摘要：类器官指通过干细胞自组织在体外三维(3D)培养条件下分化形成的功能性细胞组织复合体,能够反映人体来源组织或器官的部分关键结构和功能特征,是一种极具前景的体外模型体系.目前,多数类器官的形成和培养都依赖复杂的动物来源细胞外基质(如Matrigel),该类基质的肿瘤源性和批次差异性影响了类器官培养的重现性,难以满足生物医学研究的需求.相比之下,各种天然和合成基水凝胶成分明确,具有高度可调的物理和化学特性,已广泛用于各种细胞的3D培养.本文概述了类器官的形成与培养现状,重点介绍了各种已用于类器官研究的水凝胶材料及其设计与工程化策略,讨论了功能化水凝胶材料在类器官基础研究和转化应用方面的潜力,并对其未来的发展趋势与面临挑战进行了展望.

摘要：哺乳动物染色体工程是指通过多种实验手段对哺乳动物的染色体进行编辑,从而可以构建疾病动物模型、制备人源化药物工厂、解析物种进化机制甚至于合成全新生命。近些年,天然染色体改造技术、染色体设计与合成技术及染色体大片段转移技术等哺乳动物染色体工程的核心技术迅速发展,并相互交叉融合。同时,胚胎干细胞被发展为一种新型的哺乳动物合成生物学的底盘细胞,极大地推动了哺乳动物染色体工程的发展,催生了一大批用于医药和进化研究的动物模型,包括模拟唐氏综合征的小鼠模型、产生人类单克隆抗体的工具小鼠以及用于研究染色体重组生物学效应的染色体连接小鼠等,也极大推动了基础研究和生物医药领域的发展。但是,因为缺乏对哺乳动物染色体和发育的全面认知,所以对哺乳动物染色体的操纵仍面临诸多挑战,不仅包括技术手段,也包括生物伦理及安全性等。本文将对以上三种哺乳动物染色体工程主要的技术方法及其在多方面的应用进展进行简要综述,同时对哺乳动物染色体工程的进一步应用与挑战进行展望。

摘要：当前,我国涉及人体生物样本的知情同意退出制度实施困难,其本质原因在于立法者始终坚持传统医疗或临床试验背景下的自主、隐私等价值的绝对保护,而忽视了现代生物技术使用离体人体生物样本的场景,导致知情同意退出制度仅机械借鉴舶来规则,最终造成生物医药领域实践无法根据具体应用场景构建知情同意退出模式而处于潜在违法状态。为促进人体生物样本安全有效利用,推动生物产业发展与繁荣,需为我国人体生物样本知情同意退出制度合理化找到正确路径。本文重新回顾知情同意退出制度价值产生之初与发展之中的立法博弈,回溯其中保护自主、隐私的价值内涵,厘清本土立法出现制度设计与实践脱节的根源,并提出符合国情的知情同意退出制度本土策略。

摘要：线粒体置换技术(Mitochondrial Replacement Techniques,MRT)旨在帮助因携带缺陷线粒体DNA(mitochondria DNA,mtDNA)而患严重线粒体疾病的女性生育具有自身遗传物质和血缘关系的健康子代。然而,该技术尚处于基础研究向临床转化的初期,不仅存在科学、安全争议,而且伴随一系列伦理及社会担忧。各国正积极推进该领域的立法、修法及政策制定工作。基于科技发展、伦理文化、政治立场等要素,各国政策对MRT相关问题有着不同的态度与规制举措,这同样给MRT健康发展带来重大挑战。MRT规制制度的构建,需基于科技进展并依据我国国情、患者需求、风险考量和既有辅助生殖技术规制框架综合设计,以推进MRT负责任的应用,进而增进人民福祉。

摘要：目的研究细胞色素P450(Cyt P450)基因修饰的脐带间充质干细胞(UC-MSCs)联合环磷酰胺(CPA)对急性B淋巴细胞白血病的治疗作用。方法通过基因工程方法设计Cyt P4502B6(CYP2B6)基因序列,采用慢病毒载体基因转染UC-MSCs,得到可高表达CYP2B6蛋白的CYP2B6-MSC种子细胞。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CYP2B6基因的表达评估转染效果;采用流式细胞术检测CYP2B6细胞表面标志物表达;采用体外诱导分化检测CYP2B6细胞分化能力。将CYP2B6-MSC与Nalm-6共培养,CCK8法和Annexin-V FITC/PI试剂盒检测UC-MSCs/CYP2B6-MSC联合CPA对Nalm-6细胞的增殖和凋亡的影响。结果qRT-PCR检测结果显示,CYP2B6-MSC可高表达CYP2B6蛋白,而hUC-MSC(对照组细胞)不表达CYP2B6蛋白;流式细胞术及诱导分化检测发现,CYP2B6基因修饰后的MSC流式表型及分化能力均未有显著变化;肿瘤杀伤实验发现,CYP2B6-MSC与Nalm-6细胞共培养,同时加入CPA后,与UC-MSC及未加CPA组比较,CYP2B6-MSC+CPA对Nalm-6细胞具有显著的增殖抑制及促凋亡作用(P<0.01)。结论CYP2B6基因修饰后的MSC联合CPA对Nalm-6具有显著的生长抑制和促凋亡作用。

摘要：目的构建沉默信息调节因子(silent information regulaor,Sir)样蛋白1(Sirtuin 1,SIRT1)的特异性短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体,获得敲低SIRT1的肝癌细胞系,以探讨其对肝癌细胞的增殖和耐药敏感性的作用。方法设计针对SIRT1靶点特异性的干涉序列,连接到经HpaⅠ和XhoⅠ双酶切的pSicoR-GFP载体,慢病毒包装293T产生病毒,感染肝癌细胞,建立肝癌细胞SIRT1低表达的稳定株。利用实时定量PCR检测SIRT1的干涉效果;通过平板克隆形成实验、CCK8细胞增殖实验检测SIRT1被干涉后对肝癌细胞增殖能力的影响;通过细胞耐药敏感性实验及实时定量PCR检测耐药基因的表达,考察SIRT1干涉对肝癌细胞耐药敏感性的影响。结果实时定量PCR实验证明该慢病毒干涉载体能显著抑制肝癌细胞中SIRT1的表达,SIRT1干涉可抑制肝癌细胞的增殖能力,下调耐药基因的表达,增强肝癌细胞的药物敏感性。结论 SIRT1抑制肝癌细胞耐药性。