摘要：本文采用正交设计实验,对影响贯叶连翘总黄酮提取工艺的因素进行了系统考察。结果发现,以总黄酮得率作为考察指标,影响贯叶连翘总黄酮提取的主次因素为:溶媒种类>提取时间>提取次数>溶剂用量,其中溶媒种类、提取时间、提取次数均对总黄酮的提取有显著性影响;贯叶连翘中总黄酮的最佳提取工艺条件为:用10倍量80%乙醇提取3次,每次1h。建立了以UV法测定贯叶连翘中总黄酮的含量方法。

摘要：目的:探讨Cereblon(CRBN)对沙利度胺抑制人肺癌A549细胞及人肝癌HepG2细胞分泌VEGF/bFGF的影响。方法:采用慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰技术建立稳定敲低CRBN的A549细胞系(A549_(CRBN))及HepG2细胞系(HepG2_(CRBN))并通过实时定量PCR(Real-time PCR)和蛋白质印记(Western blot)实验验证。将A549细胞分为阴性对照组(A549_(luciferase))、CRBN低表达组(A549_(CRBN));HepG2细胞分为阴性对照组(HepG2_(luciferase))、CRBN低表达组(HepG2_(CRBN)),以上细胞按照3×10^(5)cells/well接种到6孔板中,放入37℃,5%CO_(2)的培养箱中培养24 h,分别加入1 ml含100μmol/L沙利度胺(thalidomide组)和1 ml 1‰DMSO(control组)的培养液,继续培养24 h再行后续实验,每组设计3个复孔。MTS法检测沙利度胺对细胞增殖的影响;Real-time PCR检测VEGF、bFGF、c-jun mRNA表达,ELISA法检测VEGF、bFGF蛋白表达。结果:与对照组比较,沙利度胺在浓度为1、10、50、100μmol/L时对A549及HepG2细胞的增殖能力无显著影响(P>0.05)。与A549_(CRBN)或HepG2_(CRBN)组比较,A549_(luciferase)及HepG2_(luciferase)组分泌的VEGF及bFGF均显著降低(P<0.05)。与A549_(luciferase)或HepG2_(luciferase)细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制A549_(luciferase)和HepG2_(luciferase)细胞的VEGF和bFGF的表达(P<0.05),而对A549_(CRBN)和HepG2_(CRBN)细胞中VEGF和bFGF的表达无显著抑制作用;与HepG2_(luciferase)细胞的对照组比较,沙利度胺可抑制HepG2_(luciferase)细胞的c-Jun表达(P<0.01),而对HepG2_(CRBN)细胞的c-Jun表达无显著抑制作用。结论:沙利度胺对A549和HepG2细胞VEGF和bFGF表达的抑制作用可能是通过CRBN介导的,而c-Jun可能是抑制作用的关键转录因子之一。

摘要：目的:设计合成苯并噻二嗪类新衍生物,研究其激活心肌线粒体ATP敏感性钾通道的药理学活性并与二氮嗪进行对比分析。方法:采用氧电极法评价新衍生物对心肌线粒体态3呼吸(R3)、态4呼吸(R4)以及呼吸控制率(RCR)等呼吸功能参数的影响。戊巴比妥钠麻醉Wistar大鼠,颈总动脉插管,连接八导生理记录仪记录二氮嗪及新衍生物对大鼠血压的影响。结果:100μmol/L衍生物16和17可同时降低心肌线粒体琥珀酸氧化呼吸链中的R3和R4,但不影响RCR,作用与二氮嗪类似;衍生物15在降低心肌线粒体R3和R4的同时可显著提高线粒体RCR。静脉注射10 mg/kg二氮嗪具有迅速的降压作用,与对照组对比,在3 min时血压下降约为28%,而20种衍生物均无降压作用。结论:衍生物15可激活心肌线粒体ATP敏感性钾通道,提高线粒体RCR,且无降压作用,其心血管选择性优于二氮嗪。