摘要：目的评价2种盐酸奥洛他定制剂在健康人体的生物等效性。方法采用随机、双周期、自身交叉的试验设计。24例健康男性志愿者单次口服试验制剂（盐酸奥洛他定分散片）或参比制剂（盐酸奥洛他定片）10mg，血浆样品采用高效液相色谱－串联质谱法（HPLC-MS／MS）测定，计算两者的主要药物动力学参数，进行生物等效性评价。结果奥洛他定血药浓度在0．25-500μg·L^-1与峰面积线性关系良好（R=0．9990），最低定量浓度为0．25μg·L^-1，日内及日间RSD〈15％；服用试验制剂或参比制剂后血浆中奥洛他定的％。分别为（129．56±31．74）和（125．91±37．01）μg·L^-1；tmax分别为（0．68±0．29）和（0．88±0．72）h；t1／2分别为（7．46±3．62）和（6．82±3．33）h；AUC0－∞分别为（451．84±78．47）和（434．28±92．77）μg·L^-1；AUC0-∞分别（449．69±77．84）和（430．68±92．81）μg·h·L^-1；试验制剂的相对生物利用度R0-tn、R0-∞分别为（107．51±27．34）％和（107．06±27．10）％。结论试验制剂和参比制剂具有生物等效性。

摘要：目的:研究两种氟康唑胶囊的相对生物利用度,并评价两者的生物等效性。方法:采用双周期自身随机交叉试验设计,22名健康男性志愿者单剂量口服试验制剂或参比制剂,血浆样品采用高效液相色谱法测定。结果:受试制剂及参比制剂氟康唑胶囊实测平均血药峰浓度Cmax分别为(7.13±1.34),(6.72±1.13)mg·L-1;实测平均达峰时间tmax分别为(0.84±0.76),(1.04±0.91)h;受试制剂及参比制剂t1/2(ke)分别为(25.93±4.33),(25.93±5.70)h;AUC0-t平均值分别为(212.47±29.54),(208.80±31.56)mg·h·L-1;AUC0-∞平均值分别为(224.74±30.99),(221.79±32.46)mg·h·L-1;试验制剂氟康唑胶囊的相对生物利用度F0-t、F0-∞分别为(102.53±11.04)%,(102.03±10.95)%。结论:试验制剂和参比制剂具有生物等效性。

摘要：背景:传统的组织工程导管制造方法存在复杂外形制造困难和内部空间结构无法控制的缺陷,不能满足一些微导管所要求的精确性和空间结构复杂性。目的:设计一种人工仿生脊髓导管,并研究其性能。方法:采用Solid Works制图软件建立导管数据模型,在3D打印机上生成平台扫描路径,以丝素蛋白和胶原蛋白为原料,制作人工仿生脊髓导管,检测导管的吸水率、孔隙率、力学性能及细胞相容性。将人工仿生脊髓导管置入SD大鼠背部皮下,置入后1,2,3,4周取出导管,观察导管降解情况。结果与结论:人工仿生脊髓导管的微观孔隙分布均匀,大小不等,孔径为10-240μm,孔隙率为(53.6±1.0)%,吸水膨胀率为(1 347.0±19.4)%,压缩弹性模量为(0.60±0.12)MPa;神经干细胞可在人工仿生脊髓导管孔隙中生长,呈球形或梭形,在导管表面密集生长,有些细胞伸出伪足附着在导管表面。人工仿生脊髓导管置入SD大鼠背部皮下1周后降解20%,2周后降解59%,3周时降解74%,4周后完全降解。结果表明人工仿生脊髓导管具有良好的细胞相容性及降解性。

