摘要：目的:利用携载大鼠沉默信息调节因子1(SIRT1)基因的慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),构建SIRT1基因表达增高的BMSCs模型。方法:设计合成大鼠SIRT1基因序列,包装成可感染的慢病毒,用不同感染复数(MOI)的慢病毒感染大鼠BMSCs,筛选出适宜的MOI值后,在经慢病毒感染的BMSCs中通过RT-PCR检测SIRT1基因mRNA含量,通过细胞免疫组化检测慢病毒感染的BMSCs中SIRT1蛋白的表达情况。结果:成功构建LV-SIRT1慢病毒,病毒滴度为1×10^(9)TU/mL,其感染大鼠BMSCs后,与对照组相比,SIRT1基因mRNA的相对表达量增高4.71倍,过表达效率为471%(P<0.05),且从细胞免疫组化结果中可见,慢病毒过表达组的染色较深,SIRT1蛋白表达高。结论:成功构建SIRT1基因表达增高的BMSCs模型,为骨科相关疾病的研究提供了细胞模型基础。

摘要：背景:研究表明,地塞米松可以使关节软骨表层基质中的Ⅱ型胶原减少,Ⅰ型胶原增多,但糖皮质激素对关节软骨细胞增殖作用的机制尚不十分清楚。目的:验证地塞米松磷酸钠对体外培养兔关节软骨细胞增殖的影响。设计:对比观察。材料:1月龄新西兰白兔用于软骨细胞的分离与培养。方法:兔关节软骨细胞常规培养后随机分为对照组和实验组,对照组用不含地塞米松磷酸钠的DMEM培养液培养,实验组则分别加入含不同质量浓度地塞米松磷酸钠(0.02,0.1,0.5g/L)的DMEM培养液。主要观察指标:①原代及传代兔关节软骨细胞的形态学观察。②应用流式细胞术及免疫细胞化学法检测软骨细胞增殖及其合成Ⅱ型胶原能力。③透射电子显微镜观察软骨细胞超微结构的变化。结果:实验组软骨细胞贴壁、增殖较对照组缓慢。各实验组Ⅱ型胶原平均灰度值均显著高于对照组(P<0.05)。实验组软骨细胞进入S期、G2+M期的细胞比率较对照组软骨细胞减少、进入G0/G1期的细胞比率增加。电镜下见软骨细胞线粒体、粗面内质网数量减少。结论:地塞米松磷酸钠抑制软骨细胞的增殖,可能与抑制关节软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白的合成能力有关。

摘要：背景:阿仑膦酸钠是近来所采用的一种试图通过抑制破骨细胞来治疗骨质疏松症的药物,其效果与单纯补钙有何差异,尚待进一步观察。目的:观察口服阿仑膦酸钠片对中老年骨质疏松症症状及骨密度的影响,并与葡萄糖酸钙口服液的干预效果比较。设计:随机分组,采用自身对照及同期实验对照。单位:北京大学深圳医院骨科。对象:病例来源于1999-07/2001-07在北京大学深圳医院骨科门诊就诊的中老年骨质疏松症患者68例,选择年龄45岁以上,并排除继发性骨质疏松症患者,有62例患者纳入本次实验,用随机数字法随机分为治疗组(口服阿仑膦酸钠片)32例和对照组(口服葡萄糖酸钙口服液)30例。干预:在综合治疗的基础上,治疗组每天给予阿仑膦酸钠片10mg,对照组给予葡萄糖酸钙口服液,2支/次(每支约含葡萄糖酸钙100mg,相当于钙9mg),3次/d,两组疗程均为3个月。根据躯体疼痛改善情况、有无新的骨折发生及骨密度改善情况,分3级进行判定。主要观察指标:①两组治疗前后骨密度值比较。②两组疗效比较。③两组不良反应和副作用比较。结果:治疗组30例和对照组26例的观察结果纳入分析。①两组治疗前后骨密度值比较:治疗组用药3个月,患者的骨密度明显上升,治疗前后比较,差异有显著性意义[(0.667±0.083)和(0.716±0.082)g/cm2;t=2.473,P0.05];两组治疗后比较,差异有显著性意义(t=2.384,P<0.01)。②两组疗效比较:治疗组有效率高于对照组,差异有显著性意义(χ2=14.9,P=0.005)。③两组不良反应和副作用比较:治疗组服药期间有7例患者轻度腹部不适,对照组无任何不良反应。结论:阿仑膦酸钠片不仅能抑制骨的吸收,还能促进骨质恢复,增加骨量,可协助治疗中老年骨质疏松症,其疗效较单纯的葡萄糖酸钙口服液好。

