摘要：小鼠miR-499基因包含在心肌重链肌球蛋白Myh7b基因的第19内含子中,并且在心肌细胞中特异表达,然而其在心肌细胞中表达的生物学功能和意义尚不清楚.利用可体外分化为心肌细胞的P19CL6细胞建立稳定表达miR-499的细胞株对研究miR-499的生物学功能具有重要意义.根据小鼠miR-499基因序列,设计PCR引物并将扩增产物定向克隆到pcDNA3.1中构建为真核表达载体并转染小鼠P19CL6细胞,经G418筛选建立了稳定转染的P19CL6-miR-499细胞株.用TaqMan探针实时定量PCR检测表明,P19CL6-miR-499细胞可成功表达成熟的miR-499.经1%DMSO诱导分化,RT-PCR、real-time PCR和激光共聚焦显微镜免疫荧光分析,结果表明,稳定转染miR-499对细胞分化早期的分子标志Isl1和Tbx5的表达没有明显影响,但是对分化晚期的特异性分子心肌α-肌动蛋白(α-cardiac actin)和心肌肌钙蛋白(troponin I)的表达有明显抑制作用,这提示miR-499主要对心肌细胞分化晚期有影响.

摘要：蛋白质-蛋白质相互作用是蛋白质发挥功能的主要机制之一,在DNA损伤修复、自噬和代谢等过程中都扮演着非常重要的角色,蛋白相互作用异常便会导致肿瘤等疾病的发生.在蛋白质的赖氨酸、丝氨酸和苏氨酸等氨基酸残基上,可发生甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等200多种翻译后修饰,这些修饰通常能改变蛋白质的电性、疏水性和空间结构等属性,为与之结合的蛋白提供结合的锚定或产生位阻效应,像一把开关在时空上精确调控蛋白质-蛋白质相互作用的发生以及动态变化.结构研究表明,蛋白质之间的相互作用通常由临近的几个氨基酸残基直接结合,替换该区域的氨基酸残基,通常能破坏结合,使其失去部分功能或酶活性,可以针对性地开发和设计抑制剂或激活剂,用于肿瘤等疾病的治疗.本文简要介绍了蛋白质翻译后修饰在蛋白质-蛋白质相互作用中的调控作用,以及发挥的重要生理功能.

摘要：为了适应新世纪对具有创新能力的高素质医学人才的培养要求，北京大学医学部制定了“新途径”医学教育教学改革方案，基础医学实验是“新途径”教学改革的重要组成部分。本文从实验教学改革的目的、新实验课程体系的整体设计、实施过程中发现的问题等方面，详细介绍了“新途径”教育教学改革中基础医学实验教学改革的思路与实践。经过2年的实践，教师和学生对新实验课程体系满意度较高。基础医学实验教学改革改变了沿袭多年的传统实验教学模式，形成了加强学科融合、注重科研思维训练、强调创新能力培养的新实验课程体系。

摘要：Calnexin/Calreticulin循环与糖蛋白内质网相关性降解 (GERAD)是真核细胞内负责糖蛋白折叠质量的重要监控机制 ,监督糖蛋白在内质网中空间构象的正确折叠 ,促进未完全折叠糖蛋白再折叠 ,错误折叠糖蛋白经GERAD途径被降解。内质网应激引起内质网功能障碍时 ,Calnexin/Calreticulin循环和 (或 )GERAD发生异常 ,错误折叠的糖蛋白在内质网堆积导致细胞功能障碍和某些疾病的发生。错误折叠糖蛋白从Calnexin/Calreticulin循环释放到GERAD一系列途径的分子机理现已逐渐明了 ,了解糖蛋白Calnexin/Calreticulin循环与内质网相关性降解过程对进一步设计针对病毒性肝炎、帕金森病等疾病的治疗方案有重要的指导意义。

摘要：目的 :观察熊脱氧胆酸 (UDCA)对新西兰兔胆囊结石形成、肝氨肽酶N(APN)mRNA水平及胆汁中APN活性和总蛋白含量的影响 ,探讨UDCA预防胆囊结石形成的机制。方法 :(1)动物模型 :新西兰兔 30只。对照组 10只 ,普通饮食 ;结石组 10只 ,喂含 1.2g·d-1胆固醇的成石饮食 4周 ;UDCA组 10只 ,同时喂饲含 1.2g·d-1胆固醇和 0 .0 45 g·d-1的UDCA饮食 4周。 (2 )APN表达 :根据兔APN基因cDNA序列设计引物 ,提取肝总RNA ,利用RT PCR方法 ,检测肝APNmRNA水平的变化。 (3)APN活性 :用化学法检测。 (4 )胆汁中脂类、总蛋白的含量 :用生化方法检测。 (5 )胆固醇饱和指数 (CSI)计算 :用Carey表计算。 结果 :结石组 6只 (6 / 10 )出现胆囊结石 ,9只 (9/10 )出现胆固醇结晶 ,UDCA组和对照组无结石及结晶出现 ;对照组和UDCA组胆囊胆汁中CSI(对照组 0 .80±0 .0 9、结石组 1.38± 0 .2 7及UDCA组 1.18± 0 .11)、总蛋白浓度 (对照组 1.2 5± 0 .49、结石组 4.5 8± 0 .93及UDCA组 3.12± 0 .78)明显低于结石组 (P均小于 0 .0 5 ) ,而结石组APNmRNAIOD比值 (对照组 0 .6 5± 0 .18、结石组1.0 8± 0 .35及UDCA组 0 .72± 0 .2 3)、APN活性 [对照组 (6 .10± 2 .5 3)U·L-1、结石组 (2 3.6 4± 10 .36 )U·L-1及UDCA组 (8.0