摘要：利用响应面法对Cl／top／1uspasseckerianus进行发酵培养条件优化。首先通过Plackett-Burman设计两水平实验对8种发酵条件进行筛选，得列葡萄糖和大豆油含量为主要影响因素。再根据中心复合实验设计，对葡萄糖含量和火豆油含量进行响应面优化，得到最优培养条件为葡萄糖5．0％、大豆油0．33％、酵母粉0．6％、玉米浆3．0％、MgS040．035％、CaCO30．05%、初始pH6．9、装量50mL／500mL△，产量为24．75mg／mL，在原培养基基础上提高53．7％。

摘要：本实验采用PCR方法，设计了不同的引物对，以pPIC9k质粒为模板，分别扩增出大小为2．0kb、1．5kb、1．0kb、750bp、500bp、250bp的DNA片段，经混合后所制备的DNA Marker条带较为清晰，分布均匀，可用于标志DNA大小。

摘要：目的构建可以高效稳定表达核酸酶NucB的工程菌株。方法以大肠杆菌DH5α(DE3)为材料,采用基因编辑的方法将其中的必需基因lexA敲除,重新设计一个带有lexA基因的质粒进行基因回补,从而得到工程菌株DH5α(DE3)ΔlexA,再将带有目的基因nucB的质粒转入基因改造后的菌株中发酵培养生产核酸酶NucB并测定功能。结果经过基因改造后的大肠杆菌DH5α(DE3)ΔlexA与未经基因改造的大肠杆菌对比显示:改造后的菌株质粒非常稳定,蛋白表达量高且发酵过程中可以不用添加抗生素来生产核酸酶NucB。结论以基因编辑的方法成功构建一株无抗生素、高效稳定表达核酸酶NucB的工程菌株DH5α(DE3)ΔlexA。