摘要：背景:手术精准度是外科手术成功的一项保证,以往椎弓根置钉过程在很大程度上凭借术者经验置钉,存在较大的主观性,不可避免地造成一定的误置率。3D打印技术辅助椎弓根置钉使得置钉过程具有可预见性,使手术个体化、精确化、简单化,有望得到广泛的推广应用。目的:设计3D打印的个体化椎弓根导板,体外模拟置钉,探讨其在椎体椎弓根置钉术中的可行性。方法:选择河北省人民医院2016年4至7月收治的11例腰椎退行性病变患者的腰椎薄层CT扫描数据,三维重建每例患者的L1、L3及L5三个椎体。根据1例患者的腰椎CT数据先行预实验:按照术中置钉原则计算机设计钉道进钉位置、方向,反复验证及调整,设计出"最佳"导板模型;然后体外模拟置钉,并电锯剖开验证置钉效果。结果与结论:(1)实验共应用椎弓根导板30个,置钉60枚,模拟置钉过程顺利,导板贴服良好,未出现椎弓根螺钉穿破椎弓根皮质,螺钉位置准确可靠,效果良好;(2)置钉前后左侧椎弓根进钉的水平面角度及矢状面角度变化差异均无显著性意义(P>0.05),右侧椎弓根进钉的水平面角度及矢状面角度变化差异亦无显著性意义(P>0.05);(3)结果表明,实验设计出的椎弓根导板置钉准确,模拟置钉前后进钉方向变化无明显差异,证实了3D打印个体化椎弓根导板的置钉可行性,但尚需进一步临床验证。

摘要：目的:探索并设计一种新颖的双靶点嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)结构,获得相应CAR-T细胞并验证其对肿瘤细胞的体内外杀伤效果。方法:构建并制备5种包含人源化CD19 scFv和CD79b scFv、CD8 hinge&TM-4-1BB-CD3ζ和/或CD3ε链胞内区的双靶点CAR-T细胞,荧光素酶法和ELISA法检测CAR-T细胞对3M-CD19-CD79b-Luc靶细胞的杀伤能力和细胞因子的分泌,选取最优结构CAR-T细胞治疗Daudi-Luc细胞构建的白血病小鼠模型并评估其疗效,同时使用其他靶点代入优选结构,相同方法验证该结构的稳定性及有效性。结果:CAR-19-79b-T细胞培养7 d后,CAR-19表达率为21.6%-36.3%,CAR-79b表达率为21.7%-37.8%。CAR-19-79b-T细胞在10∶1效靶比时,对3M-CD19-CD79b-Luc细胞的杀伤率均显著高于T细胞对照组,其中CARⅢ、CARⅣ号结构细胞杀伤能力最强,均显著高于T细胞组(P0.05)。杀伤显著且分泌细胞因子水平低的CARⅣ细胞对Daudi-Luc白血病小鼠治疗效果明显,延长小鼠生存周期至64 d,T细胞对照组小鼠于(41.0±2.4)d全部死亡。相同结构构建的CAR-19-BCMA-T和CAR-19-22-T均表现出了显著的杀伤能力和较低的细胞因子水平。结论:成功设计了一种新颖的抗双靶点CAR-T细胞,能够高效杀伤相应的肿瘤细胞,同时分泌较少的细胞因子(如TNF-α,IFN-γ),而且对Daudi淋巴瘤小鼠动物模型有显著的治疗效果,该双靶点CAR结构表现出良好的杀伤特异性和安全性。

摘要：目的:设计并制备一种分别靶向B细胞表面抗原CD19和CD22的CAR-T细胞,检测其对肿瘤细胞的体内外杀伤效果。方法:将含有人源化CD19 Sc Fv的二代CAR分子和带有CD3ε链作为共刺激结构域的CD22 Sc Fv CAR分子以P2A自剪切肽连接,序列连接于慢病毒载体p LTR-CMV-MCS中,以HEK-293T细胞包装相应的慢病毒载体,感染健康志愿者提供的T细胞制备CAR-19-22-T细胞,同时以相同二代结构分别构建单靶向CAR-T细胞作为参照。构建表达荧光素酶、CD19和/或CD22的前列腺癌3M细胞(靶细胞)。将各种CAR-T细胞与靶细胞共同培养,采用荧光素酶化学发光法和ELISA法检测其对靶细胞的杀伤能力和细胞因子的分泌水平。通过尾静脉注射Raji-Luc细胞构建NOD-SCID免疫缺陷小鼠白血病模型,分别注射各组CAR-T细胞进行治疗并评估其疗效。结果:培养7 d的CAR-19-22-T细胞的CAR-19表达率为13.7%,CAR-22表达率为14.3%。CAR-19-22-T细胞在10∶1效靶比时,对3M-CD19-Luc、3M-CD22-Luc和3M-CD19-CD22-Luc细胞的杀伤率均显著高于T细胞[(78.1±14.4)%vs(11.1±4.3)%(、46.7±10.7)%vs(12.4±2.7)%(、90.5±4.3)%vs(14.3±3.7)%,均P0.05)。结论:成功设计并制备了一种双靶点CAR-19-22-T细胞,其能够有效杀伤表达CD19和/或CD22抗原的肿瘤细胞,对Raji-Luc细胞的白血病模型小鼠有显著的治疗效果。

