摘要：目的研究低压低氧暴露条件下肺动脉高压(HPH)模型大鼠循环microRNA(miRNA)表达的变化。方法利用基因芯片技术定量检测、分析HPH组及对照组大鼠血清中潜在的循环miRNA的表达及其差异。基于病例-对照设计,采用荧光定量PCR技术对差异化表达miRNA进行验证。受试者工作特征曲线(ROC)分析测试4种差异化表达miRNA对HPH组及对照组的鉴别效能。结果与对照组比较,HPH组大鼠13种miRNA表达上调,10种miRNA表达下调,其中,荧光定量PCR初步证实miR-451、miR-505及let-7d表达上调,而miR-214表达下调。ROC分析结果显示,miR-451、miR-505及let-7d用于鉴别HPH组大鼠和对照组大鼠的曲线下面积(AUC)分别为0.979、0.938和0.993。结论低压低氧暴露条件下HPH组大鼠与对照组大鼠循环miRNA的表达存在显著差异,提示血清miRNA差异化表达可能与HPH病理变化相关。

摘要：目的研究载脂蛋白M(Apo M)基因多态性与兰州地区汉族人群类风湿性关节炎(RA)、系统性红斑狼疮(SLE)和强直性脊柱炎(AS)等疾病易感的相关性。方法针对Apo M基因的2个单核苷酸多态性(SNP)位点rs805296和rs805297设计引物,建立聚合酶链式反应-高分辨率融解曲线分析(PCR-HRM)基因分型方法,对599例RA、194例SLE、179例AS患者和273例健康对照进行病例对照研究,分析其与风湿性疾病易感的相关性。结果 rs805296位点在RA组、SLE组、AS组和健康对照组的基因型频率分别为AA 87.0%、AG 12.7%、GG 0.3%;AA 84.5%、AG 15.0%、GG 0.5%;AA 91.6%、AG 7.3%、GG1.1%;AA 85.0%、AG 15.0%、GG 0%。rs805297位点在RA组、SLE组、AS组和健康对照组的基因型频率分别为GG 38.2%、GT 51.8%、TT 10.0%;GG 44.3%、GT 45.4%、TT 10.3%;GG 37.4%、GT 47.5%、TT 15.1%;GG 40.7%、GT 46.1%、TT13.2%。统计学分析发现只有rs805296位点的基因型分布仅在AS组与健康对照组之间有明显差异,在显性模型下,rs805296位点G基因携带者(杂合突变型AG和纯合突变型GG)患AS的风险明显降低。结论本研究建立的PCR-HRM基因分型方法能够成功实现rs805296和rs805297位点的临床标本分子诊断,并发现rs805296位点与兰州地区汉族人群AS易感密切相关。

摘要：目的:规范血液分析后标本的存档,以提高工作效率,保证复检结果。方法:以有机玻璃钢作为结构件,利用医院检验信息系统(LIS)资源,使用条形码系统和PIC单片机等电子技术,用条形码作为识别编号,插孔位置代码与之自动关联写入或者删除记录,跑马灯指示位置,指引标本位置,帮助操作者快速、准确找到标本。一次性塑料保鲜薄膜留住了标本的水分,防止相互感染。结果:经过样机试用,采纳了操作者建议,优化程序,最终获得了操作者的认可。结论:通过对分析后血液标本的存档现状的研究,整合现有资源,悉心听取一线操作者的意见,最终完成产品设计,解决了工作中的实际问题,且该产品已经获得国家专利授权。

摘要：1生物合成新技术概述合成生物学将工程设计原则合理地应用于分子生物学、新的基因装置设计,在疾病的诊断和治疗的领域发挥作用[1],如,创建全细胞生物传感器[2],基因修饰益生菌[3]以及细胞生物分子加工厂。源自基因工程的生产细胞系基础上,生物合成已成为药品生产[4]、蛋白质疗法[5]、燃料及其他产品[6]的主流技术。

