摘要：本研究旨在获得重组牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)G蛋白并对其进行反应原性鉴定。从NCBI上找出G基因的核苷酸序列,分析其抗原区域,利用Primer Premier 5.0软件设计1对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增BRSV G基因片段,将目的片段连接到克隆载体pMD19-T后,对其进行双酶切鉴定和测序。将双酶切后的目的片段进行胶回收,构建重组质粒pET-32a-G,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用Ni-IDA亲和层析法纯化经IPTG诱导表达的蛋白,并测定其浓度;通过SDS-PAGE和Western blotting方法对该蛋白进行分析与鉴定。结果显示,本试验成功克隆出大小约为567 bp的G基因,获得分子质量约为40 ku的可溶性重组蛋白,优化诱导条件后用SDS-PAGE对表达产物进行鉴定,在16℃、IPTG浓度1.2 mmol/L、诱导4 h时蛋白表达量最大;通过Western blotting检测发现,重组蛋白可与山羊源BRSV标准阳性血清发生特异性反应,说明该蛋白具有反应原性。综上,本研究成功表达并纯化了BRSV G蛋白,为建立BRSV抗体间接ELISA检测方法和BRSV亚单位疫苗的研制奠定了基础。

摘要：为了筛选出适宜黄瓜生长的椰糠复合基质配比,为生产中配制椰糠复合基质提供参考,本试验以椰糠为主要试验材料,以草炭、珍珠岩为辅助材料,设计T_(1)(椰糠∶珍珠岩=1∶1)、T_(2)(椰糠∶草炭=1∶1)、T_(3)(椰糠∶草炭∶珍珠岩=1∶3∶1)、CK(单一椰糠)4种不同体积配比的椰糠复合基质,研究不同复合基质对黄瓜生长、品质和产量的影响。结果表明:椰糠复合基质相比椰糠单一基质能更好地促进黄瓜生长,在叶片数、茎粗、株高、根体积、根干质量、叶绿素含量等生长指标方面,椰糠复合基质均优于单一椰糠基质,且均以椰糠∶珍珠岩=1∶1(体积比)处理效果最好;在可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、维生素C含量等品质指标方面,椰糠复合基质优于单一椰糠基质,其中椰糠∶珍珠岩=1∶1(体积比)表现最好,比单一椰糠基质的可溶性糖含量显著增加43.78%、可溶性蛋白含量显著增加14.81%、维生素C含量显著增加4.39%;在产量方面,与单一椰糠基质相比,椰糠+珍珠岩、椰糠+草炭、椰糠+珍珠岩+草炭复配基质均能显著提高黄瓜单果质量、单株结果数、667 m^(2)产量,其中椰糠∶珍珠岩=1∶1(体积比)复合基质增产效果最好,且667 m^(2)产量比对照显著增加29.61%;综上,椰糠与珍珠岩按照体积比1∶1配制的复合基质在促进黄瓜生长、改善黄瓜品质、提高黄瓜产量方面均表现最佳,可作为优质基质应用于黄瓜栽培。