摘要：根据OC-IΔD86基因序列,设计合成了7条寡核苷酸片段,通过重叠延伸PCR技术合成了OC-IΔD86基因,利用设计好的BamH I/Xho I酶切位点将OC-IΔD86基因克隆到原核表达载体pet21b中,在1mmol/L的IPTG诱导后5h,OC-I?D86融合基因在大肠杆菌中得到表达,表达产物处于可溶状态,其表达量占总蛋白的11.4%,可溶性蛋白的16.4%;利用Ni-NTA系统纯化该蛋白并经PEG20000浓缩后,活性分析表明该蛋白酶抑制剂在体外表现出对木瓜蛋白酶明显的抑制作用。这为转OC-IΔD86基因的抗根结线虫植物基因工程抗体制备,以及进一步体内的抗根结线虫研究奠定了基础。

摘要：在河西走廊气候生态条件下,以油桃品种‘中农金辉’为试验材料设计135 L、225 L、360 L、576 L和1440 L(对照)限根体积(root restriction volume,RV)处理(RV135、RV225、RV360、RV576和RV1440),测定油桃树体生长、叶绿素含量、光合气体交换参数及叶绿素荧光参数,探讨限根对油桃营养生长及光合荧光特性的影响。结果表明:(1)与对照RV1440相比,RV135和RV225处理的树体干径和新梢长度均显著减小;RV360处理的树体干径显著减小,新梢长度差异不显著;RV576处理树体干径和新梢长度均差异不显著。(2)与RV1440相比,RV135和RV225处理的叶片叶绿素含量及正午(14:00)的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度均显著降低,其胞间二氧化碳浓度显著升高,而RV360和RV576处理以上各光合参数均无显著差异。(3)与RV1440相比,限根处理油桃叶片的OJIP曲线J-I相荧光值大幅降低;正午时分的相对可变荧光差值(ΔVt)在K相小于0,且RV135和RV225的相对可变荧光差值(ΔVt)均显著降低;RV135和RV225处理的叶绿素荧光比活性参数单位反应中心吸收的光量(ABS/RC)和单位反应中心热耗散的能量(DI0/RC)较高,最大光化学效率(Fv/Fm)和PSⅡ电子传递的量子产额(φE0)较低,其综合性能参数PItotal分别比对照RV1440显著降低34.9%和27.1%,而RV360和RV576与对照相比差异不显著。研究发现,适当限根既对戈壁日光温室栽培桃树的营养生长有一定的控制作用,但又不影响其光合作用和经济产量,且其最佳限根体积是360 L,该研究结果为戈壁非耕地日光温室油桃限根栽培提供了理论依据。

摘要：运用L16(45)正交设计对一品红ISSR反应的5个因素(DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、TaqDNA酶浓度)在4个水平上进行优化试验,通过不同反应体系扩增效果比较,建立了优化的一品红ISSR反应体系:50μL的PCR体系中含有DNA模板100 ng、Mg2+2.5 mmol.L-1、dNTPs 0.20 mmol.L-1、引物300 pmol.L-1、TaqDNA聚合酶1.0 U。

摘要：采用随机区组设计,研究不同配比的红壤、泥炭、椰糠和珍珠岩6种基质配方对闭鞘姜生长的影响。测定6种基质的物理和化学性质,观测萌芽率、叶片数、茎粗、株高、株幅、光合日变化、根茎鲜重和根茎干重。结果显示,基质S4(泥炭+椰糠+珍珠岩=1∶2∶2)的植株净光合速率(Pn)显著高于其他基质处理。在6种基质生长的植株叶片净光合速率曲线呈单峰或双峰变化,而蒸腾速率曲线呈单峰变化。最大株高、最大根茎鲜重和根茎干重也出现在基质S4种植的植株。从以上结果可知,基质S4比较适合闭鞘姜的生长和根状茎干物质积累。

