摘要：目的探讨采用改形设计的指固有动脉岛状皮瓣修复复杂指端缺损的手术方法及临床效果。方法采用回顾性观察性研究方法。2017年1月—2021年12月,北部战区总医院收治15例(15指)符合入选标准的累及指腹、甲床及甲侧壁的复杂指端缺损患者,其中男11例、女4例,年龄18~55岁。清创后创面面积为2.5 cm×2.0 cm~3.5 cm×3.5 cm,均采用改形设计的指固有动脉岛状皮瓣(包括主皮瓣、舌形皮瓣、三角形皮瓣3个部分)进行修复,其中主皮瓣用于覆盖指腹缺损,舌形皮瓣用于覆盖甲床及甲侧壁缺损,三角形皮瓣插入指腹创缘用于覆盖血管蒂。皮瓣切取范围为3.0 cm×2.0 cm~4.5 cm×3.0 cm。采用腹股沟区全厚皮片移植修复皮瓣供区,将皮片供区直接缝合。术后,观察皮瓣和皮片成活情况以及患指外形。随访时,观察患指指尖形态,测量患指指腹两点辨别觉距离,询问患者对疗效的满意度(包括非常满意、满意、不满意),并以美国手外科学会推荐的总主动活动度系统评定标准评定患指功能。结果术后,15例患者的主皮瓣及移植皮片均全部成活;1例患者的舌形皮瓣边缘切口愈合不良,1例患者的舌形皮瓣远端发生静脉淤滞;三角形皮瓣在术后早期略显臃肿,2~3个月后变平整;总体上,有2例患者皮瓣发生皮下血肿。所有皮瓣并发症经适当换药、拆线或加压包扎后逐渐治愈。术后,皮瓣外形饱满并形成突出的指端形态。术后随访6个月~5年,患指指尖突出、饱满,患指指腹两点辨别觉距离为(8.6±1.4)mm,对疗效非常满意者8例、满意者6例、不满意者1例,患指功能评定均为优。结论改形设计的指固有动脉岛状皮瓣可以修复累及指腹、甲床及甲侧壁的复杂指端缺损,手术方法简单,术后指尖形态及功能均良好。

摘要：目的总结应用V形切口切除头皮下肿物的临床经验。方法回顾性分析2020年8月至2021年12月北部战区总医院烧伤整形科收治的头皮下良性肿物患者的临床资料,肿物直径均大于3 cm且与周围组织粘连紧密,均应用V形切口切除肿物。术中沿设计线切开头皮、掀起V形皮瓣并完整切除肿物,自切口尖端逐针缝合至张力适中位置,将头皮瓣平铺于创面上,切除多余的头皮组织并缝合,形成Y形切口。术后对皮瓣成活、并发症、切口瘢痕、切口周围头发生长及肿物复发情况进行观察和随访。结果共纳入20例患者,其中男12例,女8例;年龄(46.8±10.5)岁;病史(3.6±1.9)年;肿物直径(4.1±1.1) cm;皮脂腺囊肿8例,脂肪瘤5例,表皮样囊肿7例。术后18例皮瓣成活良好,2例皮瓣尖端表皮坏死,经换药后愈合。术后随访6~12个月,3例患者局部头皮感觉麻木,3~6个月好转;20例术区头皮平整,切口瘢痕无明显增生,视觉上瘢痕短,周围头发生长正常,肿物均无复发。结论 V形切口显露肿物相对容易,可以精确切除多余皮肤,术后头皮平整度及外观较好,是与周围组织粘连紧密、剥离困难的较大头皮下肿物较好的切口选择。

摘要：目的探讨微小RNA-205(miR-205)在人增生性瘢痕中的表达及作用。方法采用实验研究方法。收集于2019年10月—2020年1月在北部战区总医院就诊的符合入选标准的6例增生性瘢痕患者[男1例、女5例,年龄(36±7)岁]的增生性瘢痕组织及同时期于同单位就诊的6例符合入选标准的外伤患者[男2例、女4例,年龄(38±9)岁]行皮瓣移植手术后剩余的正常皮肤组织,采用实时荧光定量反转录PCR法检测miR-205和血小板反应蛋白1(TSP-1)的mRNA表达情况。取增生性瘢痕组织,培养第3~5代成纤维细胞(Fb),用于后续实验。取2批增生性瘢痕Fb,分成TSP-1+miR-205对照组、TSP-1+miR-205模拟物组和TSP-1突变+miR-205对照组、TSP-1突变+miR-205模拟物组,分别转染相应的序列。转染后48 h,采用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测荧光素酶和肾荧光素酶的表达,并计算两者比值,以此表示TSP-1的活性。取2批增生性瘢痕Fb,分为miR-205对照组、miR-205模拟物组、miR-205抑制物组及miR-205对照组、miR-205模拟物组、miR-205模拟物+TSP-1组,分别转染相应的序列,转染后0(即刻)、12、24、36、48 h,用酶标仪检测细胞活力。取2批增生性瘢痕Fb,同细胞活力检测实验进行分组及处理,转染后24 h,行Hoechst 33258染色,观察细胞核皱缩情况,以此反映细胞凋亡情况。细胞实验中样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、t检验及χ2检验。结果增生性瘢痕组织中miR-205的mRNA表达量为0.54±0.05,明显低于正常皮肤组织中的1.26±0.07(t=8.213,P0.05)。