摘要：针对公共卫生突发事件需要应急反应等的特点,研究了以掌上智能终端(PDA)为开发平台,集成GPS、GSM、GPRS等技术,实现一个面向公共卫生突发事件的地理信息系统(GIS)。探讨了一些关键技术,如GPS与WINCE的接口,地图数据的动态装载等。该系统可以指导卫生人员进行流行病学调查,同时可以对现场采集到的调查数据进行录入、存储,并实现数据计算、统计分析和空间分析等功能。有助于在公共事件突发时,合理配置社会资源,为领导层决策提供科学依据,实现快速应急反应。在实际应用中取得较好的效果。

摘要：目的　对带有登革 2型病毒 (DEN 2 )全长cDNA的质粒pDVWS5 0 1上E6 2、E2 0 3位点进行定点诱变。方法　设计 4对点诱变引物 ,运用OL PCR(overlapPCR)法 ,扩增出分别在E6 2或E2 0 3位带有点突变的 2条DNA片段 ,克隆至T载体 ,获T TB6 2、T TB2 0 3两个克隆。将T TB6 2用ClaⅠ和SphⅠ分别酶切 ,T TB2 0 3用SphⅠ +NheⅠ酶切后 ,用T4连接酶分别连接至pDVWS5 0 1,获重组质粒TB6 2和TB2 0 3。对TB6 2和TB2 0 3进行序列测定。结果　成功得到分别在E6 2、E2 0 3位带有点突变的TB6 2、TB2 0 3克隆。结论　OL

摘要：为了克隆奶牛乳房炎金黄色(葡萄球菌裂解性噬菌体裂解酶Lys IMEP5基因,分析其生物信息学特性,以本实验室分离的奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌裂解性噬菌体v B_Sau S_IMEP5为材料,根据其全基因组学信息,获取裂解酶基因序列,应用Primer 5.0设计特异性引物。采用PCR方法扩增并克隆Lys IMEP5基因,通过BLAST进行序列比对分析,利用在线软件对蛋白结构进行预测。成功克隆到裂解酶Lys IMEP5基因,测序结果通过DNAMAN比对与原序列完全匹配,无任何基因突变,同源性分析显示,与已报道的金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶相似性最高为83.1%;裂解酶Lys IMEP5基因序列全长1371 bp,共编码456个氨基酸,为亲水性蛋白,分子质量为51.717 k Da,理论等电点为9.70;Lys IMEP5同时存在CHAP片段和Amidase-3片段;该蛋白无跨膜区,无信号肽,以无规则卷曲为主。从奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌裂解性噬菌体中成功克隆出Lys IMEP5基因,通过对该蛋白的结构预测分析为后续克隆表达及开发新型绿色抑菌剂奠定了基础。

摘要：根据家蝇拟除虫菊酯kdr (knockdownresistance)抗性的遗传标记L10 14F突变 ,设计竞争特异性等位基因PCR扩增方法 (cPASA ,competitivePCRamplificationofspecificallele) ,用于检测单头家蝇基因组中的kdr点突变。通过对 1个实验室敏感种群及 8个野外种群共 4 5 0个个体的kdr等位基因型检测 ,结果表明kdr等位基因频率与溴氰菊酯LD50 值之间有线性正相关回归关系 (Γyx =0 913,P =0 0 0 0 6 )。遗传学分析表明各种群kdr等位基因频率处于Hardy Weinberg平衡状态 ,遗传差异的无偏估计值表明 。

摘要：目的表达B族链球菌C5a肽酶蛋白功能活性区域,为进一步研究及开发疫苗奠定基础。方法设计引物,从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出含有C5a肽酶蛋白不同功能区域基因的4个目的片段,分别插入T载体,再经酶切后,插入原核表达载体PET32a,进行融合表达。对表达蛋白进行免疫原性检测,并通过镍柱大量纯化。结果成功构建4个目的片段的PET表达质粒。经SDS-PAGE检测表达的融合蛋白相对分子质量分别为80000、78000、70000和36000。蛋白质谱分析证实,表达的4个蛋白为B族链球菌C5a肽酶蛋白的可能性分数分别为82、152、113和79。免疫印迹证实均能与特异性抗C5a肽酶蛋白的抗体反应,纯化后的蛋白SDS-PAGE纯度达90%。结论已成功地表达了可溶性C5a肽酶蛋白4个功能活性区域,为蛋白免疫表位和毒力机制的研究以及亚单位蛋白疫苗的制备奠定了基础。

