摘要：目的研究一种饮水澄清消毒剂杀灭水中大肠杆菌的效果及其影响因素,为实际应用提供科学依据。方法采用模拟现场水消毒试验方法,对该饮水澄清消毒剂杀灭大肠杆菌效果进行了评价。结果该饮水澄清消毒剂以二氯异氰尿酸钠为杀菌成分,聚合氯化铝为澄清剂组合而成。有效氯浓度为10 mg/L的该消毒剂能使水样中人工污染的大肠杆菌下降至0 cfu/100 ml。设计条件下的初始浊度、pH值、水温及色度对其杀菌效果无明显影响。结论该饮水澄清消毒剂对水体中大肠杆菌杀灭效果较好,具有良好的澄清作用,适应自然条件范围广。

摘要：目的建立能同时检测水环境中肠道病毒(Enterovirus,EVs)、诺如病毒GⅡ(Norovorus,Nov GⅡ)、轮状病毒(Rotavirus,RVs)、腺病毒(Adenovirus,AdVs)的多重RT-PCR检测方法。方法根据GenBank收录的肠道食源性病毒核酸序列,利用软件DNAMAN设计肠道病毒通用引物以及Nov GⅡ、RVs、AdVs的特异性引物;将这4对引物置于同一体系中进行多重RT-PCR,利用各种肠道食源性病毒的核酸模板检测其特异性并通过不同滴度[100～107pfu(copies)/ml]病毒测试其灵敏度;利用加标实验验证该方法的准确性;通过对5份河水或某水厂出水大体积水样(50 L)进行病毒富集与检测,以确定该方法的实用性,同时,采用传统细胞培养法验证其结果。结果该方法对目的病毒均获得了理想的电泳条带,而对其他病毒无非特异扩增;对EVs、AdVs的最低检出滴度均为10 pfu/ml,Nov GⅡ-4为10 copies/ml,对RVs的最低检出滴度为102pfu/ml;加标实验检测结果准确率为100%;对5份河水或某水厂出水大体积水样进行病毒富集与检测,对以上各种病毒均有检出且与细胞培养结果一致。结论该方法不仅特异性强、灵敏度高、简便快捷,而且准确率高,实际应用性强,适用于水中肠道食源性病毒的快速检测。

摘要：目的验证常见食源性致病菌聚合酶链式反应（PCR）检测方法特异性,并建立相应的快速简便PCR检测新体系。方法利用166株实验菌株验证4种常见食源性致病菌PCR检测方法的特异性;同时,针对副溶血性弧菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌的toxR、fimY、nuc、hly基因序列设计特异引物,通过统一PCR反应条件和缩短反应时间,实现对4种常见食源性致病菌的快速检测。结果 4种常见食源性致病菌PCR检测方法存在一定问题,不仅相关引物特异性差,而且操作繁琐、反应参数不统一、细菌总体检测周期长;而新建立的相应PCR检测体系具有良好的特异性和灵敏度,不仅能特异性扩增出目的片段,而且特异性达100%,其他干扰菌株均不能获得阳性结果,对致病菌DNA的检测限值为6pg;用该方法对人工污染食品样品进行检测,准确率为100%;完成检测的时间在3~4h以内。结论成功建立常见食源性致病菌的PCR快速检测技术,操作步骤简单、检测时间短,特异性强、灵敏度高。

摘要：目的建立混凝沉淀富集回收水中隐孢子虫卵囊的方法。方法以4μm荧光微球为研究对象,采用混凝沉淀试验,通过正交设计筛选出最佳混凝剂[聚合氯化铝(PAC)、水溶性壳聚糖(WSC)、1 mol/L的NaOH溶液用量]的配方,并观察不同pH值(6～9)、浑浊度(0～15 NTU)和水温(5～15℃)对回收率的影响。结果确定了最佳混凝配方,聚合氯化铝浓度为80 mg/L,壳聚糖浓度为30 mg/L,1 mol/L氢氧化钠溶液用量为0.6 ml。当pH值在6～9范围内,回收率均在86%以上;当水温在5～25℃范围内,回收率在55%以上;当浑浊度为0～15 NTU范围内,回收率均在90%以上。且回收率均随着pH值、水温和浑浊度的升高而上升。向实际水样投加隐孢子虫,采用混凝沉淀法与EPA1623法进行富集比较,差异无统计学意义。结论该方法能够高效富集回收水中的隐孢子虫卵囊,并对实验条件要求较低,适用于一般实验室对水中隐孢子虫卵囊的检测。

