摘要：目的通过探索一套适用于急诊实验室自动化流水线系统(TLA)的建设及优化体系,提升实验室自动化流水线项目实施的成功率及医疗资源的有效利用。方法首先通过对设备升级前,即2019年12月16—22日急诊组的工作流程和工作数据进行分析,明确当前短板并确定流水线配置(前后处理单元及分析仪器数量);而后确定方案设计的基本原则并基于此原则进行方案设计,并对不同方案进行数据模拟,通过对不同方案的样本周转时间(TAT)进行对比分析确定最终方案;在方案实施后,对项目实施前后的TAT进行比对分析,评估方案实施效果。结果通过在原场地进行系统升级实现了流水线系统自动化程度和单机检测速度的提升。凝血样本实现了在线检测及存储;在线离心机由1套增加至2套,在线冰箱存储量由9000份样本增加至15000份样本;单机检测速度提升约1倍,生化由2500个测试/h增加至5400个测试/h,免疫由668个测试/h增加至1320个测试/h。在工作量增长9%的情况下,生化免疫急诊样本P95 TAT由96 min缩短至64 min(样本签收至结果审核),下降幅度达33%;且与数据模拟结果保持了高度一致(数据模拟得出的P95 TAT为67 min)。结论在方案设计阶段有效运用数据分析及数据模拟进行方案的设计和评估,可有效降低项目实施失败的风险,确保医疗资源的有效利用。

摘要：目的 使用临床实验室信息系统（LIS）开发生化免疫项目的自动审核程序,评估程序的有效性,并应用于常规工作.方法 设计自动审核的流程,并将其编写为LIS系统的自动审核程序,在程序中设置审核参数,包括自动审核允许范围、历史结果比较允许范围、项目关联性比较参数等.统计每个检验项目的自动审核通过率、分析不通过原因、汇总问题进行分析,根据评估结果修改程序和参数,并由主管技师以上职称的工作人员对自动审核的检验报告进行评估,直到自动审核结果与人工审核结果全部相符,将自动审核程序应用于常规工作.统计每个检验项目自动审核通过率,比较使用自动审核程序前后样本周转时间（TAT）的变化.结果 在实验室信息系统中开发了自动审核程序,并应用于对50个生化免疫项目执行自动审核.单个检验项目自动审核通过率为91.1％ ～96.6％,检验报告自动审核通过率达74％.使用自动审核程序后,TAT由111.6（53.9 ～270.7）min缩短为87.2（45.4 ～202.4）min,其中从仪器出结果到审核的时间由原来的18.6（1.0～99.3）min缩短到0.1（0 ～58.3）min.审核人员由3名减至1名.结论 本室自建的自动审核程序可应用于临床生化免疫检验项目的自动审核.使用自动审核程序可以明显缩短TAT、提高工作效率.周密的流程设计、合理的参数设置、全面的评估验证是建立安全高效的检验报告自动审核系统的保证.

摘要：目的 观察临床诊治路径对非HIV免疫受损宿主（ICH）肺内渗出的病因诊断及预后的影响.方法 历史对照研究,分别纳入2007、2009年间因肺内渗出伴呼吸衰竭入住ICU的ICH作为研究组和对照组.研究组诊治路径主要由判断可能部位、初步病因分析、有序检查及12 h内结果反馈、48 ～72 h治疗反应评估4步组成.病因诊断分为感染、非感染及无法确定.结果 纳入研究组65例,对照组45例.年龄45.3（22 ～71）岁.导致免疫受损的基础病为自身免疫病69例,血液系统恶性疾病21例,实体肿瘤及其他各10例.研究组与对照组在基础疾病、器官功能及人选时疾病严重程度间的差异无统计学意义,而病因诊断率（73.8％比57.8％）、诊断时间（4.0比6.8d）及28 dICU病死率（38.5％比62.2％）差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 本研究设计的诊治路径有助于改善ICH伴肺内渗出的病因诊断及预后.

摘要：目的 在实验室信息管理系统上建立监测检验质量关键指标的体系,实现对实验室检验质量关键指标的管理.方法 收集2014年1月1日至12月31日北京协和医院检验科完成的临床标本.在LIS上设计交互式的输入程序完成信息采集,实现不合格标本率、标本标识错误率、标本丢失事件等指标的统计;记录每份样本的标本采集时间、标本到达实验室时间、标本检测时间、标本审核时间、危急值回报时间等,在LIS系统留下轨迹信息,完成对检验结果回报时间（TAT）合格率、危急值报告通知率等指标的计算;采集每项检测项目的质控信息,形成室内质量控制的数据库,实现质控的失控率、检验项目总误差等关键质量指标的监测.结果 样本管理监测显示2014年度不合格标本率均小于质量目标（1％）,但识别出1～2月份的不合格标本率较高,4个病区标本不合格率＞2％;标本标示错误率为0.47例/10 000例,实现质量目标（＜2例/10 000例）;本年度未发生标本丢失事件,实现质量目标.检验报告管理监测显示TAT合格率总体均在可接受范围内（＞95％）,但识别11月份血常规项目TAT合格率（94.75％）延时,并通过流程改进解决了该问题;危急值回报率实现质量目标（≥98％）,但危急值回报及时率需要加强.质量控制管理的监测显示活化部分凝血活酶时间（APTT）项目在8月份的总误差（CV）明显上升（5.02％）,超过了系统设定的允许CV（5.0％）,并通过更换试剂解决了该问题;凝血酶时间（TT）1至12月份项目CV均远低于允许CV（12.5％）,下一年度TT的允许CV下调至10％.结论 依托LIS的强大数据库管理模式和信息处理能力,建立适合的实验室关键指标监控方案可以达到客观高效的管理实验室检验质量关键指标.