摘要：针对目前医疗质量安全管控人力不足、时效滞后、内容片面及追溯性不强、监测终端便携性差的问题及数据信息化需求,设计了基于手机APP的智慧医疗管控系统。该系统设置面向患者的智慧服务、面向医务人员的智慧医疗和面向行政人员的智慧管理3个应用界面。系统应用后扩展了传统医疗管控的内涵和外延、全流程监管得以实现,具有实际应用价值和广泛应用前景。

摘要：背景:近年发现,骨髓间充质干细胞可以向神经细胞分化,但其最佳诱导剂及诱导分化时间尚无公论。目的:寻求一种将成人骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞的最佳诱导剂及诱导时间。设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,于2007-10/2008-08在郑州大学第二附属医院完成。材料:取郑州大学医学院第二附属医院血液科穿刺的健康成人骨髓,性别不限。方法:将细胞转至24孔培养板中培养,将诱导剂脑源性神经营养因子(brain-derived nemotrophic factor,BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)配成质量浓度为20μg/L的溶液,维甲酸配成质量浓度为0.3mg/L的溶液,用加样器加入含DMEM、体积分数为2.5%胎牛血清的细胞中,诱导剂的最终浓度为2.5g/L,实验分为4组:GDNF+维甲酸组,BDNF+维甲酸组,GDNF+BDNF+维甲酸组,空白对照组(未加诱导剂)。主要观察指标:分别于诱导后12,24,48,96h后于倒置显微镜下观察各组细胞形状,并进行细胞计数,锥虫蓝检测细胞活力,并行免疫组织化学鉴定。结果:①诱导12h后,GDNF+维甲酸组有16.28%的细胞出现分化,其他3组未发现分化细胞,行免疫组织化学检测显示4组细胞胞浆均显示蓝色为阴性表现,即未有神经元样细胞出现。②诱导24h后,GDNF+维甲酸组有14.83%的细胞出现分化,BDNF+维甲酸组分化率为10.66%,GDNF+BDNF+维甲酸组为4.53%,空白对照组未发现分化细胞。免疫组织化学检测4组均为阴性。③诱导48h后,4组细胞分化率分别为(63.91±2.19)%,(23.15±3.00)%,(19.69±1.98)%,0,免疫组织化学检测结果GDNF+维甲酸组为阳性,即有神经元样细胞出现,其余3组均为阴性。④诱导96h后,4组细胞分化率分别为(51.29±3.75)%,(25.13±2.88)%,(23.61±1.94)%,0,免疫组织化学检测均为阴性。结论:实验中骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞的最佳诱导剂为GDNF+维甲酸,最佳诱导时间为48h。

摘要：目的了解我国ICU大数据发展的现状,明确现存问题,为后续重症大数据平台发展和建设提供参考。方法通过互联网对824个重症医学专业医师进行问卷调查。问卷由中国卫生信息与健康医疗大数据学会重症医学与标准专委会设计。经过质控分析筛选,最终纳入来自598家医院的712个医师的反馈结果。结果所有受调查医院中,355家(59.4%)的ICU内部硬件数据整合程度欠佳,185家(30.9%)的临床信息系统可以向专科科研系统开放接口,133家(22.2%)支持数据分析结果共享。所有受调查医师中,389人(54.6%)可以投入支持系统建设及协调工作,但619人(86.9%)没有可直接用于大数据建设的科研经费支持项目开展。重症感染、重症呼吸、重症数据科学与信息学、重症血流动力学、重症神经是排名前五的亚专科兴趣,占总数的60.1%。结论现阶段我国ICU的信息化程度处于初级阶段。各医院对科研合作的开放程度较低,且需要更多经费和人力支持重症大数据的建设。