摘要：免疫分析方法凭借其独特的优势在小分子半抗原物质的检测中发挥着重要作用,本文综述了国内外在小分子半抗原的设计原则、合成、鉴定、评价方法及其影响因素等方面的研究进展。

摘要：目的 :在大肠杆菌中克隆表达牛生长抑素基因并初步纯化。方法 :根据牛生长抑素基因序列 ,按照大肠杆菌偏爱密码子设计合成 2个DNA片段 ,经退火、Klenow酶补平及连接反应 ,获得牛生长抑素基因片段 ;经PCR扩增、EcoRⅠ和BamHⅠ酶切 ,牛生长抑素基因被克隆在表达质粒 pALEX中。 结果 :将重组质粒转化BL2 1(DE3 ) ,经IPTG诱导获得表达。表达产物经超声破碎和GST Sepharose 4B亲和层析纯化获得重组蛋白。结论 :牛生长抑素基因得到了高水平表达并初步纯化 ,为表达产物的大量制备。

摘要：目的 :寻找和确定SARS病毒中高保守的蛋白 ,以指导针对这些高保守蛋白为药物靶的药物分子设计。方法 :采用比较基因组的方法和PSI Blast搜索方法分别探讨SARS病毒不同蛋白在冠状病毒属内部及在正链RNA病毒内的保守情况。结果 :确定了SARS非结构蛋白 ,特别是RdRp、Hel、nsP12、nsP13等蛋白在冠状病毒属内部表现很高的序列相似性 ,同时它们在正链RNA病毒范围内呈现不同程度的保守性。结论 :主要参与病毒的复制、转录及后处理过程的非结构蛋白RdRp、Hel、nsP12、nsP13的高保守性 ,表明与病毒扩增相关的基因调控机制的保守是病毒进化的重要特征 ;同时这些非结构蛋白的高保守性及功能重要性表明它们更适合作为有效的药物靶分子。

摘要：采用摇瓶发酵试验,比较了11种已用于芽孢杆菌合成环脂肽的培养基对解淀粉芽孢杆菌CC09产iturin A的影响,筛选适合菌株CC09产iturin A的主要营养成分。然后采用Plackett-Burman设计、中心组合设计和响应面分析等方法,优化培养基组成及发酵条件。获得了解淀粉芽孢杆菌CC09摇瓶发酵产生iturin A的最佳培养基组成为小麦粉14 g/L、黄豆饼粉25 g/L、玉米粉8 g/L、MgSO_4 0.1 g/L、MnSO_4 2.5 mg/L、FeSO_4 0.8 mg/L;最佳发酵条件为装液量60 mL/250 mL、pH 6.0、28℃、125 r/min、48 h,在此条件下,生防解淀粉芽孢杆菌CC09合成iturin A的产量达501 mg/L,较优化前的138 mg/L提高了4.2倍,且发酵成本是利用改良LB培养基的4.3%。

摘要：本研究以多黏菌素为模板,通过改变其成环氨基酸及末端脂肪链,对多黏菌素结构进行改造,并通过固相合成的方法合成了13个新的多黏菌素类似物。测定其最低抑菌浓度(MIC)、溶血毒性和小鼠半数致死量,得到了一组对铜绿假单胞菌具有较强抗菌活性的多黏菌素类似物,其中化合物12、15、17及18对铜绿假单胞菌的MIC比硫酸多黏菌素E低2～4倍。同时,化合物12和17的毒性(LD_(50))与硫酸多黏菌素E相比降低了3～4倍。

摘要：目的:在大肠杆菌中克隆和表达骨形态发生蛋白2(BMP2)的变体P6BMP2并初步纯化。方法:根据P6肽的氨基酸序列,按照大肠杆菌偏爱密码子将P6肽的核酸序列设计在5′端引物,通过PCR方法合成P6BMP2基因,并将其克隆到大肠杆菌表达质粒pALEX中,经NcoⅠ、XhoⅠ双酶切和DNA序列测定验证。结果:通过双酶切和DNA序列分析,证实获得的基因片段与我们期望的相符合,重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导获得表达。表达产物经超声破碎和Heparin Sepharo-se TM6 Fast Flow亲和层析纯化,获得重组蛋白。结论:构建了P6BMP2的表达质粒,获得P6BMP2的表达并建立了纯化方式,为P6BMP2的深入研究和应用奠定了坚实的基础。

摘要：目的:在大肠杆菌中克隆和表达人源胸腺肽(thymosinβ4,TB4)基因并进行分离纯化及促血管生成生物活性鉴定。方法:人工设计TB4基因片段,其密码子为大肠杆菌所偏爱,将合成的寡核苷酸片段经分子克隆拼接成TB4基因片段,与pET28a(+)载体连接成重组表达质粒pET28a-TB4,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达带His6-Tag的融合蛋白His6-TB4,通过镍柱亲和层析纯化,采用SDS-PAGE分析鉴定,由CAM试验进行重组蛋白活性的生物活性鉴定。结果:经DNA序列分析鉴定,重组质粒pET28a-TB4构建成功,IPTG诱导后的融合蛋白His6-TB4在大肠杆菌中得到高效表达,并经一步镍柱亲和层析即获得纯化。CAM试验证明其有促进毛细血管生成的活性。结论:获得高效表达的、高纯度的His6-TB4融合蛋白,为TB4的进一步的功能分析和促血管生成生物活性研究奠定了基础。

摘要：本研究共设计合成了15个9-取代巴马汀(palmatine,1,异喹啉生物碱类)衍生物,首次评价了其体外抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)活性。初步构效关系表明9-位引入适当的二级胺取代基利于抗菌活性提高。其中,代表性化合物5a对部分甲硝唑耐药菌株显示较好活性,最低抑菌浓度(MICs)值为4μg·mL^-1,优于先导物1。另外,5a显示良好安全性,口服LD50>1000 mg·kg^-1。分子对接实验结果提示,化合物5a可能通过作用于Hp脲酶而发挥抑菌作用。本研究结果为巴马汀类衍生物发展成一类新颖抗Hp联合用药组分提供了重要科学数据。

摘要：微小核糖核酸(miRNA)是一类长约19～23个核苷酸的内源性非编码核糖核酸(RNA),与基因的表达调控密切相关。其在生长发育、细胞分化与增生、细胞凋亡、激素分泌、脂肪代谢及癌症的发生发展等生命活动中具有重要作用。miRNA作为潜在的药物开发新靶点引起关注,基于miRNA的分子机制及其在药物研发中的应用值得探讨。

摘要：Two photolabile amphiphilic supramolecules were designed and synthesized with mono-dendrite and tri-dendrite, which can reversibly self-assemble to spheroid and wedge-shaped nanoparticles. With multiple branches of terminal amine labeled PEG, these nanoparticles can associate with a negatively charged oligonucleotide and their usage for oligonucleotide delivery was evaluated. Oligonucleotide/nanoparticle complex containing tri-dendrite can efficiently deliver oligonucleotide into cells via endocytosis, while the complex containing mono-dendrite almost lost their ability to deliver oligonucleotide. Further light activation triggered the dissociation of tri-dendrite supramolecular assembly via 1,4- and 1,6-quinone-methide rearrangement, leading to the efficient unpacking of the oligonucleotide in cells.