摘要：目的建立一种检测新型冠状病毒的巢式PCR方法,作为实时荧光PCR法检测新型冠状病毒的补充,并探讨该方法在临床样本检测中的初步应用价值。方法根据新型冠状病毒基因保守序列,利用在线软件设计N、S基因引物,构建巢式PCR反应体系,N基因巢式PCR及产物测序用于定性检测,S基因PCR产物测序用于型别初步鉴定。检测梯度稀释新型冠状病毒阳性样本评价检测灵敏度,检测流感病毒和人冠状病毒OC43、229E、HKU1、NL63等样本评价其特异性。分别检测Ct值>33与Ct值<33的各15份新型冠状病毒阳性样本,对扩增产物进行测序及比对分析,对检测方法进行验证。结果所建立的巢式PCR法可扩增出355 bp N基因片段及449 bp S基因片段的特异性条带,冠状病毒229E、OC43、HKU1、NL63、H3N2亚型流感病毒、甲型H1N1流感病毒、乙型流感病毒阳性样本无扩增条带。N基因片段最低检测限可达Ct值37.21。30份新冠核酸阳性样本中,巢式PCR检测的N基因阳性符合一致率达100%(30/30);S基因阳性符合一致率达60%(18/30)。28份样本N基因片段测序成功,BLAST与新型冠状病毒相似性100%。12份样本S基因片段可获得位点突变特征结果。结论建立了可特异检测新型冠状病毒的巢式PCR方法,并可通过对PCR扩增产物测序分析其位点突变特征,可作为实时荧光PCR法的补充。

摘要：目的了解北京市甲型H1N1流行性感冒（简称流感）轻症与重症患者流感病毒的全基因组特性。方法选取北京市甲型H1Nl流感检测网络实验室于2009年6—12月在北京市定点医院采集的流感病例咽拭子标本作为研究对象，共21份，包括重症病例标本10份（其中有4份标本来源于死亡病例），轻症病例标本11份。由咽拭子标本中提取病毒核酸，设计基因组全长扩增引物，病毒核酸逆转录后进行PCR，对PCR产物测序，通过序列分析软件，分析病毒各基因进化和氨基酸变异情况。结果2009年北京市流行的甲型川Nl流感病毒8个基因节段与疫苗株A／California／07／2009（HlNl）相比，核苷酸同源性高达99％以上，未发生较大变异，其中，血凝素蛋白（HA）、神经氨酸酶（NA）、核蛋白（NP）基因的遗传距离相对较长，分别为0．0050，0．0040，0．0040；HA基因的P83S、1321V，NA基因的N248D，多聚酶（PA）基因的P224S，NP基因的V100I、L122Q变异在所有样本中均发生。重症病例的HA、NA、M、朋、多聚酶（PB2）、非结构蛋白（NS）基因具有明显基因进化聚集性；HA基因的S128P和$203T、PA基因的R269K和D547E、PB2基因的T588I、NS基因的1123V变异主要发生在重症病例中，分别有6、9、6、7、9、6例；其中HA基因的S203T、PA基因的R269K及D547E变异与重症病例的相关性具有统计学意义（P〈0．05）。HA基因变异主要分布在ca与cb抗原决定簇上，NA基因上无耐药突变，膜蛋白（M2）基因均发生耐药性突变，其余毒力相关基因未见突变。结论2009年北京市甲型HlNl流感病毒与疫苗株A／California／07／2009（H1N1）同源性较高，发现与重症及死亡病例相关的突变位点，未发现毒力基因突变。

摘要：本研究设计的一种4重荧光定量RT-PCR检测方法,以A型流感病毒各亚型的血凝素基因(HA)为检测靶标,实现了同时检测新甲型H1N1流感病毒、人季节性H1N1流感病毒和人季节性H3N2流感病毒。本法使用人细胞RNA酶P基因作为内参,以判断标本来源和实施质量控制。利用不同来源和亚型的流感病毒验证了该方法的特异性;利用连续稀释的新甲型H1N1流感病毒HA全基因体外转录物进行灵敏度分析。结果表明该方法灵敏度高,可检测低至20个拷贝的RNA;特异性强,每对引物只检测出对应的病毒,无交叉反应;并且成功地验证性检验了34份新甲型H1N1流感病毒阳性临床标本和20份人季节性H1N1和H3N2流感病毒及人乙型(HB)流感病毒阳性临床标本。因此,该多重荧光定量RT-PCR法是一种可同时检测2009年新甲型流感病毒及季节性流感病毒的有效方法。