转染后12、24、36、48 h,miR-205模拟物组细胞活力明显低于miR-205对照组(t=6.169、12.670、27.130、12.670,P<0.05或P<0.01);转染后0、12、24、36、48 h,miR-205抑制物组细胞活力明显高于miR-205对照组(t=6.169、7.221、7.787、7.835、13.030,P<0.05或P<0.01)。转染后12、24、36、48 h,miR-205模拟物组细胞活力明显低于miR-205对照组和miR-205模拟物+TSP-1组(t=8.118、26.970、39.550、42.490,14.570、12.240、36.830、45.220,P<0.05或P<0.01)。转染后24 h,与miR-205对照组相比,miR-205模拟物组细胞凋亡增加,miR-205抑制物组细胞凋亡减少。转染后24 h,与miR-205模拟物组相比,miR-205对照组和miR-205模拟物+TSP-1组细胞凋亡减少。结论miR-205可以通过抑制TSP-1的表达,抑制人增生性瘢痕Fb的增殖,促进Fb的凋亡,可能成为增生性瘢痕潜在的治疗靶点。

摘要：目的探讨微小RNA-296(miR-296)在兔增生性瘢痕中的表达及对人成纤维细胞(HFb)的作用。方法采用实验研究方法。将12只雌雄不限成年新西兰长耳兔按完全随机法分为正常对照组和瘢痕组,每组6只。瘢痕组根据文献制作兔耳增生性瘢痕模型,正常对照组兔不行任何处理。于瘢痕组建模后60 d,采用苏木精-伊红染色法观察2组兔耳瘢痕/皮肤组织中成纤维细胞(Fb)生长与排列,采用实时荧光定量反转录PCR法检测2组兔耳瘢痕/皮肤组织中miR-296和转化生长因子β1(TGF-β1)的mRNA表达量,另对miR-296与TGF-β1mRNA表达量的相关性进行Pearson回归分析。取2批HFb,第1批分为TGF-β1野生型+miR-296阴性对照组和TGF-β1野生型+miR-296模拟物组,第2批分为TGF-β1突变型+miR-296阴性对照组和TGF-β1突变型+miR-296模拟物组,分别转染对应的序列。转染后48 h,采用荧光素酶报告基因检测试剂盒检测每组细胞TGF-β1的荧光素酶和肾荧光素酶的表达,以其比值反映基因表达水平。取2批HFb,每批细胞均分为miR-296阴性对照组和miR-296模拟物组,分别转染对应序列。第1批细胞转染后0(即刻)、12、24、36、48 h,采用噻唑蓝法检测细胞增殖情况。第2批细胞转染后24 h,采用蛋白质印迹法检测细胞中TGF-β1和Ⅰ型胶原蛋白表达情况。细胞实验中样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、独立样本t检验。结果瘢痕组建模后60 d,瘢痕组兔耳瘢痕组织中Fb过度增生且排列紊乱,正常对照组兔耳皮肤组织中Fb生长与排列无异常;瘢痕组兔耳瘢痕组织中miR-296的mRNA表达量(0.65±0.11)显著低于正常对照组兔耳皮肤组织(1.19±0.12,t=5.175,P0.05)。miR-296模拟物组细胞增殖能力在转染后12、24、36、48 h明显低于miR-296阴性对照组(t=3.275、11.980、10.460、17.260,P<0.05或P<0.01)。转染后24 h,miR-296阴性对照组细胞TGF-β1和Ⅰ型胶原的蛋白表达量均明显高于miR-296模拟物组(t=3.758、29.390,P<0.05或P<0.01)。结论兔增生性瘢痕中miR-296表达下调,miR-296能够通过下调TGF-β1的表达抑制HFb的增殖和Ⅰ型胶原蛋白的表达。

摘要：目的探讨微小RNA-627(miR-627)在人增生性瘢痕中的表达及作用。方法采用实验研究方法。收集2019年10月—2020年1月于北部战区总医院就诊的符合入选标准的6例增生性瘢痕患者[男2例、女4例,年龄(34±11)岁]的增生性瘢痕组织、同期于同单位就诊的6例符合入选标准的外伤患者[男3例、女3例,年龄(35±13)岁]行皮瓣移植手术后剩余的正常皮肤组织,采用实时荧光定量反转录PCR法检测miR-627的mRNA表达。取增生性瘢痕组织,培养第3~5代成纤维细胞(Fb),经鉴定后用于后续实验。取增生性瘢痕Fb,分为miR-627阴性对照组、miR-627模拟物组和miR-627抑制物组,分别转染对应的序列,转染后0(即刻)、12、24、36、48 h,用噻唑蓝法检测细胞活力;转染后24 h,用流式细胞术检测细胞凋亡情况;转染后24 h,用蛋白质印迹法检测胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、Ⅰ型胶原和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平。