摘要：目的利用pRNAT—U6．1／Neo质粒构建靶向NFAT1基因的3个shRNA，为下一步探索肺癌基因治疗的RNA干扰途径奠定基础。方法设计3对shRNA（NFAT1-sh-1、NFAT1-sh-2、NFAT1-sh-3），以人类基因同源性差的无关序列（NFAT1-sh—NC）作为阴性对照。筛选与人类其他基因同源性小、特异性针对目的基因的siRNA。合成并克隆至带有u6启动子的pRNAT—U6．1／Neo质粒中，构建质粒表达载体，通过凝胶电泳鉴定后转化至大肠杆菌中进行培养，并提取质粒进行DNA测序鉴定。结果成功构建和筛选出靶向NFAT1基因的3对shRNA质粒表达载体，GC比例为40％-55％。结论构建的3个靶向NFAT1基因shRNA质粒表达载体有助于肺癌靶向基因治疗RNA干扰的研究。为筛选有效的基因干扰载体，以及对荷瘤肺癌裸鼠靶向RNAi抗肿瘤细胞生长的研究鉴定了基础。

摘要：背景:目前对于漏斗胸微创矫形在生物力学方面的研究已经取得了一些进展,但还缺少脊柱侧弯矫形对漏斗胸胸廓变形的影响,没有脊柱侧弯与漏斗胸同时矫形方面的研究工作。目的:探索漏斗胸与脊柱侧弯同时矫形对畸形胸廓变形的影响,为临床矫形手术方案设计提供参考。方法:采用三维重建方法,利用漏斗胸合并脊柱侧弯病例的CT图片,重建漏斗胸合并脊柱侧弯的胸廓实体模型,采用数值模拟方法模拟对漏斗胸微创矫形和脊柱侧弯拉伸矫形同时矫形的过程。结果与结论:(1)从漏斗胸和脊柱侧弯同时矫形后再卸载的数值结果来看,T3-T5节胸椎两侧的横突有向左(X方向)移动1 mm左右,这说明漏斗胸和脊柱侧弯同时矫形对脊柱侧弯有一定的帮助;(2)通过对比漏斗胸和脊柱侧弯同时矫形与单纯漏斗胸矫形的数值结果可以看出,胸骨柄的最小位移差别明显,同时矫形再卸载脊柱拉伸矫形胸在Y方向上比单纯进行漏斗胸矫形的位移大13.358 mm,说明采用同时矫形再卸载脊柱拉伸矫形对漏斗胸畸形改善有利;(3)在等效应力分布上,同时矫形后胸骨受到的最大应力比单纯进行漏斗胸矫形应力降低24.6 MPa,说明同时矫形后再卸载脊柱拉伸矫形载荷能够显著降低胸廓的等效应力,有助于减轻患者的术后胸廓疼痛问题;(4)结果提示,漏斗形和脊柱侧弯同时矫形不仅对脊柱侧弯改善有利,对漏斗胸病症也有改善作用。

摘要：本文用数值模拟方法研究漏斗胸合并脊柱侧弯矫形过程,目的在于为临床手术提供参考,降低手术风险,提高疗效.文中采用三维重建方法重建了漏斗胸合并脊柱侧弯的前胸廓模型,模型包括2个胸骨、12对肋骨及肋软骨、12个胸椎,导入有限元软件建立三维有限元模型,模拟矫形手术过程,与临床手术结果进行了比较.数值模拟结果显示对漏斗胸合并脊柱侧弯畸形矫形后,漏斗胸症状得到明显改善,同时对脊柱侧弯产生一定影响,胸腔凹陷畸形与脊柱侧弯的弓形畸形在同一侧,脊柱侧弯症状得到改善.对骨之间连接方法的研究显示,点面耦合位移约束比点点耦合位移约束刚度大,位移结果数值接近,应力数值有一定差别.基于计算结果,设计了2根矫形带的矫形手术方案,进行了手术,经验证,计算结果与与临床手术结果相符,文中对漏斗胸合并脊柱侧弯微创矫形过程的数值模拟对于指导临床手术方案设计有参考价值.