摘要：应用反转录巢式PCR扩增出丙型肝炎病毒丝氨酸蛋白酶基因,并克隆到痘苗病毒表达载体pSC65中。载体上设计一测序引物,经序列测定证明,已将543个bp长的丝氨酸蛋白酶基因片段正确插入载体。此结果为丙型肝炎病毒NS3区丝氨酸蛋白酶基因在痘苗病毒中的表达,以及建立HCV特异的CTL靶细胞打下基础。

摘要：本文克隆白蚊伊蚊气味受体基因OR21a分析其是否与搜寻宿主或吸血行为相关。通过设计简并引物，PCR扩增得到白纹伊蚊气味受体基因OR21a段，采用SYBR荧光定量PCR方法，以自纹伊蚊β-肌动蛋白基因作为内参，比较了OR21a因在未吸血雌蚊、雄蚊、打断吸血雌蚊和饱血雌蚊头部表达量的差异。结果显示，白纹伊蚊OR21a因在未吸血雌蚊头部表达量最高，饱血雌蚊头部表达量最低，而在雄蚊头部的表达量介于打断吸血雌蚊和饱血雌蚊之间。本研究发现白蚊伊蚊会依据不同的生理需求改变OR21a因的表达量，推测可能与白纹伊蚊搜寻宿主及吸血行为有一定的相关性。

摘要：猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)是引起猪呼吸和繁殖障碍的重要病原体,感染比例逐年上升,现有PPV5和PPV7的检测效率低,故建立针对PPV5/7的多重检测方法,可增加样品利用率,提高检测效率。本研究根据2种病原的保守序列,设计特异性引物,通过对反应条件和体系优化,建立快速检测PPV5和PPV7双重PCR方法,并对该方法的灵敏性、特异性进行验证。结果显示,建立的双重PCR方法仅对PPV5、PPV7的基因组DNA有特异性扩增,对猫细小病毒(FPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的核酸均无特异性扩增;对病原核酸混合模板的检出下限为10拷贝/μL,与单一PCR检测结果一致。本研究建立一种特异性强、敏感性高的多型PPV双重检测方法,为调查PPV5和PPV7在猪群中的感染情况提供快速检测方法。

摘要：目的对北京某所三甲医院老年病区暴发的一起诺如胃肠炎医院感染进行调查。方法根据统一设计的流行病学调查表,逐一对腹泻、呕吐患者进行个案调查;收集感染者的人口统计学等信息,同时采集便标本,使用实时RT-PCR检测诺如病毒,对第二轮产物进行测序,并通过BLAST进行诺如病毒基因库比较。结果 2007年10月31日-11月12日共发生24例诺如病毒胃肠炎医院感染,包括17例住院患者,5名医务工作者及2名其他人员;该病区68.0%的患者被感染;对收集到的13份便标本进行诺如病毒检测,其中9份结果阳性,均属于GⅡ-4基因型。结论此次急性胃肠炎医院感染暴发是由诺如病毒引起的,涉及患者、医务工作者及其家属,于暴发3周后得到控制。

摘要：依据查菲埃立克体16S rRNA基因序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针，以克隆的查菲埃立克体16S rRNA基因片段作DNA模板，建立实时荧光定量PCR检测方法。与套式PCR相比较，荧光定量PCR检测的灵敏度是其30倍；用荧光定量PCR检测其他相关立克次体和细菌DNA样本，检出结果为0；对荧光定量PCR检测重复性进行分析，变异系数（CV）批内和批间误差在0．2％～2．0％之间。结果证明本研究建立的荧光定量PCR方法具有种特异性和良好的重复性，可用于检测感染样本中的微量查菲埃立克体DNA。