小干扰RNA(siRNA)瞬时转染HepG2细胞。HepG2细胞分为空白对照组、阴性对照组和GP73 siRNA干扰组。各组培养48 h后,采用实时定量PCR(qRT-PCR)和ELISA法检测转染后HepG2细胞中GP73 mRNA和蛋白表达水平变化,Transwell迁移实验、划痕愈合实验及侵袭实验分别观察迁移和侵袭能力改变,qRTPCR和Western blotting法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的表达情况。结果·GP73 siRNA能显著降低HepG2细胞中GP73 mRNA和蛋白的表达,转染后细胞的迁移和侵袭能力明显下降,其MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达水平均明显降低。结论·siRNA干扰介导GP73基因沉默可抑制人肝癌HepG2细胞的迁移和侵袭,其机制可能与下调MMP-2和MMP-9的表达水平有关。

摘要：目的系统评价免疫营养应用于急性胰腺炎患者治疗中的效果。方法计算机检索EMBASE、PubMed、循证医学图书馆（CochraneLibrary）、中国知网（CNKI）、维普网（VIP）、万方数据库、中国科学引文数据库（CSCD）等数据库，检索时间为各数据库建库至2014年10月。2名研究者按照事先制订的纳入标准提取数据后，应用RevMan5．3软件进行Meta分析。计数资料采用相对危险度（RR），计量资料采用均数差（WMD），当资料的测量方法或计量单位不同时，则采用标准差（SMD），并分别取各自对应95％可信区间（凹），以P〈0．05为差异具有统计学意义。结果最终纳入符合标准的随机对照研究共16篇，740例患者，但其中大部分研究质量低，也存在明显异质性。Meta分析结果显示，免疫营养可降低患者住院期间感染性并发症的发生率（RR=0．71，95％CI：0．57—0．89，P=0．003），降低急性胰腺炎患者住院期间的病死率（RR=0．52，95％CI：0．32—0．86，P：0．010），缩短住院时间（WMD=-2．38，95％CI：-4．04～-0．73，P=0．005），同时C反应蛋白浓度亦降低（SMD：-0．28，95％CI：-0．55～-0．01，P=0．04）。结论本研究结果表明免疫营养可能降低急性胰腺炎患者住院期间感染性并发症的发生率和病死率、缩短住院时间。但因纳入研究的设计方法、数据库管理信息及质量等存在许多问题，本分析不能作为免疫营养临床疗效证据，其确切疗效有待高质量临床研究报告进一步深入探讨。

摘要：目的 探讨MHC-Ⅱ类基因在高容量血液滤过治疗多器官功能障碍综合征中的作用.方法 建立二次打击猪MODS模型.19只雄性家猪随机分为实验组（HF组,n=10）和对照组（M组,n=9）.M组给予失血性休克、再灌注损伤、内毒素血症复合因素造模;HF组在模型建立后给予高容量血液滤过.观察7 d后处死存活动物,取脾组织用Trizol法提取总RNA.设计SLA-DQA（猪MHC-Ⅱ类基因）引物序列,逆转录构建cDNA,用实时荧光定量PCR（Real Time PQ-PCR）检测SLA-DQA mRNA的表达量.UVP计算机图像分析系统绘出标准曲线.结果 HF组动物死亡率为2/10;有2例发生MODS,发生率为2/10.M组SLA-DQA mRNA拷贝数为（1.110±0.496）×103,HF组拷贝数为（2.859±0.755）×103,P=0.045,两组相比有显著性差异.结论 MODS模型复制满意,HVHF治疗后动物的MODS发生率和死亡率下降.MHC-Ⅱ类基因滤过后表达上调,可能与反式转录因子（CⅡTA）的调控和TNF-α、IL-10等多种细胞因子的释放有关.

摘要：脾切除术在普通外科作为最常见的手术之一，一般情况下已无技术性困难。传统托出式脾切除术（TS）主要针对脾外伤设计，但对于严重的粘连脾脏，原位脾切除术（OS）与TS比较具有一定的优势，我们总结2010年4月至2013年10月兰州大学第二医院普外科收治的行TS和OS的患者临床资料及经验，现报道如下。

摘要：目的探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)Val762Ala的单核苷酸多态与临夏回族自治州回族人群胃癌易感性的关系。方法采用病例-对照研究设计,研究对象为临夏回族自治州居民(20岁以上,居住满20年以上,3代无族外通婚)。分两组:胃癌组200例,均经组织学确诊。对照组210例,按年龄、性别进行匹配的无肿瘤史的健康回族志愿者。抽提血液DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)进行基因分型。使用ELISA(enzyme-linkedimmunosorbent assay)法检测血浆中***的IgG抗体,以检测研究对象是否有***感染。用SPSS 13.0统计软件分析试验结果。结果 PARP-1 762Val/Ala+Ala/Ala在胃癌组显著增高(OR:2.158,95%CI:1.404～3.315,P=0.020)。交互作用分析显示:家族史阳性的Val/Ala+Ala/Ala基因型患胃癌的风险是家族史阴性的Val/Val基因型的4.125倍(OR:4.125,95%CI:2.117～8.038,P=0.000);食腌菜的Val/Ala+Ala/Ala基因型患胃癌的风险是不食腌菜的Val/Val基因型的3.814倍(OR:3.814,95%CI:2.150～6.766,P=0.000);***感染阳性的Val/Ala+Ala/Ala基因型患胃癌的风险是***感染阴性Val/Val基因型的4.085倍(OR:4.085,95%CI:2.197～7.597,P=0.000)。结论 PARP-1 Val762Ala单核苷酸多态与临夏回族自治州回族人群胃癌易感性增高相关。PARP-1 Val/Ala+Ala/Ala基因型分别与家族史、食腌菜、***感染在胃癌的发病风险中存在着加乘交互效应。