摘要：背景：人工椎间盘置换在临床的应用已经取得了良好效果,但其假体的设计、磨损碎屑、骨质疏松症、翻修策略、病例选择等诸多因素均很大程度上影响手术的疗效。目的：综述了人工椎间盘置换解决方案所面对的问题、未来一代人工椎间盘置换的需求、以及陶瓷技术公司的未来脊柱方案等问题。方法：以＂Total Disc Replacement,vertebra,ceramics＂为英文检索词,检索1990/2008PubMed数据库和国际科学引文数据库文献。纳入与人工椎间盘置换术及陶瓷人工关节相关文献。排除重复性研究。重点对27篇文献进行了分析和讨论。结果与结论：现在看起来人工椎间盘置换磨损要比髋关节和膝关节成形术的磨损要低。然而,人们所担忧的是磨损碎屑和任何继发的炎症反应可能发生在非常接近于神经结构的部位。有关人工椎间盘置换中全身金属离子释放的量还存有争议。MRI扫描会因存在有金属合金而出现人工伪影,至今还没有由制造商提供的有关进行MRI检查时植入物可能发热或移动的体外试验数据。复合材料Biolox~ delta是超级的陶瓷材料,具有良好的生物相容性、耐磨性能和抵抗骨折特性,可以确保人工椎间盘置换在患者有生之年术后随访中表现出优越的放射学和MRI影像,可面对未来人工椎间盘置换解决方案需求的挑战。

摘要：目的 构建大鼠Wnt5a基因慢病毒并感染RSC96雪旺细胞,观察慢病毒感染情况及Wnt5a表达情况。方法 设计大鼠Wnt5a基因特异性RNAi序列,构建并包装成可感染细胞的慢病毒,感染RSC96雪旺细胞后通过Celigo观察细胞中荧光表达,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测细胞中Wnt5am RNA的表达情况。结果 构建的Wnt5a基因慢病毒在感染RSC96雪旺细胞后可表达绿色荧光,细胞中Wnt5am RNA的平均表达量为0.206±0.056。结论 Wnt5a基因慢病毒构建成功,可为研究Wnt5a调控的周围神经损伤修复时雪旺细胞功能的相关研究提供便利。

摘要：目的应用自行设计制作的细硅胶管从兔股部动静脉桥接下腹部完全游离的皮瓣原位再植,观察皮瓣是否存活、存活情况及最长存活时间,血管蒂(细硅胶管)通畅情况,再植皮瓣内血管分布情况和细硅胶管直径最小限度和长度最大限度,尝试为修复糖尿病足溃疡创面探索一种新的治疗手段,为临床应用提供实验依据。方法选用健康家兔10只,用制备抗凝细硅胶管桥接兔右下腹部长宽4.0cm×3.0cm游离皮瓣,至髂外动静脉,术毕将皮瓣原位缝合。观察项目包括皮瓣肉眼观察术后12h、1d、3d、7d、3周皮瓣色泽、肿胀程度、有无水泡、瘀斑以及血管充盈程度等,并对全部皮瓣进行解剖,观察皮瓣血管蒂通畅情况观察。结果 10块兔右下腹壁游离皮瓣中有2块最终部分成活,8块最终完全失活。结论用细硅胶管桥接游离皮瓣移植皮瓣有可能存活,为提高皮瓣存活率必须提高桥接导管的抗凝性。

摘要：目的：比较股骨近端髓内钉（PFN）与动力髋螺钉（DHS）在治疗股骨转子间骨折的疗效。方法：从2000年10月-2004年2月收治股骨转子间骨折患者96例。PFN组：50例，DHS组：46例。从手术时间、平均失血量、内置物理想位置、术后引流量、行走能力作对比研究。结果：PFN组在上述各方面均优于DHS组，具有明显统计学意义（P〈0．01）。结论：PFN具有创伤小、设计合理、允许病人早期活动。是理想的股骨转子间骨折内固定物之一。