摘要：目的分析白塞病葡萄膜炎(BU)不同疾病分期患者外周血各类白细胞的变化。方法采用病例对照研究设计。收集2015年7月至11月间就诊于北京协和医院眼科的BU患者,其中炎症活动期20例,炎症稳定期21例。炎症活动期BU患者经糖皮质激素和/或免疫抑制剂治疗后转为炎症好转期10例。同期收集于北京协和医院体检的健康对照者82人。抽取受检者外周血并采用HematoFlow血液流式细胞分析平台检测分析12类白细胞分布情况。观察和比较BU患者炎症活动期、炎症好转期、炎症稳定期及健康对照外周血各类白细胞百分比。结果炎症活动期BU组、炎症稳定期BU组和健康对照组外周血成熟嗜中性粒细胞百分比、嗜酸性粒细胞百分比、嗜碱性粒细胞百分比、B淋巴细胞百分比、非细胞毒性T和NK淋巴细胞百分比、颗粒性T和NK淋巴细胞百分比、原始T淋巴细胞百分比、原始B淋巴细胞和未成熟粒细胞百分比总体比较,差异均有统计学意义(F=42.324、10.220、8.660、11.254、29.795、31.305、23.742、27.738和34.638,均P<0.001)。炎症活动期BU组及炎症稳定期BU组患者外周血成熟嗜中性粒细胞百分比分别为(73.10±10.21)%和(62.40±12.09)%,均高于健康对照组的(54.95±6.07)%,炎症活动期BU组患者外周血成熟嗜中性粒细胞百分比高于炎症稳定期BU组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。炎症活动期BU组和炎症稳定期BU组患者外周血非细胞毒性T和NK淋巴细胞及颗粒性T和NK淋巴细胞百分比均低于健康对照组,且炎症活动期BU组患者非细胞毒性T和NK淋巴细胞及颗粒性T和NK淋巴细胞百分比低于炎症稳定期BU组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。炎症好转期BU组患者治疗后外周血未成熟粒细胞百分比较治疗前明显升高,差异有统计学意义(t=-2.469,P=0.036)。结论BU患者炎症活动期外周血成熟嗜中性粒细胞增加,对于监测BU炎症活动有参考意义。

摘要：目的 建立实时定量PCR(RQ-PCR)快速检测血中自念珠菌(Gandiad albicans)载量的方法,并对可能存在肠屏障损伤和肠道菌移位的外科发热患者标本进行检测.方法 基于白念珠菌基因组单拷贝基因NAG1设计引物和探针;构建并制备质粒做标准品;用QIAamp(R) DNA Blood Mini Kit试剂盒提取白念珠菌基因组DNA;建立20μl TaqMan探针RQ-PCR反应体系;对74份外科发热患者临床标本进行定量检测.结果 引物和探针特异性好;标准曲线R2 值0.9918～0.9985,扩增效率0.88～1.027,检测限为100 拷贝/μl上机检测液(即约1.1×103 cfu/ml全血),仪器检测灵敏度为97.46%,特异度为100%,平均准确性为(99.64±2.08)%,批内及批间重复性的平均变异系数分别为(14.76±2.64)%和(17.85±3.53)%;血标本中白念珠菌基因组平均提取效率为(88.60±5.73)%,提取效率平均变异系数为(11.70±5.36)%;标本于-20℃存放3、6个月后和0时间点定量结果比较,差异无显著性(P=0.267);74份外科发热患者血中白念珠菌的阳性率为2.7%,最高含量约为4.42×103 cfu/ml.结论 RQ-PCR可以快速、灵敏、特异地定量检测血标本中白念珠菌,重复性好,适用于临床日常检验.少数外科发热患者周围血中存在白念珠菌.