摘要：认识和了解漏斗胸合并脊柱侧弯先行脊柱侧弯矫形对漏斗胸胸廓变形的影响,预测胸廓的变形,为临床手术方案设计提供参考.在基于漏斗胸合并脊柱侧弯病例胸廓的结构与尺寸,创建了畸形胸廓实体模型,创建了脊柱侧弯矫形的钉棒系统,采用数值模拟方法模拟了钉棒系统矫形脊柱侧弯的手术过程.数值模拟结果显示对漏斗胸合并脊柱侧弯畸形先行脊柱侧弯矫形后,脊柱侧弯症状得到明显改善,漏斗胸胸壁凹陷有减轻的趋势.漏斗胸合并脊柱侧弯畸形先行采用钉棒系统进行脊柱侧弯矫形不会加重漏斗胸病症,研究结果可以为临床制订先行脊柱侧弯矫形手术方案提供参考.

摘要：目的了解体外心肺复苏(ECPR)在心搏骤停患儿中的应用现况及实施困难。方法横断面调查35家医院,设计“儿童ECPR信息调查表”(简称调查表),共收集33家医院385例进行ECPR患儿的信息,对中国儿童ECPR技术开展情况、体外膜氧合(ECMO)机器管理、ECPR指征把控、ECPR实施困难等进行现况调查。根据进行ECPR患儿年龄、调查单位地区分布及调查单位性质进行分组比较撤机、出院存活率。采用χ^(2)检验和单因素方差分析进行组间比较,使用LSD法进行事后检验,两两比较使用Bonferroni法进行检验水准调整。结果385例进行ECPR患儿中男224例、女161例。撤机存活185例(48.1%),出院存活157例(40.8%)。因心脏疾病行ECPR的患儿最多为324例(84.2%),因呼吸衰竭行ECPR的患儿为27例(7.0%)。进行ECPR患儿首要的死亡原因为循环衰竭82例(35.9%),其次为脑功能衰竭80例(35.0%)。ECPR最常见实施地点仍为重症监护病房(ICU)(278例,72.2%),ECPR时置管多为切开置管(327例,84.9%)。32家(91.4%)医院已设立ECMO应急小组,ECMO机器共有125台,主要分布于ICU(89台,71.2%),绝大多数医院(32家,91.4%)未备有提前预充的环路。不同年龄段、不同地区及不同性质医院间进行ECPR患儿的撤机存活率及出院存活率差异均无统计学意义(均P>0.05)。非ICU环境下没有配备ECMO机器(16次)、心肺复苏下置管有难度(15次)、从CPR到ECMO转流时间间隔过长(13次)、没有常规配备备用的ECMO环路(10次)、ECMO应急团队无法快速到达现场(5次)被认为是排在前5位的非ICU环境下ECPR实施的难点。结论ECPR已在我国儿科领域逐步开展,需要进一步规范化操作与管理,非ICU环境下的ECPR仍是难点。

摘要：目的研究漏斗胸合并脊柱侧弯畸形先行脊柱拉伸矫形对漏斗胸胸廓变形的影响,预测胸廓变形,有助于降低手术风险和提高手术质量。方法选择北京军区总医院胸外科1例16岁男性漏斗胸合并脊柱侧弯畸形患者胸廓CT图,采用三维重建方法重建漏斗胸合并脊柱侧弯的胸廓模型,导入ANSYS软件建立三维有限元模型,用数值模拟方法模拟侧弯脊柱拉伸矫形手术过程,分析脊柱在冠状面及矢状面的位移,并观察分析胸骨在矢状面的位移。结果矫形前的脊柱,胸椎T_3~T_4段向右(X正方向,冠状面)凸出,胸椎T_7~T_9段向左(X负方向,冠状面)凸出。对其先行脊柱拉伸矫形后,胸椎T_3~T_4段矫形后冠状面的位移场(UX)位移为-2.487 mm,胸椎T_7~T_9段UX位移为3.313 mm。脊柱矫形后,最大位移出现在与胸骨柄相连的第1肋上,最大值为13.879 mm;大于2 mm后,胸骨柄的塌陷位移增加较快,拉伸位移超过4 mm以后,胸骨塌陷位移与脊柱拉伸矫形位移呈线性关系。脊柱拉伸矫形后脊柱的最大应力为30.2 MPa,出现在胸椎T_1~T_2段;椎间盘的最大应力为7.03 MPa。矫形力最大为467.9 N,脊柱侧弯得到改善。结论漏斗胸合并脊柱侧弯畸形先行脊柱侧弯拉伸矫形会加重漏斗胸病症,临床应该先行漏斗胸微创矫形。