摘要：目的了解北京市城区老年人传染病相关知识、行为和技能方面的现况,为政府制定传染病防控策略提供科学依据。方法采用多阶段抽样法从东城、西城和海淀3个区抽取1 350名60岁及以上的常住居民作为调查对象,使用自行设计的北京市居民传染病健康素养调查问卷进行调查。结果 "发热判断标准"(34.4%)、"乙肝的传播途径"(23.3%)、"艾滋病的传播途径"(35.6%)等知识的知晓率均较低,"注射流感疫苗"(40.5%)、"到发热门诊带口罩"(20.9%)等行为的报告率均较低,"能获取想要的传染病知识"(42.8%)、"能看懂简单的化验单"(51.8%)、"能看懂药品说明书"(58.0%)等技能的掌握率均较低。不同文化程度老年人的传染病知识知晓率、部分传染病相关行为报告率和技能掌握率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论北京市城区老年人传染病相关知识知晓率、行为报告率和技能掌握率均较低,应加强老年人传染病相关知识的宣传教育,促使其形成良好的卫生习惯,并提高其传染病防控技能。

摘要：目的了解北京市郊区成年居民传染病相关知识的知晓率、行为具有率和技能掌握率,为开展郊区传染病相关健康教育提供科学依据。方法采用多阶段系统抽样方法抽取北京市效区5 307名18～59岁成年人作为调查对象,使用自行设计的问卷对其传染病相关的知识水平、行为习惯和技能掌握现状进行调查。结果 "预防流感最有效措施"、"甲肝传播途径"、"乙肝传播途径"、"艾滋病传播途径"和"发热判断标准"的知识知晓率较低,分别为51.4%(2 684/5 221)、43.5%(2 294/5 276)、22.8%(1 212/5 307)、37.7%(1 999/5 307)和34.0%(1 802/5 299);"陪流感样病例去医院戴口罩"、"注射流感疫苗"、"就餐注意餐馆卫生"和"不共用毛巾"的行为具有率较低,分别为22.0%(1 165/5 304)、11.9%(631/5 281)、53.8%(2 848/5 291)和58.2%(3 085/5 297);"能快速获得传染病知识"和"能看懂简单的化验单"的技能掌握率较低,分别为55.5%(2 940/5 297)和36.9%(1 957/5 301)。结论北京市郊区成年居民传染病知识知晓率、行为具有率和技能掌握率仍较低,学历较低应作用健康教育的重点人群。

摘要：目的了解北京市成年人传染病相关知识的知晓率和获取途径,为开展传染病相关健康教育提供科学依据。方法采用多阶段分层系统抽样,选取13 287名在北京连续居住超过半年以上、年满18周岁的成年人作为调查对象。使用自行设计调查问卷对其传染病相关的知识水平及获取途径进行调查。结果 "预防流感最有效措施"、"甲型肝炎传播途径"、"乙型肝炎传播途径"、"艾滋病传播途径"、"被狗咬伤后处理方法"和"发热判断标准"知识的知晓率均低于50%;随着文化程度的增加,大部分知识的知晓率呈现上升趋势;北京市成人获取传染病的途径主要为"电视"、"报纸或杂志"、"社区宣传"和"网络"等,且超过50%居民具有2条以上获取途径。结论北京市成年人传染病相关知识的知晓率仍较低,尤其是文化程度较低组,但获取途径较为多元化,应根据不同人群充分发挥各种途径的作用,以进一步提高居民传染病防控能力。