取2批增生性瘢痕Fb,一批分为IGF-Ⅰ野生型+miR-627阴性对照组、IGF-Ⅰ野生型+miR-627模拟物组,另一批分为IGF-Ⅰ突变型+miR-627阴性对照组、IGF-Ⅰ突变型+miR-627模拟物组,分别转染对应的序列,转染后48 h,采用荧光素酶报告基因检测试剂盒分别检测荧光素酶和肾荧光素酶的表达,并计算两者比值,反映IGF-Ⅰ的活性。取增生性瘢痕Fb,分为miR-627阴性对照组、单纯miR-627模拟物组和miR-627模拟物+IGF-Ⅰ组,分别转染对应的序列,转染后24 h,采用蛋白质印迹法检测IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原和α-SMA蛋白表达水平。细胞实验中样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、独立样本t检验及χ^(2)检验。结果增生性瘢痕组织中miR-627的mRNA表达量为0.47±0.06,显著低于正常皮肤组织中的1.12±0.23(t=15.090,P0.05)。转染后24 h,单纯miR-627模拟物组细胞IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原和α-SMA的蛋白表达量1.623±0.070、1.363±0.042、1.617±0.025均较miR-627阴性对照组的2.723±0.045、2.147±0.067、2.533±0.055明显降低(t=22.831、7.280、26.220,P<0.01),miR-627模拟物+IGF-Ⅰ组细胞IGF-Ⅰ、Ⅰ型胶原、α-SMA的蛋白表达量2.477±0.102、1.760±0.046、2.387±0.049均较单纯miR-627模拟物组明显升高(t=3.830、8.286、3.436,P<0.05或P<0.01)。结论人增生性瘢痕中miR-627表达下调;miR-627可通过靶向抑制IGF-Ⅰ的表达从而抑制人增生性瘢痕Fb的增殖,促进Fb的凋亡。

摘要：目的探讨刺五加皂苷E对人增生性瘢痕成纤维细胞(Fb)生长的影响及作用机制。方法采用实验研究方法。收集北部战区总医院2018年10月—2019年3月收治的6例增生性瘢痕患者[男1例、女5例,年龄20~51(37±8)岁]的增生性瘢痕组织,培养第3~7代人增生性瘢痕Fb用于后续实验。取细胞,分为生理盐水组、100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组和400μmol/L刺五加皂苷E组,分别加入生理盐水,终物质的量浓度为100、200、400μmol/L的刺五加皂苷E。取细胞,分为单纯小干扰RNA(siRNA)-阴性对照组、单纯siRNA-血小板反应蛋白1(THBS1)组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组和siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组,单纯siRNA-阴性对照组和siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组细胞转染siRNA-阴性对照,单纯siRNA-THBS1组和siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组细胞转染siRNA-THBS1,转染24 h后单纯siRNA-阴性对照组和单纯siRNA-THBS1组细胞加入生理盐水,siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组和siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组细胞加入终物质的量浓度为400μmol/L的刺五加皂苷E。于处理后0(即刻)、12、24、36、48 h,采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性(以吸光度值表示)。取细胞分为生理盐水组、200μmol/L刺五加皂苷E组、400μmol/L刺五加皂苷E组,另取细胞分为单纯siRNA-阴性对照组、单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组、siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组,相应处理同前,于处理后24 h,行Hoechst 33258染色观察细胞凋亡情况。