摘要：以美洲南瓜(Cucurbita pepo)幼叶为材料,采用Trizol方法进行总RNA的提取。根据GenBank上已提交的黄瓜WRKY4基因序列保守区域设计特异性引物,扩增得到1条长度为497bp的WRKY4转录因子基因片段,利用已知中间序列,通过RT-PCR和RACE(rapid amplification cDNA ends)等技术,克隆得到美洲南瓜WRKY4的cDNA全长序列,长度为1722bp,5'非翻译区为185bp,3'非翻译区为118bp,开放阅读框为1419bp,编码472个氨基酸,分子量约为51.40kD,等电点约为8.36,GenBank登录号为JX096811。用Blast和DNAMAN软件对其核苷酸序列进行分析,结果显示,美洲南瓜WRKY4与黄瓜WRKY4同源性达到87%。美洲南瓜WRKY4基因克隆及序列分析为以后研究此基因的功能奠定了基础。

摘要：NAC转录因子是特异存在于植物中具有多种生物功能的新型转录因子,其家族成员N端含有保守氨基酸序列,C端为高度变异的转录激活区。本研究以南瓜叶片为材料,根据甘蓝型油菜NAC1、番茄NAC、辣椒NAC保守结构域设计1对简并引物,采用RT-PCR方法扩增得出长度约为440bp大小的DNA片段,将其克隆至pMDl9-T载体上,而后对重组克隆进行测序,用BLAST和DN AMAN软件对核酸及氨基酸序列进行分析,结果表明所获得的南瓜NAC基因片段由442个碱基组成,编码147个氨基酸,命名为CmNAC。该基因片段具有其他植物NAC基因中存在的保守区,并且属于NAC家族中ATAF1/2亚家族。

摘要：WRKY转录因子在植物应对生物或非生物胁迫的反应及生长和发育中起重要作用,为研究WRKY转录因子在番茄中的功能,本研究根据课题组已经克隆的番茄WRKY转录因子片段设计引物,采用RT-PCR方法,从JA诱导的番茄幼苗中,获得了608bp的cDNA片段。序列分析表明,该序列含有WRKYGQK保守结构域,与Capsicum annuum WRKY-c序列相似性是79%,与Nicotiana tabacum NtWRKY-7序列相似性是74%,表明已经成功克隆了番茄WRKY2基因片段。

摘要：本试验旨在研究和比较不同硒源及水平对蛋用种公鸡肝脏中硒含量、抗氧化性、硒酶活性及谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)基因mRNA表达水平的影响。试验采用单因子试验设计,选取196只150日龄海兰褐蛋用种公鸡,随机分为7个处理,每个处理4个重复,每个重复7只。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂分别在基础饲粮中添加0.4、0.8和1.2 mg/kg硒化壳聚糖(SC)和亚硒酸钠(SS)2种硒源的试验饲粮。试验期35 d。结果表明:1)2种硒源及水平对生长性能无显著影响(P>0.05)。2)饲粮添加SS和SC均能显著增加血浆和肝脏的硒含量(P<0.05);且随着饲粮添加硒水平的增加而机体硒含量增加。3)SC组能显著提高谷胱甘肽过氧化物酶、总超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性(P<0.05),显著降低丙二醛含量(P<0.05)。4)SS组和SC组均能提高各试验组的硫氧还蛋白还原酶和Ⅰ型脱碘酶活性(P<0.05);且SC组显著高于SS组(P<0.05)。5)硒添加水平为0.8 mg/kg时,SC组的GPx4基因mRNA相对表达水平与对照组相比显著升高(P<0.05)。综上所述,不同硒源及添加水平均可影响蛋用种公鸡肝脏中硒含量、抗氧化性、硒酶活性及GPx4基因mRNA表达水平,其中有机硒优于无机硒。

摘要：以三叶期玉米幼苗为材料,根据NAC转录因子特有的保守结构设计特异引物,利用RT-PCR技术获得一个玉米NAC转录因子的基因片段,并对该片段进行了测序和生物信息学分析。测序分析结果表明,克隆得到的NAC转录因子基因片段为230 bp,聚类分析结果表明其属于NAC家族的NAM亚类。该片段的获得为克隆玉米NAC转录因子基因全长,进而为玉米抗逆育种奠定了基础。

摘要：本试验旨在探讨不同饲粮粗蛋白质水平下黑水虻蛋白替代豆粕对蛋鸡生产性能、蛋清品质及血清蛋白质代谢指标的影响。采用单因素随机试验设计,选用252只产蛋率相近的33周龄罗曼白蛋鸡,随机分为3组,每组7个重复,每重复12只鸡。各组分别饲喂标准回肠可消化氨基酸(SIDAA)平衡模式下配制的不同粗蛋白质水平(16.50%、14.85%、13.20%)的玉米-豆粕-黑水虻蛋白饲粮,各组黑水虻蛋白与豆粕提供等量的粗蛋白质。预试期2周,正试期12周。结果表明:1)与16.50%组相比,14.85组%和13.20%组的产蛋率和平均日采食量无显著影响(P>0.05),平均蛋重显著降低(P0.05)。2)与16.50%组相比,14.85%组的平均蛋重、蛋清重、浓蛋白重、蛋白高度、哈氏单位和蛋清比例均无显著差异(P>0.05);13.20%组的平均蛋重、浓蛋白重、蛋白高度显著降低(P0.05)。16.50%和13.20%饲粮粗蛋白质水平对蛋鸡输卵管膨大部分泌功能有轻微不良影响。由此可见,在SIDAA模式下,以黑水虻蛋白替代豆粕并使饲粮粗蛋白质水平降低至14.85%时对鸡蛋蛋清品质无不良影响。

