摘要：目的建立快速鉴定皮肤活检组织中分枝杆菌的荧光实时PCR方法并进行验证。方法自行设计针对分枝杆菌属和14种常见分枝杆菌的引物探针,建立分枝杆菌的荧光实时PCR检测体系和方法。利用12株分枝杆菌标准菌株对该方法进行体外验证,并对2019年至2021年北京大学第一医院皮肤性病科收集的119例临床诊断皮肤分枝杆菌感染患者的组织样本进行检测。结果体外检测显示该方法对12种分枝杆菌标准株均有良好的检测敏感性和特异性。在119例临床诊断分枝杆菌皮肤感染患者活检标本中,培养阳性率仅为21.0%(25/119);荧光实时PCR检测分枝杆菌阳性率为76.5%(91/119),其中,44.5%(53/119)鉴定至菌种水平,以海分枝杆菌为主;31.9%(38/119)仅鉴定至分枝杆菌属水平。结论建立了可在患者皮肤组织样本中高效检测分枝杆菌的荧光实时PCR方法,但仍有漏诊可能,还需结合其他分子诊断方法提高敏感性和特异性。

摘要：目的探讨北京地区的临床变态反应性皮肤病患者常见过敏原流行特征,为临床诊疗及预防提供参考。方法本研究为回顾性研究,选择2017—2021年在北京大学第一医院进行过敏原检查患者中诊断为中重度特应性皮炎患者共2822例,以成人为主,>18岁占比83%(2340/2822)。采用ImmunoCAP荧光酶联免疫法对患者血清进行sIgE检测,按照年龄、性别、年度等统计各项过敏原阳性率,分析流行特征和变化趋势。结果共收集过敏原特异性IgE检测数据22503项次。2822例研究人群的过敏原阳性率40%(1122/2822),且以多重致敏为主,13~18岁人群过敏原阳性率和多重致敏率均最高。2822例研究人群以吸入过敏原为主,阳性率最高的是吸入混合(29.3%),单价吸入过敏原阳性率前五的分别是:粉尘螨(26.7%)、户尘螨(25.5%)、艾蒿(23.9%)、桦树花粉(19.2%)、苍耳(18.2%),单价食物过敏原阳性率前五的分别是:虾(15.2%)、花生(14.8%)、芝麻(14.7%)、小麦(13.2%)、牛奶(13.1%);不同年龄段过敏原阳性率分析显示,吸入性过敏原中除桦树花粉在3~12岁人群阳性率最高外,其他吸入过敏原阳性率均在13~18岁人群达到高峰;食物性过敏原中食物混合-1(常见)、牛奶、鸡蛋白、小麦在<3岁人群中阳性率最高,随年龄增长阳性率逐渐下降,其他食物过敏原阳性率均在13~18岁达高峰,虾蟹是成人阶段最主要的两种食物过敏原。2822例研究人群各项过敏原阳性率在男女之间差异不大,男性略高于女性。5年期间,过敏原阳性率总体呈上升趋势,吸入过敏原中猫毛发皮屑、狗毛发皮屑、粉尘螨、蟑螂变化幅度较大,食物过敏原阳性率变化趋势平稳。结论变态反应性皮肤病病因复杂,可能与接触过敏原、遗传、免疫、环境因素、皮肤屏障功能异常等方面有关,本研究多角度分析了北京地区变态反应性皮肤病人群过敏原流行特征,为疾病防治提供参考。

摘要：目的 评估本实验室设计的肺部常见病原真菌real-time PCR检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)标本对非中性粒细胞缺乏的老年人群肺部真菌病的诊断价值。方法 回顾性纳入2020年至2021年间于北京大学第一医院就诊的怀疑肺部感染的294名非中性粒细胞缺乏老年患者,采用real-time PCR检测其BALF标本中的病原真菌;根据宿主因素、临床表现和真菌学检查进行诊断分类,27名患者符合确诊或临床诊断的肺部侵袭真菌病,其中7例(25.6%)为多种真菌合并感染,6名患者诊断慢性肺曲霉病。结果 曲霉PCR Ct值受试者工作特征曲线下面积为0.936(95%置信区间0.865~1.000),最佳cut-off值为34.8,对肺曲霉病的诊断灵敏度和特异度分别为95.7%和92.1%。耶氏肺孢子菌PCR以Ct值37.1为cut-off值,诊断耶氏肺孢子菌肺炎灵敏度和特异度分别为94.7%和99.7%。隐球菌和毛霉PCR以Ct值35.0为cut-off值,在肺隐球菌病和肺毛霉病中阳性率分别为50%(2/4)和100%(1/1)。病原真菌real-time PCR确定cut-off值后,以PCR检出的真菌与肺部真菌病的致病真菌一致作为阳性,灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为86.5%(32/37)、91.0%(253/278)、56.1%(32/57)和98.1%(253/258),总符合率为90.5%(285/315)。结论本研究团队开发的病原真菌real-time PCR体系覆盖常见肺部致病真菌,初步探索了其在BALF标本中的cut-off值,证实该方法在非中性粒细胞缺乏老年患者的肺部真菌病中具有良好的诊断价值。