摘要：目的 分析2009至2013年我国西北五省（自治区）17家医院收治的胆囊癌患者临床特点.方法 采用统一设计的西北五省胆囊癌患者临床资料调查表,回顾性收集和分析西北五省17家三级医院2009年1月至2013年12月收治的2 379例胆囊癌患者的资料.采用Epi Data软件进行资料录入和核查.计数资料组间比较采用x2检验.结果 （1）17家医院近5年收治的胆囊癌患者占同期胆道疾病患者的1.6％ ～6.8％,平均2.7％;占普通外科疾病的0.4％～0.9％,平均0.7％.（2）胆囊癌好发于老年女性,男女比例为1.0∶2.1;发病平均年龄为（64±11）岁,农民较其他职业人群高发（x2=147.10,P＜0.01）.（3）57.2％的胆囊癌患者合并胆囊结石.（4）胆囊癌的病理类型以中低分化腺癌为主,恶性程度较高.就诊时TNMⅣ期病例占55.1％,晚期病例居多是导致预后较差的重要原因之一.（5）本组患者手术根治性切除率为30.4％.结论 胆囊癌病例中以老年女性和中晚期患者为主.对于高危人群,应采用超声等影像学手段进行普查及定期随访,以提高胆囊癌的早期诊断率,并采取手术治疗为主的综合治疗方法,改善患者的预后.

摘要：目的:探讨血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)在肿瘤细胞生长中的作用.方法:根据人VEGFR-3mRNA编码序列,设计3个RNA干涉靶点,构建siRNA表达载体,并转染到LoVo细胞中,应用半定量RT-PCR检测基因转染前后VEGFR-3mRNA表达水平的变化,采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTT)观察细胞生长变化,并应用流式细胞计数仪分析细胞凋亡的情况.结果:针对VEGFR-3基因的siRNA表达载体成功构建,psiRNA-VEGFR-3可显著抑制LoVo细胞中VEGFR-3基因的表达,转染psiRNA-VEGFR-3细胞生长明显抑制,并可诱导LoVo细胞出现凋亡.结论:psiRNA-VEGFR-3载体能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,下调VEGFR-3基因的表达可以抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.

摘要：目的构建靶向血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(psiRNA-VEGFR-3),并观察其抑制人结肠癌细胞株LoVo细胞中VEGFR-3基因表达的效果及生物学效应。方法设计并合成1对VEGFR-3编码基因的反向重复序列,定向克隆至载体pSUPER,构建siRNA真核表达载体,利用脂质体2000将构建的psiRNA-VEGFR-3载体转入LoVo细胞中,应用半定量RT-PCR检测基因转染前后VEGFR-3mRNA表达水平的变化,四甲基偶氮唑蓝法观察细胞生长变化、凋亡率及细胞周期的变化。结果成功构建针对VEGFR-3基因的siRNA表达载体。psiRNA-VEGFR-3可显著抑制LoVo细胞中VEGFR-3基因的表达(P<0.01);转染psiRNA-VEGFR-3后能够诱导LoVo细胞发生明显凋亡。结论psiRNA-VEGFR-3载体能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,通过下调VEGFR-3基因表达可以抑制细胞增殖,诱导LoVo细胞发生明显凋亡。

摘要：目的了解我国ERCP培训工作的现状。方法在专业调研网站上建立问卷调研，设计问题48道，涉及基本信息、培诽信息、开展ERCP工作情况、对培训的建议等。调研对象是曾在国内任何内镜中心接受过ERCP专项培训且培训结业已超过1年的医生，调研采用非署名方式。结果共有464人参加调查，其中362人完成全部问题，含盖中国大陆各地区，超过2／3的受调查者评价培训内容充足，反映经培训后ERCP的操作例数大幅增加和增加的人数分别占27．4％和64．3％，根据相关指标推算出能胜任常规ERCP工作的占84．5％，其中十分出色者占12．2％。结论本项调研显示我国ERCP培训工作近年来已取得了长足进步，但仍存在准入标准不一、培训周期过短、课程不够系统、缺乏规范化评估与跟踪机制等不足。

摘要：目的探讨不同浓度血管内皮生长因子受体-3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人结肠癌细胞生长和侵袭力的影响。方法设计合成VEGFR-3siRNA,以不同剂量转染到人结肠癌细胞株(human colon adenocarcinoma cell line,LoVo)细胞中,采用四甲基偶氮唑蓝显色法[3-(4,5 dimethl-2 thiahiazoyi)-3,5-di-phenyl-tetrazolium bromide,MTT]观察细胞生长变化,应用半定量逆转录聚合酶链反应、Western-blot检测转染前后VEGFR-3 mRNA和VEGFR-3蛋白表达的变化,基质黏附实验检测细胞转染后黏附能力,体外侵袭试验检测转染后肿瘤细胞侵袭性的改变。结果 VEGFR-3 siRNA引起LoVo细胞生长抑制,在一定范围内呈浓度、时间依赖性;转染siRNA后VEGFR-3 mRNA和VEGFR-3蛋白表达下降;转染siRNA 72 h后LoVo细胞的黏附能力显著下降,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);VEGFR-3 siRNA使LoVo细胞侵袭能力明显下降,LoVo细胞穿膜细胞数明显低于空白对照组、非特异性对照组(P <0.05)。结论 VEGFR-3siRNA能够在LoVo细胞中引发RNA干扰效应,下调VEGFR-3基因的表达可以抑制细胞增殖,使LoVo细胞黏附力和侵袭能力明显下降。