摘要：本试验旨在研究不同饲粮粗蛋白质水平下蝇蛆蛋白替代豆粕对蛋鸡生产性能、蛋清品质及血清蛋白质代谢指标的影响。采用单因素试验设计,选取252只产蛋率、体重相近的健康33周龄罗曼白蛋鸡,随机分为3组,每组7个重复,每个重复12只鸡。各组分别饲喂标准回肠可消化氨基酸(SIDAA)平衡模式下配制的不同粗蛋白质水平(16.50%、14.85%、13.20%)的玉米-豆粕-蝇蛆蛋白饲粮,各组蝇蛆蛋白与豆粕提供等量的粗蛋白质。预试期2周,正试期12周。结果表明:1)与16.50%组相比,14.85%组的产蛋率、平均蛋重、产蛋量、平均日采食量和料蛋比均无显著差异(P>0.05);13.20%组的料蛋比显著增加(P0.05);13.20%组的平均蛋重、蛋清重、浓蛋白重和蛋白高度显著降低(P0.05)。3)各组血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性及总蛋白、白蛋白、尿酸含量无显著差异(P>0.05),且输卵管膨大部组织学形态正常。由此可见,在本试验条件下,使用蝇蛆蛋白替代豆粕并使饲粮粗蛋白质水平降低至14.85%时未对蛋鸡生产性能和蛋清品质产生不良影响,但饲粮粗蛋白质水平降低至13.20%时则会产生不利影响。

摘要：本试验旨在评价脱酚棉籽蛋白质型饲粮中亮氨酸(Leu)对产蛋高峰期蛋鸡生产性能、蛋清品质和血清生化指标的影响。采用单因子完全随机试验设计,选用产蛋率和体重相近、28周龄的健康海兰褐产蛋高峰期蛋鸡288只,随机分为4个组,每组6个重复,每个重复12只鸡。等能(11.11 MJ/kg)、等氮(16.5%粗蛋白质)、标准回肠可消化氨基酸(SID AA)模式条件下,对照组(SBM组)饲喂豆粕型饲粮,试验组分别饲喂脱酚棉籽蛋白质型饲粮(LCSM组)、脱酚棉籽蛋白质型饲粮+Leu(LCSM+Leu组)和脱酚棉籽蛋白质型饲粮+2倍Leu(LCSM+2Leu组)。预试期1周,正试期12周。结果表明:1)整个试验期,与SBM组相比,LCSM、LCSM+Leu和LCSM+2Leu组蛋鸡的产蛋率、平均蛋重、平均日产蛋量和料蛋比均无显著差异(P>0.05),1~12周时的平均日采食量显著降低(P0.05)。第12周时,与SBM相比,LCSM、LCSM+Leu和LCSM+2Leu组的蛋清重、浓蛋白的干物质重和粗蛋白质含量均显著降低(P0.05)。第12周时,与SBM组相比,LCSM+2Leu组的血清总蛋白(TP)含量显著降低(P<0.05);LCSM和LCSM+2Leu组的血清球蛋白(GLB)含量显著降低(P<0.05)。由此可见,Leu不能改善由脱酚棉籽蛋白质作为产蛋高峰期蛋鸡饲粮的唯一蛋白质来源导致的鸡蛋蛋清品质下降。

摘要：为鉴别猪博卡病毒1型、2型和3型3种基因型,根据猪博卡病毒基因序列分别设计3对针对保守区域的引物进行PCR扩增,扩增目的片段大小分别为645 bp(PBoV1型)、352 bp(PBoV2型)和259 bp(PBoV3型)。通过引物浓度和退火温度等条件优化,首次建立了同时检测猪博卡病毒3种基因型的三重PCR方法。所建立的三重PCR方法扩增其他猪病病毒结果均为阴性,最低检测限为8×10-7ng/μL。结果表明,该方法具有较好的特异性和敏感性。对临床样品进行三重PCR和单项PCR检测,对比结果显示符合率为100%。该方法的建立为猪博卡病毒3种不同基因型的鉴别检测提供了有效手段。

摘要：本试验旨在研究不同中性洗涤纤维(NDF)与非纤维性碳水化合物(NFC)比值(NDF/NFC)饲粮对肉用绵羊甲烷排放的影响。试验采用4×4完全拉丁方试验设计,将16只杜泊×小尾寒羊杂交羯羊随机分成4组,每组4只,按维持水平饲喂NDF/NFC分别为3.02(饲粮1)、2.32(饲粮2)、1.58(饲粮3)、1.04(饲粮4)的全混合颗粒饲粮(玉米秸秆为粗饲料来源)。试验共进行4期,每期18 d,包括3 d的调整期、7 d的预试期和8 d的正试期,在正试期内测定甲烷产量、饲粮总能和营养物质表观消化率。结果表明:饲粮2的甲烷日排放量显著高于饲粮3和4(43.43 L/d vs.38.88和35.98 L/d;P0.05)。随着NDF/NFC的降低,每千克可消化有机物(DOM)的甲烷排放量逐渐降低,饲粮4的每千克DOM的甲烷排放量显著低于饲粮1、2和3(58.78 L/kg DOM vs.75.00、73.35和64.11 L/kg DOM;P<0.05)。随着NDF/NFC的降低,每千克中性洗涤纤维采食量(NDFI)或酸性洗涤纤维采食量(ADFI)的甲烷排放量逐渐增加,且各饲粮之间差异显著(P<0.05)。综上所述,结合各营养物质表观消化率和甲烷排放效率,在维持水平下,采用NDF/NFC为1.04的玉米秸秆饲粮作为肉用绵羊甲烷减排的饲粮最合适。