摘要：以91份山楂种质资源为材料,使用SSR标记对其进行分子身份证构建,并进行遗传多样性分析。从山楂基因组数据库中开发并设计了96对引物,筛选出了12对多态性好的引物,利用SSR荧光标记毛细管电泳技术检测扩增条带的分子量,并分析参试样品的扩增带型。采用数字与字母组合的方式,依据12对引物的多态性信息含量由高到低排列引物扩增结果,生成各材料的指纹编码。基于非加权组平均法(unweighted pair-group method with arithmetic means,UPGMA)对91份山楂资源进行聚类分析。结果表明,12对SSR引物从91个山楂种质资源样品中共扩增到67个等位基因,其平均等位基因数、有效等位基因数、观测杂合度、期望杂合度分别为5.583、2.730、0.490、0.593,Shannon’s信息指数平均值为1.195,多态性信息含量介于0.300~0.715之间,平均为0.551。91份山楂资源的遗传相似系数范围为0.25~0.98,平均值为0.529,在遗传相似系数0.46处时可分为5大类群。根据引物的多态性信息含量高低选择引物组合,构建了山楂种质区分需要的最少引物组合。

摘要：甜瓜内源病毒(cucumis melo endornavirus,Cm EV)是近年来发现的寄主广泛、发病率高、种传率高的重要病毒。利用Cm EV基因组的序列信息设计特异性引物和探针,建立基于探针法的实时荧光定量PCR(Real-Time Fluorescent Quantitative PCR with Taq Man probes,Taq Man RT-q PCR)的检测方法。该方法可以检测出1×10^(-2)ng·μL^(-1)的RNA和1.8×10^(3)copies·μL^(-1)的质粒,灵敏度是普通PCR的100倍。利用该方法检测了在北京、山东、辽宁、海南瓜类种苗主产区的甜瓜、西瓜、黄瓜与南瓜砧木11份种苗带毒情况,发现山东和海南各有1份甜瓜种苗携带Cm EV。本研究建立的CmEV TaqMan RT-q PCR方法特异性好、灵敏度高,可为开展病毒精准鉴定、科学防控以及从源头遏制病毒传播提供技术支撑。

摘要：根据樱桃病毒A(cherry virus A,CVA)外壳蛋白基因序列的保守区设计特异性引物和探针,建立了樱桃中CVA的重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)检测方法。该方法可在恒温38℃条件下进行,40 min即可完成检测。灵敏度试验表明,采用RPA方法检测CVA的灵敏性是PCR方法的10倍,且与侵染樱桃的另外6种病毒和1种类病毒无交叉反应。此外,具有标记的扩增子可通过侧向流试纸条直接观察结果。采用该方法检测田间样品效果良好。

摘要：【目的】探讨培养基大量元素组分和配比对苹果矮化砧木‘SH6’组培继代的影响,为提高组培快繁效率、建立快繁技术提供理论依据。【方法】采用五因素二次回归正交旋转设计(1/2实施)方法,以MS培养基大量元素KNO3、NH4NO3、MgSO4·7H2O、KH2PO4与CaCl2·2H2O为自变量,接种后35 d的组培苗继代系数和幼苗高度为因变量。【结果】单因子效应分析表明,大量元素影响苹果矮化砧木‘SH6’继代系数的主次顺序是KNO3> NH4NO3> MgSO4·7H2O>KH2PO4> CaCl2·2H2O,影响幼苗高度的主次顺序是KNO3> NH4NO3> CaCl2·2H2O> MgSO4·7H2O> KH2PO4。因子交互效应表明,继代系数受NH4NO3与CaCl2·2H2O交互效应的影响;幼苗高度受KNO3与NH4NO3、KNO3与KH2PO4、KNO3与CaCl2·2H2O交互效应的影响。配方优化的研究表明,理论预测与实验验证的结果无显著差异。【结论】MS培养基的大量元素影响苹果矮化砧木‘SH6’的继代系数和幼苗高度,KNO3与NH4NO3是主要影响因素。大量元素优化配方为:KNO31 535 mg·L^-1、NH4NO31 430 mg·L^-1、MgSO4·7H2O 310 mg·L^-1、KH2PO4172 mg·L^-1与CaCl2·2H2O 445 mg·L^-1,培养35 d继代系数4.2,幼苗高度2.6 cm。

摘要：根据李矮缩病毒(prunedwarfvirus,PDV)外壳蛋白基因序列的保守区设计特异性引物和探针,建立了PDV的重组酶聚合酶扩增—侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplification combined with lateral flow dipstick,RPA-LFD)检测方法。该方法在恒温39℃下反应20 min,具有标记的扩增子可达到检测水平。扩增子检测室(amplicon detection champer)中的侧流层析试纸条在20 min内呈现可视化检测结果。该方法与侵染樱桃的另外6种病毒(CGRMV、PNRSV、Lch V-1、PBNSPa V、CVA和CNRMV)无交叉反应。灵敏度试验表明,用RPA-LFD方法检测PDV的灵敏性是PCR方法的10倍。用该方法检测13个田间样品,其检测结果与PCR检测结果一致。RPA-LFD法具有操作简单、快速、灵敏度高、特异性强等特点,适合对PDV样品的快速检测与鉴定。

摘要：结球甘蓝全株重和叶球重是其产量性状的重要构成因素。研究其配合力和杂种优势表现,对甘蓝杂交育种和创制高产结球甘蓝杂交种具有重要意义。本研究通过6×7不完全双列杂交设计,对结球甘蓝产量性状的配合力效应和F_(1)代杂种优势表现进行了分析,并基于SSR标记对13个亲本进行了聚类分析和遗传距离计算。结果表明,亲本880014、739和12119的产量性状一般配合力效应好,可作为优良的亲本材料。产量性状特殊配合力效应值高的组合为15109×01-20、12119×01-20、1602×13127和15109×739;产量性状杂种优势好的组合是1344×99011、1344×739、15109×739和12119×01-20。综上,15109×739和12119×01-20是具有增产潜力的优良组合。在中等遗传距离条件下,杂交组合产量性状特殊配合力好,杂种优势强。