取细胞分为生理盐水组、100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组、400μmol/L刺五加皂苷E组,另取细胞分为单纯siRNA-阴性对照组、单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组、siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组,相应处理同前,于处理后24 h,采用蛋白质印迹法检测细胞THBS1蛋白水平。以上实验每组各时间点样本数均为3。对数据行析因设计方差分析、单因素方差分析、独立样本t检验、Bonferroni校正。结果处理后0 h,生理盐水组、100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组和400μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值相近(P>0.05)。处理后12、24、36、48 h,100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组、400μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值均明显低于生理盐水组(t=7.64、28.94、13.69、5.87,6.96、22.83、14.75、11.52,21.09、20.15、29.52、23.12,P0.05);处理后12、24、36、48 h,单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组细胞吸光度值明显低于单纯siRNA-阴性对照组(t=7.14、44.87、20.67、40.98,9.26、11.08、15.33、20.56,P0.05)。处理后24 h,与生理盐水组比较,200μmol/L刺五加皂苷E组和400μmol/L刺五加皂苷E组凋亡细胞数量增加。处理后24 h,与单纯siRNA-阴性对照组比较,单纯siRNA-THBS1组和siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组凋亡细胞数量增加;单纯siRNA-THBS1组、siRNA-阴性对照+400μmol/L刺五加皂苷E组和siRNA-THBS1+400μmol/L刺五加皂苷E组凋亡细胞数量相近。处理后24 h,100μmol/L刺五加皂苷E组、200μmol/L刺五加皂苷E组、400μmol/L刺五加皂苷E组细胞THBS1蛋白水平(0.87±0.12、0.38±0.07、0.20±0.09)均明显低于生理盐水组(1.8

摘要：目的探究脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对缺血皮瓣的影响效果及具体机制。方法自2020年10月至2021年4月,北部战区总医院烧伤整形科分离、培养、观察ADSCs,并对其表面免疫表型和成骨能力进行检测;建立大鼠缺血皮瓣模型,以大鼠背部中线为轴,于对称轴两侧相对应位置各设计一个形状、大小完全一致的1.2 cm×6.0 cm的矩形皮瓣;每只大鼠背部右侧皮瓣为实验组,左侧皮瓣为对照组,实验组术后即刻注射ADSCs,1次/d(0.1 ml/点,共0.4 ml),对照组注射等剂量生理盐水;对皮瓣进行大体观察和组织学观察及成活率计算;通过Western blot检测皮瓣内血管内皮生长因子(vescular endothelial growth factor,VEGF)和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)生成量的差异;通过Elisa实验检测皮瓣内炎性因子肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达情况。结果分离培养后的ADSCs传代后在光镜下呈长梭形并连接成片,流式细胞仪检测显示,细胞表面高表达CD73、CD90,不表达CD34、CD45。并且表现出良好的向骨组织分化的能力;术后大体观察显示,实验组皮瓣较对照组皮瓣坏死面积明显减少。对照组皮瓣总成活率为(32.20%±1.16%),实验组皮瓣总成活率为(63.42%±1.21%),组间比较差异有统计学意义,P<0.05;组织学染色结果显示,对照组皮瓣较实验组皮瓣组织层次结构更加不规整,组织内小血管数减少;Western blot实验的结果显示,实验组皮瓣较对照组皮瓣内VEGF和TGF-β1的含量明显增加;ELISA实验结果显示,实验组皮瓣较对照组皮瓣内炎性因子IL-6、TNF-α的含量有所减少。结论ADSCs可通过促进缺血皮瓣组织内VEGF和TGF-β1的表达而发挥促血管生成作用,进而增加皮瓣成活面积。ADSCs可以通过抑制缺血皮瓣组织内IL-6和TNF-α的表达而发挥抑制炎症、减少组织损伤的作用,进而增加皮瓣成活的面积。