摘要：克隆表达可生物素化的HLA-A*0201的重链胞外区是制备HLA-A*0201-肽四聚体的先决条件。本研究构建重组HLA-A*0201-BSP融合基因的表达载体,以制备HLA-A2四聚体。根据已报道的序列设计特异引物,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从已鉴定为HLA-A*0201基因型的健康人白细胞中克隆HLA-A*0201重链胞外区的基因,拼接上依赖生物素-蛋白连接酶(biotin-proteinligase,BirA)的可生物素化序列(BirAsubstratepep-tide,BSP),构建HLA-A*0201-BSP的原核表达载体,在大肠杆菌DH5α中进行表达。结果表明:成功扩增出HLA-A*0201-BSP融合基因并测序证实,构建的pBV220-HLA-A*0201-BSP可在大肠杆菌DH5α中高效表达HLA-A*0201-BSP融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的28%,以包涵体的形式表达,经洗涤、变性后,以SepharcylS-300HR(S-300)柱层析纯化,纯度可达90%以上。结论:获得了高效表达HLA-A*0201-BSP的大肠杆菌工程菌株,建立了简便有效的包涵体纯化方法,为制备HLA-A*0201-肽四聚体奠定了基础。

摘要：目的探讨反义寡核苷酸（ＡＳＯＮ）特异性抗病毒作用。方法在ＨｅｐＧ２２．２．１５细胞中观察了４段１６聚针对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因不同功能区的ＡＳＯＮ对病毒复制的抑制作用。结果ＡＳＯＮ能显著抑制ＨＢＶ基因的抗原表达（Ｐ＜０．００１），在Ｓ基因区设计的ＡＳＯＮ对ＨＢｓＡｇ的抑制作用明显优于Ｃ基因区的ＡＳＯＮ（Ｐ＜０．０５）。反之，在Ｃ基因区设计的ＡＳＯＮ对ＨＢｅＡｇ的抑制作用又明显优于Ｓ和Ｐｒｅ－Ｓ２基因区的ＡＳＯＮ（Ｐ＜０．０１）。４段ＡＳＯＮ的联合用药并不能增强其对ＨＢＶ的抑制作用。结论ＡＳＯＮ可能成为一种有开发潜力的抗病毒药物。

摘要：自身免疫性疾病是一类病因不清、发病机制不明、致残率极高的内科顽疾，迄今为止对该类疾病的治疗还缺乏任何特异且有效的药物和方案。随着近些年来对B 7/CD 28共刺激信号系统的深入研究，研究者们则以全新的思维、独具匠心的设计通过选择性阻断B 7/CD 28共刺激信号系统、诱导自身反应性T细胞的特异性耐受以及针对性清除CD +28自身反应性T细胞等策略，试图为自身免疫病的治疗开辟一条崭新的途径。目前这些策略、尤其是选择性阻断B 7/CD 28共刺激信号系统的策略正在成为探索有效治疗自身免疫性疾病的热点和焦点。事实上，无论是从现有的体外实验结果来讲，还是从动物模型体内治疗的疗效来说，恰如研究者们最初所期望的那样，这一策略的确具有特异性强、疗效较为显著、毒副作用小的优势。

摘要：目的:研究非洛地平-美托洛尔复方透皮贴剂与两药市售缓释片在兔体内药动学和生物利用度差异。方法:采用三周期随机交叉试验法,6只健康白兔随机分为3组,分别给予复方非洛地平-美托洛尔静脉注射液、透皮贴剂及两药市售缓释片各1片,以气相色谱-电子捕获法分别测定非洛地平和美托洛尔血药浓度,用DAS软件计算药动学参数和生物利用度,通过统计学检验评价不同剂型间差异。结果:透皮贴剂较口服缓释片药物吸收时间显著延长(P<0.05),达峰时间显著推后(P<0.05),血药浓度平稳,波动性小,体内作用时间长达2d￣3d。贴剂中非洛地平和美托洛尔的生物利用度分别是其口服缓释片的114.30%和192.92%。结论:该贴剂缓释特征明显,达到了预期提高生物利用度、延长药物体内驻留时间、维持平稳血药浓度和方便用药的新剂型设计目的。

