摘要：漆酶能够高效降解木质素、酚类、胺类等难降解化合物,在造纸、纺织、环保等诸多领域具有良好应用前景.以采集自广西十万大山国家森林公园的高产漆酶革耳属真菌为材料,开展分类鉴定、菌丝最适培养条件、液体发酵产漆酶条件以及染料脱色活性研究.结合形态鉴定与ITS鉴定,确定目标菌株F1625为野生革耳(Panus rudis);结合生长速度和长势,菌丝生长最适碳源为葡萄糖,氮源为酵母浸粉,碳氮比为10/1-20/1,生长因子为维生素B_(1)或维生素C,pH为6-8,温度为32℃,该菌株为高温菌株.液体发酵产漆酶研究表明,PD培养基优于菌丝最适培养条件培养基,Cu^(2+)对产漆酶有抑制作用,而愈创木酚能够诱导漆酶表达.PD培养基添加3.20 mmol/L愈创木酚,在144 h时达到最大酶活,为(4.59±0.04)×10^(3)U/L.F1625菌株发酵液对偶氮染料脱色效果显著,24 h对伊文思蓝和铬黑T的脱色率分别为60.83%±1.40%和65.03%±0.67%.本研究表明F1625菌株在产胞外漆酶和染料降解方面具有潜在应用价值.(图7参26)

摘要：为探究八倍体‘红颜’草莓(Fragaria×ananassa Duch.)果实着色过程中的关键基因,本研究通过对前期果实表皮部位RNA-Seq数据的研究,筛选花色素苷合成途径的差异表达基因黄烷酮3-羟化酶基因(Flavanone 3-hydroxylase)。根据‘红颜’草莓F3H基因序列设计一对引物,利用RT-PCR技术从中克隆F3H核苷酸序列,命名为FaF3H。将基因上传GenBank数据库获得八倍体‘红颜’草莓F3H基因登录号(MZ190021),并进行生物信息学分析。利用实时荧光定量方法分析草莓果实着色过程中该基因表达水平。结果显示,‘红颜’草莓FaF3H基因长度为1095 bp,编码364个氨基酸。保守结构域分析显示,具有一个PLN02515超家族结构域。RT-qPCR结果表明FaF3H基因在草莓果实大绿期到白果期表达量下降,全红期表达量最高。FaF3H基因在草莓果实花色素苷合成过程中发挥重要作用。

摘要：该研究以双孢蘑菇(Agaricus bisporus)传统麦草配方作为对照,分别用玉米秸秆和杏鲍菇菇渣替换部分麦草设计2个新配方,通过理化性状、细菌群落动态及产量分析,评价玉米秸秆或杏鲍菇菇渣用于工厂化双孢菇生产的可行性。分别在建堆、一次发酵结束、二次发酵结束3个时期采集堆肥样品,提取总DNA,以大肠杆菌(Escherichia coli)16S r DNA V3区通用引物,进行PCR‐DGGE扩增和序列分析,同时分析培养料理化性状,并测定双孢蘑菇产量。研究结果:玉米秸秆配方基质颗粒比较粗大,含氮量较低,二次发酵结束时与麦草配方具有较多的共有优势菌群,两者的细菌多样性指数变化规律也基本一致。菇渣配方基质颗粒比较细碎,含氮量较高,其堆肥3个时期的优势细菌种类、多样性指数变化趋势与麦草配方明显不同。传统麦草配方具有良好的理化性状和稳定的细菌群落,玉米秸秆、杏鲍菇菇渣代替部分麦草的配方仍需进一步优化。

摘要：为充分利用蘑菇产地的农业废弃物资源,在工厂化生产模式下探索以稻草、玉米秸、杏鲍菇菇渣代替部分麦草的双孢蘑菇(Agaricus bisporus)培养料配方的可行性.以麦草配方为对照设计配方,分别在堆料期和出菇期取培养料样品,提取总DNA,采用PCR-DGGE技术分析细菌群落结构,同时测定理化性状和产量,利用SPASS软件进行结果分析.结果显示:堆料期回收优势条带59条(KR089383-KR089441),分为5个门22个属;出菇期回收37条(KR089346-KR089382),分为5个门13个属;变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria)的多个种属为各配方共有的优势菌;与传统麦草配方相比,添加玉米秸秆的配方在堆肥初期细菌多样性较高,但以后持续下降;各配方堆肥期和出菇期细菌群落明显不同.不同配方堆肥期和出菇期培养料含氮量、灰分、电导率(EC)均呈上升趋势,含碳量、碳氮比、含水量以及p H均呈下降趋势,一潮菇后添加菇渣和玉米秸秆的配方含水量急剧下降.添加稻草、菇渣配方的产量稍低于对照纯麦草,添加玉米秸秆的配方产量最低.因此,双孢蘑菇培养料细菌群落和理化特性因原料配方不同表现出一定的差异;综合分析,用稻草和菇渣代替部分麦草的配方是可行的,而添加玉米秸时还需要进一步改进配方或工艺.

