摘要：采用正交试验设计优化了解淀粉芽孢杆菌GSBa-1发酵产凝乳酶的工艺条件:发酵温度35℃,装液量40%,摇床转速180 r/min,发酵时间84 h。在此优化条件下,获得的凝乳酶凝乳活力为558.14 Su/m L。进一步研究了该酶的酶学性质,凝乳酶最适反应温度为55℃,酶活力在25~45℃比较稳定,60℃保持50 min完全失活。在p H5.5时凝乳酶活力最高,在pH 5.5~7.0范围内,随着pH增大,凝乳酶活力逐渐下降,p H 6.5时,凝乳酶活力稳定性最高。Ca^(2+)、Mg^(2+)、Fe^(2+)、Zn^(2+)以及Al^(3+)均对凝乳酶的凝乳活力有促进作用,其中Ca^(2+)对凝乳活力的促进作用最为显著,且Ca^(2+)浓度为0.020 mol/L时凝乳酶的凝乳活力达到最大值,而Na^+、K^+和Cu^(2+)对凝乳活力均有抑制作用;凝乳酶Km为2.35 g/L,Vmax=1.18 U/m L。

摘要：为进一步了解微生物凝乳酶的结构特性,根据GenBank数据库中甲醇芽孢杆菌凝乳酶(I3EB99)的氨基酸序列和大肠杆菌密码子的偏爱性,设计合成此凝乳酶的全基因序列,构建原核表达载体,通过BL21(DE3)表达其融合蛋白,将获得的融合蛋白进行His标签特异性亲和纯化,并利用生物信息学方法研究凝乳酶的三维空间立体结构。结果表明,重组表达的甲醇芽孢杆菌凝乳酶质量浓度为0.7 mg/mL,凝乳活力为(15870±1.17)SU/g,蛋白水解活力为(263.81±0.94)U/g,凝乳活力与蛋白水解活力比值为60.16,符合干酪生产加工的要求。结构特性研究表明,经重组表达后的甲醇芽孢杆菌凝乳酶呈现疏水特性,具有跨膜结构和信号肽,二级结构中α-螺旋少于β-折叠,在分离纯化过程中结构不稳定易降解,该凝乳酶与来自甲醇芽孢杆菌的一种未知蛋白酶是同源蛋白,高级结构与PDB蛋白数据库中的模板蛋白2ra1.1.A相似度最高。通过对甲醇芽孢杆菌凝乳酶结构特性的研究,为深入分析该凝乳酶作用机理及其功能性奠定了理论基础。

摘要：以土样中筛选的1株产胞外柚苷酶菌株米曲霉11250为出发菌株,采用紫外诱变、亚硝酸钠化学诱变及紫外-亚硝酸钠复合诱变3种方法进行诱变育种,通过透明圈初筛以及液体摇瓶发酵复筛,最终选育出1株胞外柚苷酶产酶活力较高的突变菌株UN2,该菌株产胞外柚苷酶活力达147U/mL,为原始菌株的2.3倍,经5代传代,其产酶能力稳定在(147±0.8)U/mL。采用单因素试验和响应面设计Box-Behnken design试验相结合的方法进行产柚苷酶的摇瓶发酵培养基配方优化,对影响菌株UN2发酵产酶的碳源、氮源、培养基初始pH、温度等条件做单因素试验和响应面法试验。结果表明:该菌株的最佳产酶条件:麦芽糖2.0 g/100 mL,牛肉蛋白胨3.0g/100 mL,初始pH 5.7,培养温度30℃。在此条件下,柚苷酶活力达到251 U/mL,是未优化前的1.7倍。结论 :通过培养基优化,大幅度提高了米曲霉11250液体发酵产柚苷酶的酶活力。

摘要：山药作为药食同源性植株,在我国食用历史悠久,种植十分广泛。山药中含维生素、氨基酸、蛋白质、矿物质、微量元素、皂苷、多糖、多酚类等营养及功能性成分,具有调节肠道菌群、增强机体免疫、防癌、抗氧化、降压降脂等多种保健功能。本文结合近几年的研究成果,归纳总结了山药中的多糖、多酚类、薯蓣皂苷及尿囊素等几种主要的功能性成分及生理活性的作用机制,并对其深入研究提出见解,以期为山药及其功能性成分的进一步开发提供理论基础。

摘要：研究加工工艺对麻酱调味料货架期的影响。利用均匀实验研究杀菌温度、杀菌时间、山梨酸钾、ε-聚赖氨酸、双乙酸钠、脱氢乙酸钠、BHA和TBHQ 8个因素对真空包装麻酱调味料的酸价、过氧化值、水分活度和p H等货架期品质的影响。用DPS软件设计15组均匀实验,优化出最佳的杀菌工艺为:80℃杀菌5 min,加入双乙酸钠10 g/kg,46℃贮藏的货架期为25周。

摘要：以麦芽糊精为壁材,采用干法制粒工艺制备红曲色素粉体,通过粉体特性测试仪、激光粒度分布仪、扫描电镜等,针对综合特性指标(差角、休止角、分散度)、粒径分布、微观结构、溶解度、热稳定性等进行分析,确定最佳工艺参数。结果表明,干法制粒的最佳工艺参数为输料转速45 r/min、压轮转速10 r/min、压力值10 MPa。在该工艺参数下制得的红曲色素粉体粒径较大,分布较均匀,分散度最低,能够有效降低红曲色素粉体的飞溅性,提高红曲色素的水溶性。通过试验设计优化得到了红曲色素粉体干法制粒工艺参数,该生产工艺稳定,质量可控,有望进一步放大生产。

摘要：为了提高解淀粉芽孢杆菌GSBa-1发酵产凝乳酶活力,通过单因素试验并采用Plackett-Burman试验设计对影响该菌株发酵产酶条件的6个因素进行评价,筛选出具有显著影响作用的3个因素即发酵温度、发酵时间和装液量,然后通过响应面法探讨此3个主要因素的最优发酵参数水平,获得最佳的发酵产酶条件。结果表明,解淀粉芽孢杆菌GSBa-1发酵产凝乳酶的最佳工艺条件为:发酵温度36℃,发酵时间75h,装液量40%,初始p H为培养基自然p H(6.85),接种量4%,摇床转速160r/min。此条件下解淀粉芽孢杆菌GSBa-1发酵产酶活力为742.42 Su/m L。解淀粉芽孢杆菌GSBa-1发酵产凝乳酶活力经发酵条件优化后得到显著提高,该菌株的发酵产酶及在干酪生产中的应用具有良好的产业化开发前景。

摘要：为了提高枯草芽孢杆菌发酵所产凝乳酶的活力,利用响应面实验法对该菌株的培养条件进行了优化,确定其最佳发酵产酶条件为发酵时间26.76 h、发酵温度31.98℃、p H6.82、装液量40%(v/v)、接种量4%(v/v),在该条件下枯草芽孢杆菌发酵生产的凝乳酶活性为456.72 SU/m L,接近理论预测值461.54 SU/m L。利用乙醇沉淀法对最佳发酵条件下生产的凝乳酶进行提取,加入体积分数为70%的乙醇中沉淀的凝乳酶活性最高。进一步对提取的凝乳酶进行酶学性质研究,结果表明:该酶的最适温度为60℃,且有较强的低温热稳定性,在(40~55)℃范围内保持1 h酶活无显著损失,在60℃保持60 min后完全失活,最适p H为6.5,Ca^(2+)能显著提高其凝乳活性,最大值为1.01×10~6 SU/g,Na^+和K^+的存在完全抑制其凝乳。