摘要：为克隆扁果枸杞(Lycium barbarum Bianguo)肌动蛋白基因作为基因表达模式分析的内参基因,根据几种茄科植物肌动蛋白氨基酸序列保守区设计引物,以扁果枸杞3周龄叶总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增肌动蛋白基因片段并连接到p MD18-T载体上,阳性克隆经PCR检测后测序。结果表明,该基因片段长598 bp,编码198个氨基酸,与枸杞(Lycium chinense)核苷酸序列的相似度和同源性分别达97%和100%,说明是肌动蛋白基因片段,命名为Lb ACT。荧光定量PCR分析表明,盐处理下Lb ACT基因在各器官中的Ct值稳定,可作为内参基因用于研究扁果枸杞功能基因的表达模式分析。

摘要：基因工程人胰岛素作为第一个基因工程药物，自其使用以来解决了许多糖尿病人的疾苦。其后开展的一系列基因工程人胰岛素突变体的研究，发现了一些或长效或速效或高活性的突变体，丰富了治疗用胰岛素的类型。本文根据NCBI数据库中人胰岛素原的一级结构与三级结构模型，设计了-C肽被缩短至4个氨基酸残基（GPGA）的胰岛素突变体，期望该短连接肽在不去除的情况下维持胰岛素活性。依据大肠杆菌K12的密码子偏好性，设计了适宜大肠杆菌表达的该突变体的基因序列。利用套叠PCR方法扩增并克隆了该突变体基因。核苷酸序列测定结果表明，所克隆的突变体基因与设计的核苷酸序列存在2个碱基差异，但是氯基酸序列保持一致。

摘要：数控加工技术实验是机械类专业的必修实践环节,能够综合训练学生的操作技能,培养能解决实际问题的复合型应用人才。实验教学改革以满足数控加工技术课程的教学目标为前提,从理论与实践相融合的角度出发,结合线上到线下的教学过程,采用个人到小组的学习模式,将校企合作背景下的企业真实零件作为实验加工任务,设计了数控车削加工实验,并将其作为改革应用试点。四维共促发展的实验教学模式,在提高教学质量的同时,满足企业的人才需求。

摘要：目的:研究秃疮花中提取异紫堇碱的最佳工艺条件及采用大孔吸附树脂分离纯化异紫堇碱的方法。方法:采用正交试验设计,优化异紫堇碱的提取工艺;通过静态吸附/解吸附试验筛选最佳吸附异紫堇碱的大孔树脂。结果:最佳提取条件为:料液比1∶15(g/mL)、1%的酸水溶液为溶剂,提取时间1h×3次;LX28树脂为最佳吸附树脂。结论:采用最佳试验条件提取秃疮花,异紫堇碱得率可达0.88%;提取液经LX28树脂分离纯化,得到质量分数为85.34%的异紫堇碱,产率达68.64%。

摘要：为解决多晶体材料结构的可视化,设计Voronoi增量式外存算法,开发了多晶体材料微结构的"海量"级仿真技术,获得了数值化的晶粒几何信息数据。利用OpenGL图形接口,实现了一般多晶体及表层晶粒细化多晶体材料微结构的可视化仿真,并在此基础上采用Bunge符号的级数展开法模型,计算了各个晶粒的取向分布函数(ODF),实现了取向分布函数值在取向空间内与实际晶体取向分布的一一对应;开发了软件ProDesign,为三维多晶体材料微结构的力学响应计算提供了基础性仿真工具,为识别"材料结构弱点"、评估微裂纹(群)的启裂及扩展、推演"微结构虚拟失效"行为搭建了支撑性平台。

摘要：草莓镶脉病毒（SVBV）是侵染草莓的主要病毒之一，可导致草莓品种退化、果实产量及品质均下降。防止SVBV危害的第一步是建立检测该病毒的方法。聚合酶链式反应（PCR）在检测病原物方面具有灵敏、快速、操作简单、专一性好等优越性。本文通过检索已有SVBV的PCR检测文献和专利，设计了一对新的、检测SVBV外壳蛋白基因的引物F1／R1。Oligo7和NCBI数据库检索均对该对引物的专一性给出了高值。以实际草莓样品总DNA进行的扩增实验结合扩增片段的核苷酸序列测定肯定了该对引物检测SVBV的灵敏度（可低至26pg／μL）、专一性（始终无杂带出现）和准确性（核苷酸序列测定为SVBV外壳蛋白基因序列）。本文以此对引物所做的检测发现，甘肃省永靖县草莓种植地的草莓样品中有3份被SVBV感染。最后，以此特有引物FI／R1为基础，组合了一款快速检测SVBV的试剂盒。

摘要：【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建白三烯A4水解酶(leukotriene A4 hydrolase,LTA4H)基因缺失的猪肾细胞系(porcine kidney-15,PK-15),探究LTA4H对口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)复制的影响,为开展LTA4H功能研究及调控病毒复制机制研究提供理论依据。【方法】设计2条针对猪LTA4H基因的引导RNA(small guide RNA,sgRNA),分别构建至载体pX459-puro-MCS中;将CRISPR重组质粒转染PK-15细胞,用嘌呤霉素(puromycin)抗生素筛选,并通过有限稀释法筛选单克隆细胞,之后通过Western blotting和测序检测LTA4H基因的敲除,获得LTA4H基因功能缺失细胞系。使用Western blotting、RT-qPCR及病毒滴度测定等方法检测敲除LTA4H基因后对FMDV复制及相关蛋白的表达情况。【结果】获得的单克隆敲除细胞系与野生型细胞相比,能够显著抑制FMDV复制。【结论】本研究成功构建了LTA4H基因敲除的PK-15细胞系,证明LTA4H对FMDV的复制具有促进作用,研究结果为后续LTA4H功能研究提供理论依据。

摘要：为了获取酒糟中的纤维素,采用超声波辅助碱提法进行提取。以纤维素得率为评价指标,探讨KOH溶液质量分数、浸提温度和超声波时间对纤维素提取效果的影响。通过响应面试验设计进行超声辅助碱法提取纤维素的工艺优化研究。结果表明:在KOH溶液质量分数为10%、浸提温度为58℃和超声波时间为10min条件下,酒糟中纤维素得率为42.21%,说明采用超声波辅助碱法分离纤维素的工艺是可行的。

摘要：采用超声波辅助碱法从白酒糟中提取半纤维素A,通过响应面试验设计探讨KOH溶液质量分数、浸提温度和超声波时间对提取得率的影响,优化提取参数。结果表明:在KOH溶液质量分数为7%、浸提温度为58℃和超声波时间为21min条件下,酒糟中半纤维素A得率为37.17%,说明采用超声波辅助碱法分离半纤维素A的工艺可行。

摘要：分子生物学是生命科学中的前沿科学,多媒体教学手段的运用,在医学分子生物学教学中占有重要地位。在运用多媒体教学手段的过程中,要注重教学内容的科学性、课堂教学的互动性、多媒体课件制作的艺术性和培养学生的创新思维和应用知识的能力。加强互联网资源的运用和人机互动,提高分子生物学教学质量,适应生命科学和医学研究发展的需要。