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登革2型病毒全长cDNA克隆定点诱变的OL-PCR方法: 收藏
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引用; 《中华微生物学和免疫学杂志》2001年第6期21卷 662-665页; 作者：赵卫胡志君杨佩英秦鄂德于曼陈水平王鹏程耿丽卿范宝昌军事医学科学院微生物流行病研究所病毒学专业实验室北京100071; 目的　对带有登革 2型病毒 (DEN 2 )全长cDNA的质粒pDVWS5 0 1上E6 2、E2 0 3位点进行定点诱变。方法　设计 4对点诱变引物 ,运用OL PCR(overlapPCR)法 ,扩增出分别在E6 2或E2 0 3位带有点突变的 2条DNA片段 ,克隆至T载体 ,获T TB6 2、T...; 目的　对带有登革 2型病毒 (DEN 2 )全长cDNA的质粒pDVWS5 0 1上E6 2、E2 0 3位点进行定点诱变。方法　设计 4对点诱变引物 ,运用OL PCR(overlapPCR)法 ,扩增出分别在E6 2或E2 0 3位带有点突变的 2条DNA片段 ,克隆至T载体 ,获T TB6 2、T TB2 0 3两个克隆。将T TB6 2用ClaⅠ和SphⅠ分别酶切 ,T TB2 0 3用SphⅠ +NheⅠ酶切后 ,用T4连接酶分别连接至pDVWS5 0 1,获重组质粒TB6 2和TB2 0 3。对TB6 2和TB2 0 3进行序列测定。结果　成功得到分别在E6 2、E2 0 3位带有点突变的TB6 2、TB2 0 3克隆。结论　OL; 来源：详细信息评论

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