摘要：目的响应面法优化高压均质破碎重组汉逊酵母细胞的工艺条件。方法以均质压力(A)、均质次数(B)、均质酵母质量分数(C)3个因素为影响因素,酵母细胞破碎率(Y)为响应值,应用Design-Expert软件,根据Box-Behnken中心组合试验设计方案,用响应曲面法建立二阶数学模型,确定最佳破碎工艺参数,基于二次多项式回归模型建立设计空间,并进行规模化工艺验证。结果方差分析结果显示,模型P0.05,表明模型与检测结果拟合较好。最终获得的操作空间为:均质压力1125~1200 bar,均质次数3~4次,均质酵母质量分数12%。3批重组汉逊酵母细胞发酵液中酵母细胞破碎率均达到65%以上,该值在响应值设计空间范围内。结论响应面法优化的高压均质破碎重组汉逊酵母细胞的工艺具有较好的稳健性和适应性。

摘要：目的基于质量源于设计(quality by design, QbD)理念,确定伤寒沙门菌(Salmonella typhi)中试规模(200 L)的培养工艺。方法运用QbD通过分析伤寒沙门菌培养工艺核心指标、培养过程,以确定对核心指标可能产生影响的因素。采用单因素试验对pH控制值、溶氧控制值和补料方式等进行考察,通过中试规模(20 L)培养工艺桥接和中试规模(200 L)培养工艺的放大,分析中试规模培养条件及发酵液中伤寒Vi荚膜多糖含量等。结果连续培养了6批次200 L规模发酵液,培养8 h时发酵液中伤寒Vi荚膜多糖含量均≥43.33μg/mL(期望值);培养条件:(1) pH控制值为7.2;(2)溶氧控制值为35%;(3)补料方式为培养初始补加葡萄糖溶液使其质量浓度为3 g/L,培养过程中补加葡萄糖溶液使其质量浓度保持在1~3 g/L。结论通过分析200 L规模培养过程监测数据,成功在中试规模(200 L)完成伤寒沙门菌培养工艺放大。