摘要：背景:沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)基因是一个与衰老关系密切的基因,可以通过调节PI3K/AKT、NF-κB等信号通路影响到组织及机体的衰老过程,并参与骨科相关疾病的发生发展。建立慢病毒介导的SIRT1基因表达降低的ATDC5细胞模型,可以为研究SIRT1基因相关的骨科系统疾病如骨关节炎、骨质疏松症等提供实验基础。目的:构建携带小鼠SIRT1基因的RNAi慢病毒载体,将其转染ATDC5细胞系,建立SIRT1基因表达降低的ATDC5细胞模型。方法:根据RNAi序列设计原则设计并合成SIRT1基因的RNAi靶点序列,连接GV248(框架结构:h U6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin)载体,转化后经阳性克隆测序及PCR鉴定,质粒抽提后导入293T细胞,包装慢病毒,取上清检测滴度。将含有小鼠SIRT1基因RNAi的病毒颗粒转染ATDC5细胞系,并于荧光显微镜下进行观察,行RT-PCR检测ATDC5细胞中SIRT1 m RNA的表达情况。结果:经测序、PCR检测可知,SIRT1基因的RNAi靶点序列与GV248载体连接成功,并包装成高滴度的慢病毒。携带小鼠SIRT1基因的RNAi慢病毒感染ATDC5细胞后,荧光显微镜下观察显示感染率较高,RT-PCR检测发现,携带SIRT1基因的慢病毒感染组SIRT1基因m RNA的相对表达量为0.386±0.117,与阴性对照病毒感染组相比有统计学差异(P<0.05),敲减效率为61.4%。结论:成功建立SIRT1基因表达降低的ATDC5细胞模型,为研究SIRT1基因相关骨科系统疾病提供实验基础。

摘要：目的通过记录分析医院急诊患者情况,探讨深圳市道路交通伤中四肢损伤的伤情特点。方法设计调查问卷,对2007年1月～2007年12月深圳市6个行政区的6家综合性医院的急诊外科四肢道路交通伤患者进行记录,并对相关数据进行分析;伤后4个月通过电话方式对患者创伤康复分级、工作恢复情况进行随访,了解患者伤后恢复情况。结果道路交通伤所致的四肢损伤532例,年龄2～80岁,其中男性平均(34.56±6.5)岁,女性平均(30.44±4.31)岁,两者比较有统计学意义(P<0.05)。20～40岁为伤害发生最高发年龄段;受伤人群主要为农民工和工人(37.60%);肇事车辆主要为小型汽车(41.6%);伤害发生时间在周四(28.76%)、周五(27.82%)最多,周五存在集中趋势(r=0.1660,P<0.001);下肢为主要损伤部位,占四肢伤的64.23%。在随访病例中,80.47%恢复工作,14.42%需调换工作,5.12%不能工作。结论下肢是四肢交通伤中最易发生的部位,青壮年是主要受害者;加强交通安全教育,提高国民素质及交通安全意识是减少四肢交通伤害发生的有效手段。

摘要：背景磷酸三钙陶瓷人工骨的主要成分与骨基质中的无机成分相似,可作为填充材料为新骨形成提供支架,发挥骨传导作用。但单纯使用磷酸三钙不具有骨诱导能力,因此提高人工骨的骨诱导能力成为了人们研究的重点。目的观察鼠成骨细胞在体外与磷酸三钙陶瓷和钙离子混合培养时的生长情况,研究磷酸三钙和钙离子对成骨细胞的影响。设计完全随机对照的实验研究。地点和对象实验地点在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成,研究对象为新生大鼠颅骨成骨细胞。干预用酶消化法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,通过扫描电镜对生长于磷酸三钙陶瓷材料上的成骨细胞进行观察,利用[3H]-TdR掺入法检测磷酸三钙对成骨细胞的影响。用体外不同浓度的钙离子(2.5～10mmol/L)作用于成骨细胞,通过增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)免疫组化分析测定钙离子对成骨细胞增殖的影响。主要观察指标观察实验组和对照组中成骨细胞的生长情况。结果成骨细胞不仅很好地贴附于陶瓷表面,而且细胞的增殖活性未受到抑制。钙离子对体外培养的成骨细胞的增殖无负效影响。结论TCP陶瓷人工骨与成骨细胞有良好的生物相容性,对成骨细胞的生长有一定的促进作用。