摘要：多色流式细胞术是一种高效、精准、快速的细胞学检测技术,已广泛应用于传染病检测和研究中。在传染病研究生教学中,本团队建立多色流式课程体系并通过教学实践过程总结教学经验。文章阐述了传染病研究生教学中开设多色流式细胞术课程的几个方面,并进行了总结,包括确定课程目标、设计课程结构、确定课程内容、确定课程形式和确定课程大纲五个方面。笔者进一步通过重点推动多色流式细胞术实践课程并总结实践的初步经验,包括明确多色流式细胞术可以检测的样本类型、多色流式细胞术的仪器类型、染色策略和实验方案、加强流式数据分析和结果判读能力、多色流式细胞术实践过程中应强化生物安全操作五个要点。该课程的开展有助于传染病研究生对免疫学和传染病发病机制的理解,为其未来从事传染病防治和免疫学研究的教学工作提供坚实的基础。

摘要：在非人灵长类动物和人源化小鼠模型的实验研究中已经证明,人类免疫缺陷病毒(HIV)的广谱中和抗体(bNAbs)具有保护作用。近期bNAbs 3BNC117和VRC01的临床Ⅰ期试验证实,两种中和抗体均可降低未接受抗病毒治疗的HIV感染者的病毒载量。然而,bNAbs目前尚难以通过疫苗诱导产生。在泰国RV144疫苗试验中,疫苗对受试人群的总体保护率为31%,血液样本中未检出bNAbs,表明抗体的其他免疫效应功能在抑制病毒感染和复制的过程中发挥了重要作用。越来越多的研究表明,通过抗体Fcγ受体(FcγR)介导的非中和抑制作用在保护黏膜组织免受HIV感染的过程中可能发挥重要作用。在HIV通过黏膜组织传播的早期,树突状细胞和巨噬细胞表面表达的Fc受体可能起着决定性的作用,已有研究证实它们是HIV通过黏膜组织最初感染的靶细胞。因此,在新的疫苗设计策略中,除了诱导bNAbs产生,具有其他免疫效应功能的非中和抑制性抗体也应纳入疫苗接种评价体系中。

摘要：目的观察人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)慢性感染者外周血中CD8+干细胞样记忆型T细胞(CD8+stem memory T cells,CD8+TSCM)随治疗的动态变化,分析其与疾病进展的关系。方法观察25例经抗反转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)的慢性HIV-1感染者(治疗方案为替诺福韦+依非韦伦+拉米夫定)以及36例健康对照者,对样本外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)分别用CD3-APCCy7、CD4-FITC、CD8-Per CPCy5、CD45RAPECy7、CCR7-APC、CD27-PE、CD95-Pacific Blue抗体和CD38-PE、HLA DR-APC抗体进行细胞表面染色并通过流式细胞仪检测CD8+TSCM细胞比例。比较HIV-1慢性感染者和健康者CD8+TSCM细胞比例的差异,并分析其与疾病进展指标(CD4+T细胞计数、HIV病毒载量以及免疫活化指标)的关系。结果 HIV-1慢性感染组的CD8+TSCM细胞比例小于健康对照组;CD8+TSCM细胞比例与CD4+T细胞计数呈正相关,与HIV-1病毒载量以及免疫活化指标CD38+HLA-DR+CD8+T细胞呈负相关;随着ART治疗,CD8+TSCM细胞比例在144周后升至健康对照水平。结论 CD8+TSCM在慢性HIV-1感染中发挥一定的保护作用,HIV-1相关特异性CD8+TSCM细胞可能是未来T细胞疫苗设计的靶点。

摘要：目的随着整合酶抑制剂的使用,整合酶抑制剂耐药突变出现不可避免,为了更好地预防和控制艾滋病,根据中国1型艾滋病病毒(HIV-1)主要流行株建立HIV-1整合酶基因型耐药检测方法。方法根据国内HIV主要流行株(CRF01_AE、B、CRF07_BC、CRF08_BC、C)参考序列,用Oligo软件在整合酶保守区设计引物。挑选160例不同病毒亚型、病毒载量> 1 000拷贝/mL的样本,进行巢式荧光定量聚合酶链反应核酸扩增和测序。拼接后的序列输入斯坦福大学耐药网站,进行耐药突变位点分析。结果成功扩增出HIV-1整合酶全长(288个氨基酸),160个样品157个扩增成功(成功率为98.1%)。3名操作人员对15个样本进行扩增和测序,核苷酸序列一致性为(99.83±0.05)%。结论根据中国HIV-1主要流行株建立了整合酶耐药基因型检测方法,有助于优化艾滋病病人抗病毒治疗,有助于HIV-1的防控。

摘要：对于医学科研工作者,特别是即将成为医学工作者的医学研究生来说,发表研究成果在职业发展及完成研究生学业中占据重要地位。撰写医学科技论文是一门艺术,在医学教育过程中系统讲解的较少。目前,普遍流行的英文科技论文写作模式是IMRAD模式(Introduction, Materials and Methods, Results,and Disscussion,即引言、材料与方法、结果和讨论4部分),本文将参照IMRAD模式对科技论文的写作过程和各部分写作方法及注意事项进行阐述,从而为写好一篇英文医学科技论文提供指导意见,为医学研究生开设医学论文的英文写作与翻泽的相关课程提供依据,使学生不仅学会解决写作中的词汇、语法等问题,还掌握了医学类学术论文语篇结构和功能语言特征,不仅提升其医学科技论文的英文写作能力,而且能训练其严谨的学术逻辑思维,为将来的学术研究和职业需求奠定基础。

摘要：目的建立HIV-1DNA的实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测方法。方法根据HIV-1NL4-3LTR基因及人CCR5基因序列设计引物,构建质粒标准品,建立绝对定量检测方法,对检测方法的重复性和特异性进行评价。用该方法对20例HIV-1感染者HIV-1DNA进行定量检测。结果构建了HIV-1DNA绝对定量的标准品质粒,标准曲线的相关系数在0.99以上,重复性试验中变异系数小于3%,检测下限为1×103拷贝/μl。20例HIV-1感染者样品中,14例样品检测到HIV-1DNA,检出率为70%。结论 HIV-1DNA real-time PCR检测方法具有快速、特异性强和稳定性好等优点,为进一步研究HIV-1DNA与疾病进程的关系和评价抗病毒疗效等方面奠定了基础。