摘要：目的 结合尿液干化学分析（简称干化学）和有形成分分析（简称尿流式）,制定自动化尿常规分析的复检规则.方法 收集北京协和医院2008年11月至2010年10月1 714份中段尿标本,其中1 300份用于建立复检规则,214份用于验证所建立的规则,另外200份健康体检者的标本用于建立UF-1000i尿流式分析仪的参考范围.所有标本通过Siemens Bayer Clinitek 500型干化学分析仪、Sysmex UF-1000i尿流式分析仪及尿沉渣显微镜（简称尿沉渣）检测,进行RBC、WBC、PRO及CAST分析.针对自动化尿常规的不同检测方法,设计了4种复检方案：（1）方案1：单独使用干化学时RBC、WBC和PRO任何一项参数出现阳性者;（2）方案2：单独使用尿流式时RBC、WBC和CAST任何一项参数超出参考范围上限者;（3）方案3：联合使用2种方法检出的WBC结果不相符合,即同一项参数在一台仪器上检测为阳性或超出参考范围上限,在另一台仪器上检测为阴性或不超出参考范围上限,而RBC、PRO（对应尿流式的CAST）中任何一项参数在任何一台仪器上出现阳性或超出参考范围上限者;（4）方案4：联合使用2种方法检出的RBC、WBC、PRO（对应尿流式的CAST）结果不相符合者.通过Sysmex Laboman UriAccess Ver 3.0软件进行统计分析,建立不同检测方法的自动化尿常规分析的复检规则.结果 UF-1000i尿流式分析仪的参考范围：RBC为0～7.5个/μl（男）、0～15.9个/μl（女）;WBC为0～11.6个/μl（男）、0～12.7个/μl（女）;上皮细胞为0～6.5个/μl（男）、0～21.4个/μl（女）;CAST为0～1.3个/μl.尿沉渣显微镜镜检结果显示,1 300份用于建立复检规则的标本中,阳性标本占47.46%（617/1 300）,阴性标本占52.54%（683/1 300）.在阳性标本中,RBC阳性者最多,占60.13%（371/617）,其次为CAST阳性者,占8.43%（52/617）.4种方案的假阴性率（漏诊率）分别为8.38%（109/1 300）、4.69%（61/1 300）、0.62%（8/1 300）和0.54%（7/1 300）;复检率分别为47.85%（622/1 300）、59.38%（772/1 300）、72.85%（947/1 300）及52.23%（679/1 300）;方案4的漏诊病例中无1例血肌酐结果异常.采用214份临床标本对所建立的复检规则（方案4）进行验证,其漏诊率为0,复检率为53.74%（115/214）.结论 方案4的漏诊率最低,复检率也较低,且无严重肾功能异常者漏诊,是理想的复检方案.

摘要：目的探讨HIPK2对顺铂诱导的人肾小管上皮细胞(HKC)凋亡的影响。方法构建顺铂诱导的HKC细胞凋亡模型,实时荧光定量PCR和Western blot检测HIPK2的表达;设计合成2条HIPK2 siRNA干扰片段,通过脂质体转染HKC细胞,建立HIPK2干扰的细胞株;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测HIPK2 mRNA和蛋白的表达;再用顺铂处理细胞,Annexin V/PI检测细胞凋亡;Western blot检测Bax表达的影响。结果顺铂呈剂量依赖性诱导的HKC细胞凋亡过程中,HIPK2 mRNA和蛋白表达水平均明显下调(P<0.05);转染siRNA后可显著降低HIPK2在HKC细胞内mRNA和蛋白的表达(P<0.05),且HIPK2表达降低后会促进顺铂诱导的HKC细胞凋亡。结论HIPK2可抑制顺铂诱导的HKC细胞凋亡。

摘要：随着微生物检验技术的发展,特别是基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱技术以及微生物标本液体转运技术的运用,使微生物实验室自动化愈加可行。人们期盼的成功的自动化系统设计灵活,能将实验室人员从一些技术要求较低的、能由仪器完成的工作中解脱出来,从而提高标本处理效率,并减少资源浪费。目前,研发和使用的微生物实验室自动化系统可分为三大部分,第一部分为标本处理系统,第二部分为能提供全微生物实验室自动化解决方案的系统,包括为达到不同级别自动化程度的各种模块,第三部分为各种微生物自动化鉴定和药敏系统。现在,临床微生物检验流程已进入革新时代,虽然大量的评估工作还有待完成,但微生物自动化系统必将对临床微生物实验室工作水平的提高与技术发展产生深远的影响。

摘要：目的探讨中国北方汉族人群KIF6基因Trp719Arg多态性基因型和等位基因频率分布特点,及与2型糖尿病(DM)合并冠心病(CHD)的关联性。方法采用病例对照研究设计,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析了对照组(152例)、DM组(97例)、DM+CHD组(76例)KIF6基因Trp719Arg多态性;比较组间基因型和等位基因频率分布差异,研究基因多态性对血糖、血脂水平的影响。结果中国北方汉族人群Trp719Arg多态性TT、TC、CC基因型频率分别为0.281、0.499与0.220。T、C等位基因频率分别为0.531与0.469。KIF6基因Trp719Arg多态性基因型和等位基因频率组间分布差异无统计学意义(均为P>0.05)。KIF6基因Trp719Arg多态性对血糖、血脂水平无显著影响。Logistic回归分析显示,高血压、年龄(≥60岁)、低HDL-C水平(<1.04 mmol/L)是DM+CHD的独立危险因素(OR分别为2.850、12.977和4.006,均为P<0.05),C等位基因与DM+CHD的发生无统计学相关性。结论 KIF6基因Trp719Arg多态性可能不是我国北方汉族人群DM+CHD的独立危险因素。