摘要：目的了解新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)疫苗上市前的疫苗犹豫发生情况及相关影响因素,为在疫苗上市早期采取针对性的干预措施提供科学依据。方法自行设计调查问卷并通过网络发放,比较疫苗犹豫者和接受者在社会人口学信息、对新冠肺炎的认知情况、对疫苗的一般性认知情况,以及信心、自满和便利性等维度的差异。采用单因素和多因素logistic回归方法分析新冠肺炎疫苗犹豫的相关影响因素。结果在收到的406份有效答卷中,疫苗完全接受者171人(42.1%)、犹豫者211人(52.0%)、完全拒绝者24人(5.9%)。多因素logistic回归分析发现,降低疫苗犹豫的因素包括调查对象的健康状况(慢性病vs.健康,OR=4.415,95%CI:1.176~16.574)、接种时间便利(OR=2.262,95%CI:1.625~3.147)、对疫苗安全性的信任(OR=2.188,95%CI:1.493~3.206)、医务工作者自身接种行为(OR=1.775,95%CI:1.174~2.682)、医务工作者对于疫苗的中立态度(OR=1.635,95%CI:1.139~2.349)、广告宣传(OR=1.613,95%CI:1.102~2.361)、接种后出行便利(OR=1.400,95%CI:1.034~1.897),增强疫苗犹豫的因素为自觉低感染风险(OR=0.630,95%CI:0.477~0.832)。结论加强对健康人群的疫苗宣传力度、增加接种点的服务时间、强调疫苗的安全性、提高医务工作者的接种率、通过多种媒体进行宣传、适当推出接种后的出行便利政策、以及强调目前存在的感染风险等,是降低新冠肺炎疫苗犹豫可能的干预措施。

摘要：目的了解北京市成人流感样症状现状及其影响因素,为预防控制流感样症状提供科学依据。方法采用多阶段分层抽样,抽取北京市6个区县13 008名年满18周岁居民作为调查对象,使用自行设计的问卷进行调查,内容包括:一般人口学特征、过去1年是否出现流感样症状和日常行为习惯等。结果 13 008名调查对象过去1年中流感样症状报告率为46.67%。多因素非条件Logistic逐步回归分析结果显示,坚持锻炼身体、洗手方式正确、到医院戴口罩和共用毛巾洗脸是流感样症状发生的影响因素,OR(95%CI)分别为0.857(0.788～0.932)、0.871(0.804～0.944)、0.853(0.777～0.936)和1.524(1.403～1.655)。结论北京市成人流感样症状报告率较高,已成为影响居民健康的公共卫生问题,坚持锻炼身体、洗手方式正确、到医院戴口罩等良好行为习惯是流感样症状发生的保护因素,共用毛巾洗脸是其危险因素。

摘要：采用多阶段分层抽样和自行设计的问卷对北京市6个城区12 890名18岁以上居民调查,旨在了解成年居民结膜炎症状发生现况及相关知识行为因素.北京市居民2011年结膜炎症状报告率为1.60％,不同城区、年龄、文化、性别和民族的居民组间报告率差异无统计学意义（P＞0.05）.健康状况差、外出回家后不洗手、与他人共用毛巾是居民患结膜炎的危险因素.相关部门应采取健康教育、行为干预等综合措施促进居民形成健康的行为模式,降低结膜炎的发生.

摘要：目的建立新型发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒的TaqMan探针实时荧光RT—PCR检测方法并进行评估，为发热伴血小板减少综合征监测中新型布尼亚病毒感染的排查提供实验室检测依据。方法利用新型布尼亚病毒S片段基因的特异性序列设计引物和探针，探针5’端标记FAM，3’端标记TAMRA，优化反应体系与反应条件，并对不同浓度含有目的基因的质粒以及在发热伴血小板减少综合征监测中收集的32份样本和流行性出血热病毒阳性样本进行核酸检测，验证该方法的特异性、敏感性和重复性。结果该方法所检测的32份可疑病例的临床样本中，3份为阳性，与国家疾病预防控制中心下发的试剂以及商品化试剂盒的检测结果一致；流行性出血热病毒检测结果为阴性。对目的基因的检测灵敏度达4×102拷贝／ml；重复性实验中，变异系数为0．125％-0．28％。全部检测过程从样本的核酸提取至检测完成仅需2．5h左右。结论本文建立的TaqMan探针实时荧光***法是一种检测新型发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒的特异、快速、敏感的方法。该方法的建立将有益于今后开展发热伴血小板减少综合征监测以及应急临床样本中新型布尼亚病毒感染的排查和快速检测。