摘要：【目的】利用杆状病毒表达系统表达诺如病毒(GenegroupⅡ)VP2蛋白,分析其亚细胞定位,为深入研究VP2蛋白的功能奠定基础。【方法】设计可扩增完整ORF3基因片段的引物P1和P2,在下游引物中引入6×His标签的编码序列,从质粒pMD-ORF3中克隆了含有6×His编码序列的ORF3基因,与pFastBac1载体连接,构建重组质粒pFB-ORF3,转化DH10Bac感受态细胞获得重组杆状病毒基因组Bac-ORF3,脂质体介导转染sf9昆虫细胞获得表达VP2蛋白的重组杆状病毒Ac-VP2,感染sf9细胞后,收集病变细胞,采用抗6×His标签的单克隆抗体作为一抗进行Western blot与间接免疫荧光实验鉴定。【结果】Western blot实验证实Ac-VP2感染的sf9细胞在约29 kD处出现特异性条带;间接免疫荧光实验证实Ac-VP2感染的sf9细胞出现特异性绿色荧光,并且VP2主要定位于sf9的细胞核与细胞膜。【结论】诺如病毒VP2蛋白在Ac-VP2感染的sf9细胞中获得成功表达,并且主要定位于sf9细胞的细胞核与细胞膜。

摘要：离子液体是一类熔点低于100℃的有机熔融盐,通常由不对称的有机阳离子和阴离子组成,其性质可以通过改变阴阳离子组成灵活调节,被称为"设计者的溶剂"。由于其特殊的物理化学性质,离子液体在有机化学和分析化学等领域得到广泛应用,本文主要从离子液体类型、结构和性能等角度综述其在萃取前处理、色谱、毛细管电泳及电分析、光谱等领域中的研究进展,从应用机理角度对比不同离子液体在各领域应用中的优缺点,这对离子液体目前的应用状况及今后发展有较好的指导意义。通过对其发展前景的展望,表明离子液体在色谱分析和毛细管电泳等领域呈现出巨大的发展潜力。此外,设计研发新型离子液体和深入探讨其萃取分离机理,将有力推动其在分析科学领域中的研究发展,离子液体在复杂样品分析和痕量检测方面也将具有广阔的应用前景。