摘要：根据森林草莓(Fragaria vesca)果胶裂解酶(Pectate lyase)基因序列信息设计引物,克隆了森林草莓‘Ruegen’的果胶裂解酶基因PLA、PLB和PLC。利用MEGA5.0软件将这3个基因编码的氨基酸序列与其他植物的果胶裂解酶氨基酸序列进行聚类分析,同时采用荧光定量PCR的方法对‘Ruegen’植株不同器官及不同发育时期果实的果胶裂解酶基因表达量进行分析。结果表明:PLA、PLB和PLC在其植株各器官中均有表达,且在发育后期果实中的表达量明显高于其他器官,结合进化树以及果实发育过程中果胶裂解酶活性变化,推测果胶裂解酶基因对草莓果实发育后期的软化具有调节作用。

摘要：分别以玉米秸、牛粪和稻草、牛粪为主要原料,设计两种双孢蘑菇(Agaricus bisporus)堆肥配方并进行堆肥发酵,研究二者堆肥过程中细菌群落多样性.在建堆、一次发酵结束和二次发酵结束3个时期分别采集堆肥样品,提取总DNA,以大肠杆菌16S rDNA序列设计通用引物,进行PCR-DGGE扩增和序列分析.结果获得56条特异条带16S rDNA基因信息(GenBank登录号为KF630598-KF630653),分属于细菌的7个门、42个属.两种配方堆肥过程中主要类群属于变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria),主要的优势种属包括Bacillus属、Paenibacillus属、Thermomonospora属、Thermasporomyces属、Pseudomonas属和Cellvibrio属.多样性指数分析显示,在堆肥过程中,稻草配方微生物多样性变化呈连续上升趋势,而玉米秸配方堆肥微生物多样性呈先升高、再降低的趋势.主成分分析(PCA)显示,玉米秸配方一次发酵结束的样品与二次发酵结束的样品聚为一类,说明玉米秸配方堆肥比预期提前腐熟.本研究表明,稻草配方微生物多样性高,所需腐熟时间长;玉米秸配方微生物多样性略低,但所需腐熟时间大大缩短.

摘要：为了解叶绿素合成关键酶基因在大豆不同生育期的表达情况,本研究以拟南芥叶绿素合成关键酶基因序列设计引物,大豆科丰14和它的持绿突变体BN108为试材,利用半定量RT-PCR分析了9种叶绿素合成关键酶基因在开花期和成熟前期表达量的变化。结果表明,HEMA、GSA、HEME、POR、CHLG基因在成熟前期表达量显著下降(p<0.05),尤其是HEMA和GSA基因的表达量下降幅度较大,说明上述基因在叶绿素生物合成过程中起到主要调控作用;而突变体BN108有别于科丰14,GSA、HEME、CHLM和CAO基因表达量在成熟前期不降反升,推测持绿突变体在成熟前期叶绿素能够维持较大的合成量,是植物持绿现象的重要原因之一。

摘要：为研究草莓FvMOB1基因参与生长素调控生长发育及细胞增殖过程中的作用,以森林草莓(Fragraria vesca)‘Hawaii 4’为材料,对同源基因FvMOB1A和FvMOB1B的编码区序列进行基因克隆,对基因进行生物信息分析。应用荧光定量PCR分析了FvMOB1在森林草莓不同器官、不同发育时期果实和IAA处理不同天数的幼苗中的相对表达量,对FvMOB1蛋白进行亚细胞定位和酵母双杂互作分析。结果表明,FvMOB1A和FvMOB1B的开放阅读框分别为648和651 bp,编码215个和216个氨基酸。在森林草莓中,FvMOB1A的表达量远远高于FvMOB1B,其中FvMOB1A在根和瘦果中表达量高,茎中最低,FvMOB1B在瘦果和茎中表达量相对较高,叶中最低;两个基因都在花后30 d(成熟后期)果实中表达最高;幼苗经IAA处理后两个基因的表达模式相同,表达量都显著上调并在7 d达到峰值。FvMOB1A和FvMOB1B蛋白定位在细胞核和细胞膜上,酵母双杂交验证二者均可与促分裂原活化蛋白激酶FvM4K1蛋白互作。

摘要：原油开采、加工和运输过程中会造成环境污染.为获得原油高效降解真菌,以采集自内蒙古、广西和北京的56株真菌为材料,开展高效降解菌筛选、鉴定及降解酶研究.通过原油耐受性初筛和愈创木酚、α-萘酚、苯胺蓝平板复筛,获得目标菌株JY-11.结合形态与分子鉴定,确定该菌株为硬毛香菇(Lentinus strigosus),其菌丝体最适培养条件为:可溶性淀粉作为碳源,酵母浸粉作为氮源,最适温度为36℃,最适C/N为20/1、最适生长pH为***-11菌株在添加0.5%原油的降解培养基30℃、150 r/min振荡培养10 d,原油降解率为70.88%±2.48%.在添加0%-2%原油的原油降解培养基30℃、150 r/min振荡培养20 d,各处理发酵液中均具有漆酶活性,而缺乏锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶活性;Native-PAGE漆酶同工酶电泳显示,原油的添加对漆酶具有诱导作用.JY-11菌株发酵液具有较高的抗氧化活性,原油降解培养基不添加原油组,48 h时抗氧化活性为7.57±0.01 mmol/L(FeSO4),添加0.5%原油组表现出最高的抗氧化活性,为11.83±0.01 mmol/L(FeSO4).本研究获得了具有高效降解原油活性的真菌,可以通过分泌胞外酶降解原油,具有潜在的环境修复应用前景.

摘要：采用MEGA5.0软件对9个森林草莓无机磷转运蛋白序列及58个已知的其它植物磷转运蛋白的氨基酸序列进行聚类分析,发现5个基因与菌根磷转运蛋白基因分支聚在一起,初步判断是候选的草莓菌根磷转运蛋白。根据其基因序列设计引物获得了5个‘红颜’草莓候选菌根磷转运蛋白基因全长。实时荧光定量PCR结果表明,FaPT4、FaPT5和FaPT8在草莓菌根中显著上调表达,结合聚类分析结果,证明这3个基因是‘红颜’草莓菌根磷转运蛋白基因。