摘要：目的探讨用低变性温度共扩增PCR（COLD-PCR）方法提高BCR—ABL1融合基因激酶区耐药突变检测灵敏度的可行性。方法本研究为实验诊断研究。设计常规巢式PCR（CN—PCR）和COLD—PCR方案扩增BCR—ABL1激酶区全长，扩增产物纯化后用Sanger测序法检测激酶区突变（KDM）。采集32例经伊马替尼（IM）治疗并出现耐药的慢性粒细胞性白血病（CML）患者和20例初诊CML患者外周血或骨髓标本，用上述2种方案检测标本中的KDM。用PCR扩增和基因克隆方法鉴定患者标本中KDM所占比例。制备含不同KDM比例的标准品，对比分析2种方法的检测灵敏度。结果32例IM耐药患者中，共检出15种KDM。其中用CN—PCR方法检出23例（71．9％）KDM阳性，用COLD—PCR检出28例（87．5％）KDM阳性。在20例初诊CML患者中，用CN—PCR未检出KDM，用COLD—PCR方法检出1例有P．E459K突变，突变型基因比例为3．5％。对于16种不同类型的KDM，COLD—PCR方法可提高检测灵敏度4～12倍。结论用COLD—PCR方法可有效提高BCR—ABL1激酶区耐药突变的检测灵敏度，有助于早期发现耐药突变。（中华检验医学杂志，2013，36：246-251）