摘要：根据前期的研究结果设计PCR引物,从青花菜(Brassica oleracea ***)叶片基因组DNA和cDNA中克隆到了查尔酮合成酶基因,定名为BoCHS2。BoCHS2的基因组DNA全长为1267bp,具一个长度为85bp的内含子,基因编码区全长为1182bp,编码393个氨基酸。基因序列已提交至NCBI,登录号为HQ189776。与BoCHS相比,在核苷酸和氨基酸组成上的差异分别为27bp和8个氨基酸。RT-PCR结果表明,在霜霉菌诱导下,叶片和子叶中BoCHS2的表达量增加。将BoCHS2片段反向插入到带有绿色荧光蛋白基因的pCAMBIA1300载体中,成功构建了植物反义表达载体。

摘要：将番茄抗晚疫病ph-3基因已有的RAPD特异片段进行克隆、测序。根据该测序结果设计SCAR引物对抗病亲本、感病亲本、抗病池、感病池、F1个体进行扩增,均获得一条592bp的特异片段。感病基因型和杂合抗病基因型存在XbaⅠ酶切位点,酶切后分别产生了261bp、193bp和95bp以及592bp、261bp、193bp和95bp的特异性片段,纯合抗病基因型无此酶切位点,酶切结果仍为592bp的产物。这些片段能成功区分抗病材料、感病材料和F1个体,很有可能是与ph-3基因连锁的CAPS标记。

摘要：为研究MADS-box基因在甜樱桃花发育中的作用,以甜樱桃品种拉宾斯为试材,根据多种植物MADS-box基因保守序列设计引物,采用RT-PCR和RACE方法克隆基因cDNA全长,并用半定量PCR法研究基因在不同组织中的表达。克隆得到1个基因全长962 bp,命名为PaMADS2(GenBank登录号:HQ229606),包含1个633 bp的开放阅读框,编码210个氨基酸。序列比对和进化分析表明,PaMADS2与B类的PI基因家族亲缘关系最近。组织特异性分析表明PaMADS2在雄蕊和花瓣中表达。推断所克隆的PaMADS2基因为MADS-box B类家族成员。

摘要：以紫色番茄为原料测定果实中花青素质量分数并优化其提取条件。以花青素质量分数为指标,通过设计单因素和正交试验对影响紫色番茄提取效果的甲醇体积分数、提取时间和提取温度进行分析,得出紫色番茄果实花青素的最佳提取条件,并分析了光、温度、pH值和金属离子对紫番茄浸提液中花青素的影响效应。结果表明,基于单因素试验和正交试验发现体积分数80%甲醇,30℃提取温度,浸提时间为2 h的提取效果最好;光、温度、pH值、某些金属离子均能对花青素浸提液产生显著影响,光强和温度均与花青素质量分数呈现出负相关性,pH值在酸性范围内对花青素影响较小,受测离子中Mg^(2+)、Ca^(2+)、Al^(3+)、Na^+、Mn^(2+)在提取过程中能保护和提高花青素,而Zn^(2+)、Cu^(2+)却降低了花青素的提取量。该结论为简单、快速、高效、测定紫色番茄果实中花青素质量分数提供了依据。

摘要：阐述了贵州作物种质资源信息管理平台的总体设计与构建及其应用。该平台基于B/S结构,采用MySQL为数据库,使用开源的JavaEE技术平台,以Spring MVC和Mybaties等框架开发完成,实现了贵州作物种质资源信息数据管理、数据检索和贵州省86个县/区用户管理等功能,为促进贵州作物种质资源高效、共享利用提供服务平台。

摘要：为了建立适合绣球的SSR-PCR反应体系,采用正交设计L25(56)对影响SSR-PCR反应体系的5个主要因素(Mg2+、d NTPs、引物、DNA模板和Taq聚合酶)在5个水平上进行优化,筛选出每个因素的最佳水平,建立适合绣球的SSR-PCR反应体系。结果表明,20μL的SSR-PCR反应体系中,DNA模板用量为60 ng,Mg2+浓度为1.5 mmol/L,d NTPs浓度为0.3 mmol/L,引物浓度为0.4μmol/L,Taq聚合酶用量为0.8 U。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,最佳温度退火40 s,72℃1 min,33个循环;72℃延伸10 min,4℃保存。选用10个绣球品种对建立的SSR-PCR反应体系进行验证,结果表明该体系具有较好的稳定性和通用性。建立和优化的绣球SSR-PCR反应体系,为应用SSR分子标记技术开展绣球属植物遗传育种研究提供了理论依据和技术参考。