摘要：本文设计可活化细胞穿膜肽(activatable cell-penetrating peptide,ACPP),对合成的ACPP进行酶解研究。ACPP由3部分连接而成,寡聚阴离子序列肽-基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)的底物肽-寡聚阳离子序列肽。采用反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)监测37℃条件下IV型胶原酶(含MMP-2和MMP-9)对ACPP的酶解过程。收集酶解成分进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization orthogonal time of flight mass spectrometry,MALDIO-TOF-MS)检测,比对推测酶解碎片的序列。结果表明,ACPP可被IV型胶原酶裂解,释放出寡聚阳离子序列肽,即细胞穿膜肽(cell-penetrating peptide,CPP),ACPP裂解一半的时间约为4h。酶解发生于目标位点,但不排除ACPP裂解后肽段的再次断裂。

摘要：目的:研究重组乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)-乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA)微球的制备工艺、聚合物降解、微球释放及小鼠皮下单剂量注射后的体内免疫应答水平。方法:采用正交设计,复乳法制备疫苗微球,测定PLGA及微球的理化性质和微球的体内免疫应答水平。结果:聚乙烯醇(PVA)浓度是影响微球粒径的的显著因素(P<0.05);HBsAg释放主要靠微球中PLGA的溶蚀;将3种处方的微球混合单剂量免疫小鼠,抗体应答水平与现行的铝佐剂疫苗相当。结论:将不同释药行为的HBsAgPLGA微球混合作为单剂量控释给药疫苗,具有很好的潜在优势。