摘要：目的:10-23型脱氧核酶是脱氧核糖核酸酶中的一种,能主动在RNA分子嘌呤-嘧啶结合点切割所有RNA分子,通过比较反义寡核苷酸的作用,初步研究10-23型脱氧核酶对基因表达抑制作用的发生机制。方法:采用体外转录GFP mRNA与脱氧核酶反应,以及GFP表达质粒与脱氧核酶共转染HeLa细胞,观察脱氧核酶对GFP的抑制作用。结果:体外和胞内实验均显示据靶点设计的10-23型脱氧核酶对绿色荧光蛋白mRNA具有切割作用。当10-23型脱氧核酶的两翼结合臂各具有连续8碱基互补而处在两翼结合臂和酶解核心连接处的2碱基错配时,尽管不能切割mRNA但是在胞内仍然有表达抑制作用;而当两翼结合臂具有4互补碱基紧接1错配碱基和4互补碱基时,10-23型脱氧核酶体外和胞内均丧失作用。结论:10-23型脱氧核酶对基因较强的表达抑制作用来自结合臂的反义寡核苷酸依赖的RNase H降解,和本身对mRNA直接切割作用的叠加,即10-23型脱氧核酶在细胞内具有对基因识别切割和诱导RNase H进行再切割的双重作用。

摘要：目的:综合分析射频电磁场和极低频电磁场多种免疫系统非热效应的研究进展,以期为从事电磁辐射生物学效应研究的基础和临床工作者提供参考依据。资料来源:应用计算机检索Pubmed1990-01/2005-12有关射频辐射和极低频电磁辐射对免疫系统影响的文献,检索词“radiofrequency,extremelylowfrequency,geneexpression,immunesystem”,限定文章语言种类为English。资料选择:将电磁辐射流行病学调查和使用微波或电磁波治疗疾病的文章筛掉,重点查阅电磁辐射致免疫组织损伤的非热生物学效应研究文献以及电磁辐射研究界知名学者如RepacholiMH,McNameeJP,ClearySF等的系列研究文献及国际非电离辐射防护委员会的国际会议报告。资料提炼:共检索到55篇相关文献,其中27篇符合要求。排除的28篇中,8篇为流行病学调查,20篇为有关疾病治疗的文献。资料综合:近年来,关于低剂量电磁辐射存在非热生物学效应的观点为大多数学者所接受,但有关非热效应的机制还不清楚。射频电磁场和极低频电磁场的免疫组织非热效应生物学作用包括遗传学效应、细胞增殖及转化、凋亡、致癌效应以及自由基产生等。结论:有关评价电磁场暴露及其危害健康效应的实验室依据还很有限,目前尚不能提供为人们所普遍接受的电磁辐射生物学效应及理论机制。因此,完善实验设计和暴露方法,科学地测量暴露强度及生物吸收能量,系统地研究各种生物学效应指标是揭示电磁辐射非热生物学效应机制的必要条件。

摘要：为了表达和纯化具有生物学活性的人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)-D,探讨VEGF-D对血管增生作用,从人胎肺组织中提取总RNA,设计特异性引物并应用RT-PCR法扩增VEGF-D成熟肽片段;经测序证明目的片段序列正确后,构建重组表达质粒pGEX-5X-1/VEGF-D并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行GST-VEGF-D融合蛋白的表达。结果表明,融合蛋白的分子量约为38kD,表达量占菌体总蛋白的15%以上,抗GST和抗VEGF-D的抗体均能识别融合蛋白;纯化的GST-VEGF-D融合蛋白与VEGFR-3/Fc具有结合活性,并能刺激红白血病细胞系HEL细胞生长;在鸡胚尿囊膜实验中GST-VEGF-D具有促进鸡胚尿囊膜血管生成的作用。结论:成功表达了具有生物学活性的重组人VEGF-D融合蛋白,为进一步研究VEGF-D的作用机理提供了实验模型。