摘要：探索化学发光磁酶免疫分析技术在单核细胞增生性李斯特菌检测中的应用,并初步建立和优化检测方法及条件。将抗LM兔多抗与磁性微球偶联构建免疫磁分离原件,应用双抗夹心法ELISA检测LM全菌抗原,应用化学发光法进行定量检测,应用正交设计优化主要反应条件,建立标准曲线,测试灵敏性与特异性。通过正交试验优化的反应条件为37℃条件下,免疫磁珠用量20μL、含0.1%BSA的PBS封闭15 min,捕获抗原2 h,HRP标记的抗LM单抗稀释至1∶10 000(体积比)特异性结合反应30 min后进行化学发光检测,标准曲线拟合优度0.954,最低检出限10~4 CFU/m L,特异性良好,检测时限为3 h^4 h。

摘要：植物致病菌黄单胞杆菌可以产生一种通过一连串的重复单元特异识别并激活植物基因启动子的蛋白—TALEs。TALEs与DNA识别的关键在于2个连续的多态性氨基酸可以组成1个TALE-DNA结合密码,每个密码特异结合1个核苷酸。整个TALEs蛋白与双链DNA结合,其重复单元的顺序决定了可以结合的核苷酸序列。用人工设计的TALE核酸酶(TALENs)可以对包括植物、昆虫和哺乳动物在内的广泛的物种进行目的基因的编辑;而且人工设计的TALEs也可以与不同的功能结构融合,起到包括激活和调节基因表达在内的广泛作用,因此为生物技术和基因治疗方面提供了一个良好的工具。

摘要：目的建立TaqMan探针荧光定量PCR检测方法，用于临床标本中尖孢镰刀菌的快速诊断。方法针对尖抱镰刀菌的B—tubulin基N。设计特异性引物和探针并构建该基N的重组质粒标准品；优化PCR反应条件，建立尖孢镰刀菌的荧光定量PCR检测方法；通过lO种标准菌株和33株，临床分离株的应用检测，验证该方法的可行性。结果该检测方法具有较好的特异度、敏感度和重复性，6袜尖孢镰刀茵均有明显扩增，而其它37株临床常见的致角膜炎真菌标准株或分离株无明显扩增；最低检出限为408copies／μl，且变异系数低于5％。结论研究成功建立了尖孢镰刀菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法，对临床上真菌性角膜炎的快速诊断及指导用药具有实际应用性和重要意义。

摘要：阵列化、集成化、智能化是近年来压电传感器的重要研究方向,因此本文设计并研制了一种用于液相检测的单片式阵列压电传感器测量系统,在单个压电晶片上制作五个电极单元,并以塑料封装的形式用于液相检测,五对电极由单片机控制选时导通,以消除测量时的共性干扰因素.采用锁相环电路和变压器支路补偿的硬件电路方式补偿晶体制作时不可避免的并联电容,以提高晶体的液相起振性能,使其工作在串联谐振频率.将所研制的测试系统用于沙门氏菌的生物检测中,有较好的测试效果.

摘要：在压电晶体传感器中,石英晶体微天平(QCM)因其实时、快速和高敏感度高等优点已经获得了广泛应用.本文给出一套压电晶体传感器驱动电路,该电路基于模拟锁相环的工作原理,能有效地补偿晶体的静态电容,消除相位误差,晶体可以锁定在串联谐振状态下,通过外接设备可以测得精确度较高的晶体谐振频率和动态电阻.内部振荡电路由芯片MC12148外接变容二极管实现,可接入很宽的频率范围内的晶体进行使用.