摘要：近红外荧光染料探针因其信噪比高、组织穿透力强、对生物样品光损伤小等优势,在生物荧光成像领域备受瞩目.主族元素取代的罗丹明染料探针,不仅具有生物样品适用的近红外光谱性质,同时还保留了传统罗丹明的诸多优点,其中以硅原子取代的罗丹明分子中的氧原子而形成的硅基罗丹明染料探针最为突出.基于其优越的近红外光化学性质,硅基罗丹明染料探针已经广泛应用于生物样品的荧光识别成像.主族元素取代的罗丹明近红外荧光染料探针的发展,丰富了荧光染料探针的种类和数量,拓展了荧光染料探针的应用.本文综述了近年来主族元素取代的罗丹明染料的发展,主要探讨了探针的设计思路、荧光信号调控机制及其近红外成像应用.

摘要：目的 :构建我国SARS病毒BJ0 1株基因组全序列的亚cDNA克隆 ,为进一步构建该毒株的全长感染性cDNA克隆奠定基础。方法 :根据BJ0 1株病毒基因组序列中含有的特异酶切位点 ,利用DNAstar软件设计 7对引物 ,然后通过RT PCR扩增出覆盖病毒基因组全长的 7个cDNA片段 ,并分别将其克隆至pGEM TEasy或Topo载体。结果与结论 :已构建出SARS CoVBJ0 1株基因组的 7个亚cDNA克隆 ,经酶切鉴定和序列测定表明 ,所获得的cDNA克隆为BJ0 1株病毒的特异序列。

摘要：目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体。方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neuro-toxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B。对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因。分别插入原核表达载体pQE-30,再转化***15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定。结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在***中以包涵体形式获得高效表达。Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性。Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应。

摘要：设计的成功与否取决于物质世界的发展水平和人对客观事物的认识深度及主观意识的发展水平,取决于客现实际和主观意识的结合。一个成功的设计必然是主观设想和客观事物发展规律相适应的结果。单克隆抗体技术就是一个典型例子。

摘要：目的建立一种可以同时检测人类A型流感病毒,B型流感病毒及A型流感病毒H1,H3,H5亚型的多重RT-PCR方法。方法根据人类流感病毒的特异性基因设计并合成多对特异性引物,建立可同时扩增出人类流感病毒亚型特异性片段的多重PCR的方法。同时,对该方法的特异性和敏感性进行了评价,并利用该方法对39份疑似swineH1N1的临床标本进行检测。结果该方法可同时扩增出A型流感病毒M基因203bp,B型流感病毒M基因296bp,A型流感病毒亚型的HA基因片段长度分别为362bp(H1),112bp(H3),188bp(H5),494bp(swineH1)。该实验最低可检测新甲型H1N1(A/Beijing/501/2009)病毒RNA0.5TCID50。该方法的特异性实验结果显示,在多重PCR检测中未检出非特异扩增的PCR产物。同时,使用该方法从39份疑似新甲型H1N1的临床咽拭子标本中检测出新甲型H1N1阳性的标本4份(10.2%),季节性H1N1亚型2份(5.1%),H3N2亚型12份30.7%,本次实验结果与WHO通过实时PCR方法检测的结果一致。结论本研究建立的多重PT-PCR方法快速、敏感,特异性强,可用于人类流感病毒的分型检测。

摘要：基于DNA微点阵芯片技术的细菌基因转录谱研究是基因功能分析的重要手段之一。本文阐述了细菌DNA芯片基因转录谱分析的基本问题 ,包括mRNA和双色荧光实验设计 ,详细介绍了目前细菌体内外DNA芯片基因转录谱的具体应用情况 。

摘要：目的　探讨维生素D受体 (VDR)基因多态性与中国汉族人群肺结核发病间的关系。方法　采用病例对照研究设计 ,用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析 (PCR RFLP)检测VDR基因中T/C多态性位点 ,对肺结核相关的环境因素进行问卷调查 ,并进行单因素分析和多因素logistic回归分析。结果　对 76例病例和 171名对照进行了VDR的基因分型 ,VDR FF、VDR Ff与VDR ff三种基因型在病例组和对照组中的分布频率分别为 38.2 %、 4 4 .7%、 17.1%和 5 2 .6 %、4 0 .9%、6 .4 % ,其中ff基因型在病例组中的频率显著高于对照组 ,OR值 95 %CI:3.6 6 8(1.4 83～9.0 71) ;在多因素分析中调整卡介苗接种史和吸烟状况后 ,VDR ff基因型与肺结核发病仍有显著性关联 ,调整OR值 95 %CI:3.0 36 (1.117～ 8.2 5 3)。结论　VDR ff基因型可能是中国汉族人群肺结核病的易感基因型。

摘要：目的:从猪链球菌05ZY中扩增SSU1664基因,在大肠杆菌中表达并评价其重组蛋白的活性。方法:根据05ZY基因组序列设计引物,PCR扩增SSU1664基因,构建表达载体,利用亲和层析对目的蛋白进行纯化,Western blot和ELISA法鉴定其免疫原性。结果:SSU1664基因能够在大肠杆菌中可溶性表达,Western blot显示其能与猪链球菌菌体免疫后的大鼠血清反应,ELISA检测显示在人感染猪链球菌患者血清中针对SSU1664蛋白的IgM含量显著性升高。结论:SSU1664蛋白具有较高的免疫原性,可作为潜在的猪链球菌疫苗候选分子和猪链球菌早期感染诊断的标志物。

摘要：疾病智能诊断是移动式公共卫生应急处置系统中的核心子系统,主要依据疾病的症状、体征及临床化验等信息,对相应疾病做智能化诊断,给突发公共卫生突发事件的现场处置人员提供快速科学的参考依据。基于贝叶斯分析算法,从数据的组织管理和数据库的设计入手,基于嵌入式开发环境和面向对象程序设计语言,设计了一个应用于移动式设备的疾病智能诊断系统,取得了良好的实践应用效果,该系统可以作为移动式公共卫生应急处置系统的一个重要模块。最后分析了疾病智能诊断系统中的几个核心问题。

摘要：　目的:建立一种基于 16SrDNA寡核苷酸芯片的检测和鉴定常见致病菌的技术。方法:以 16SrDNA为靶标,针对待检细菌设计合成一系列寡核苷酸探针,制备寡核苷酸芯片。细菌DNA经通用引物扩增标记后,与芯片杂交,对杂交图谱进行分析归纳,得到一套种和属特异的检测模式。结果:以本室保存的 33株菌 (包括 7个属 15个种)进行初步检验,结果表明,种水平上的鉴定准确率为 78. 79%, 21. 21%可鉴定到属的水平。结论:该研究建立的 16SrDNA寡核苷酸芯片技术可以稳定、特异地实现细菌的高通量鉴定,为进一步检测研究奠定了基础。