摘要：目的在我国开展多中心的过敏性疾病患者对猫狗马皮屑的致敏分布特征调查, 为诊治与预防过敏性疾病提供常见动物过敏原的流行病学数据。方法采用流行病学调查研究设计, 依托于由广州医科大学附属第一医院牵头开展的全国过敏性疾病流行病学调查项目, 于2021年1至12月在广州医科大学附属第一医院等14家单位的呼吸科、儿科及变态反应科门诊中共纳入2 122例诊断为过敏性疾病患者, 同期从上述单位体检中心纳入222例健康受试者作为对照。所有纳入的受试者在医生指导下进行填写过敏性疾病调查问卷, 并采用磁微粒化学发光系统检测所有受试者的猫狗马过敏原特异性免疫球蛋白E(sIgE)。分析3种动物过敏原在不同疾病、不同年龄和不同地区之间的流行病学特征。使用χ2检验分析组间频率差异, 采用t检验或Mann-WhitneyU检验两组间的分布差异, 以及采用单因素方差(ANOVA)分析或Kruskal-WallisH检验比较多组间的分布差异。并绘制条形图、韦恩图和雷达图展示致敏分布特征。因受试者漏填而产生的极少数缺失值在分析过程中已被剔除。结果 2 122例过敏性疾病患者中男性占57.35%(1 217/2 122), 女性占40.95%(869/2 122), 存在1.70%(36/2 122)例患者的性别信息缺失。过敏性疾病患者的年龄为9.0(6.0, 28.0)岁, 而健康对照组的年龄为29.0(13.0, 39.0)岁, 并分别存在1.7%(36/2 122)和0.9%(2/222)例受试者的年龄信息缺失。过敏患者组剖腹产的比例明显高于健康对照组(31.4%vs. 17.6%, χ2=16.582, P<0.001)[患者组和对照组分别存在2.5%(54/2 122)和5.4%(12/222)例样本的出生方式信息缺失]。过敏性疾病患者报告父母双方均患过敏性疾病的比例显著高于对照组(35.7%vs. 9.5%, χ2=65.171, P<0.001)。总体上16.4%的过敏性疾病患者对猫皮屑致敏, 10%和6%对狗和马皮屑致敏。猫皮屑在鼻炎、哮喘、结膜炎、食物过敏和特应性皮炎患者人群中的致敏率最高, 为16.4%~21.6%, 狗皮屑次之, 为10.2%~15.2%。不同的动物致敏人群中, 均以过敏性鼻炎的患病率最高。猫狗马过敏原同时致敏的比例在10%~15%之间, 任意两种或以上动物皮屑同时致敏的比例约为45%。动物过敏原与呼吸道过敏性疾病相关, 尤以过敏性鼻炎合并过敏性结膜炎最常见。不同地区3种动物过敏原致敏率分布存在明显差异, 全国各省份中均以猫皮屑的致敏率最高。结论动物皮屑过敏原的致敏率显著上升, 并以儿童和青少年最高。猫皮屑是最常见的动物源性过敏原, 其次为狗。不同的动物之间由于其高度的同源性而表现出明显的交叉或共同致敏。

摘要：目的 构建同时携带白细胞介素2（IL-2）和NK4基因的真核表达载体（pIRES-IL-2-IRES-NK4）,观察其在防治肿瘤中的潜在应用前景.方法 根据Pubmed上公布的IL-2及NK4 mRNA序列,设计扩增IL-2及NK4 cDNA的特异性引物,以PBV220-IL-2质粒和PCAGGS/hNK4质粒为模板,分别扩增IL-2及NK4基因,并将IL-2及NK4基因分别克隆在真核表达载体pIRES-SEQ的XhoI、MLuI位点和SalI、NotⅠ位点.获得同时携带IL-2和NK4基因的重组真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4.该重组质粒转染肝癌细胞HepG2后,检测目的基因的转染表达及表达产物对HepG2细胞增殖的影响.结果 通过对构建质粒克隆进行测序及酶切,证实携带IL-2和NK4双基因的真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4构建成功.用pIRES-IL-2-IRES-NK4转染HepG2细胞后24 h后在荧光显微镜下可观察到细胞有较强的绿色荧光表达,48 h时荧光更强;逆转录聚合酶链反应结果表明转染pIRES-IL-2-IRES-NK4质粒细胞的IL-2及NK4基因表达明显增强.酶联免疫吸附测定检测结果表明,转染组细胞较对照组细胞培养上清中IL-2及NK4蛋白表达水平明显增强.转染组48 h后的IL-2、NK4蛋白表达水平为2.139、1.956 mg/L,明显高于未转染组的0.492、0.620 mg/L.四甲基偶氮唑盐法结果表明转染真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4的细胞表达上清,有明显抑制肝癌细胞HepG2增殖的活性,且有剂量效应关系.结论 本研究成功构建了同时携带IL-2和NK4基因的重组真核表达质粒pIRES-IL-2-IRES-NK4,该质粒可有效转染肝癌细胞,且转染细胞表达上清有明显抑制肝癌细胞HepG2增殖的活性,提示该重组质粒有潜在防治肿瘤的应用前景.

摘要：目的建立一次实验就能检测出同一样品中的多个病原细菌的基因芯片。方法检索相关细菌的16 s rRNA序列,使用生物信息学软件针对每个细菌的四个可变区设计出4条寡核苷酸探针并制成基因芯片;利用此芯片对6种临床常见病原细菌进行检测。结果6种临床常见病原细菌的检测结果中除铜绿假单胞菌两条探针较弱外,其余5种均能正确与自己的探针杂交,并且混合样品检测结果达到了预期的目标。结论利用寡核苷酸芯片系统实现病原菌通用检测是完全可行的,对部分实验菌株进行初步考核,具有理想的特异性和灵敏度,可以进一步用于临床标本的检测。