摘要：为了建立高效快捷能分离大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的下游纯化路线,比较了不同组合的纯化策略和条件,包括反相层析、金属螯合层析、阴离子交换层析、蓝染料亲和层析和凝胶过滤层析等,并采用MTT法检测该融合蛋白的靶向杀伤活性。结果表明,在反相层析分离中疏水相分别采用了常规的甲醇和乙腈,结果为所分离的该重组融合蛋白均发生了变性,从色谱柱中分离出来就生成了絮状沉淀。在蓝染料亲和层析一步分离中,由于全菌体蛋白中与亲和树脂发生非特异结合的成分较多,极难区分目的蛋白和杂蛋白。但是,PRSETA-B7-2-PE40KDEL表达载体上带有翻译增强序列T7-g10,可在表达目的蛋白N端融合6个组氨酸,这十分有利于通过Ni-NTA金属鏊和层析法快速高纯度地纯化表达产物。根据这一特性,经反复筛选实验设计最终确定了金属螯合层析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析三步法的纯化路线,用于纯化分离B7-2-PE40KDEL融合蛋白。所得的目的蛋白的纯度可达95%以上,总回收率为8%。Western-blot实验显示,所得蛋白可与B7-2及PEA抗体特异性结合;MTT生物活性测定表明,该融合蛋白对表达CD28受体的人T细胞系Jurkat产生特异性杀伤作用,而对不表达CD28的淋巴细胞系Raji无任何杀伤作用。结论:建立了高效快速纯化大量重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白的技术路线,所纯化的重组B7-2-PE40KDEL融合蛋白能特异性靶向杀伤表达CD28受体的人T细胞。

摘要：目的:模拟颅内的力学环境,研制可对神经干细胞实施动态脉冲加载装置和灌流培养的系统。方法:动态监测侧脑室的颅内压变化及生化指标,明确脉冲载荷的形成机理与颅内的生物学环境;设计并构建动态脉冲加载装置和灌流培养系统,检测加载装置的稳定性、可靠性及精确度,并对培养系统的密闭性、无菌性及生物学环境进行测量。利用Instron仪器及应变仪测量细胞培养载体生物的半透膜力学性能及应变情况,并测量其生物相容性。结果:该生物反应器连续运转14 d后,培养液中无细菌生长;可基本模拟颅内的生物学及力学环境,可形成精确、稳定的脉冲加载;生物半透膜的生物相容性理想,力学及应变测量符合细胞培养的要求。结论:该生物反应器可作为动态培养环境下神经干细胞力学生物学机理研究较可靠的培养系统和加载装置。

摘要：目的　研究乳糖化多聚赖氨酸 (Gal PLL)导向反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒 (HBV)基因表达的特异性抑制作用。方法　根据聚合酶链反应 (PCR)产物直接测序结果 ,在HBVU5样序列区合成了一段 16聚硫代磷酸反义寡核苷酸 ,并将其与肝靶向配体Gal PLL连接 ,在 2 2 15细胞比较 ,观察了它们对HBV基因表达的影响。结果　通过测序确定了 2 2 15细胞中HBVDNA属于HBV表面抗原ayw1亚型 ,并将此用于反义寡核苷酸的序列设计 ;经荧光组化分析表明 ,Gal PLL对大鼠肝组织有选择性亲和力 ;Gal PLL与DNA形成复合物的最佳摩尔比为 2∶1;在相同实验条件下 ,硫代磷酸反义寡核苷酸对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为 70 %和 5 8% ,而Gal PLL硫代磷酸反义寡核苷酸对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为 96 %和 82 % ,同时培养上清液和细胞中HBVDNA的含量明显下降 ,无关序列寡核酸无明显效果 ,寡核苷酸对细胞未产生毒性。结论　肝靶向配体和反义寡核酸的复合物可以通过无唾液酸糖蛋白受体靶入 2 2 15细胞内 。