摘要：目的:编制体检人群幽门螺杆菌感染知信行问卷，并进行信效度验证。方法:本研究为横断面调查。依据知信行理论框架，通过回顾性文献研究、质性访谈、课题组讨论等方法自行设计体检人群幽门螺杆菌感染知信行问卷初稿，通过专家咨询法（Delphi法）对问卷的结构和条目进行咨询修订;2021年5—6月对华东疗养院体检中心的186名体检人员进行调查，经问卷信效度调整和验证，形成"体检人群幽门螺杆菌感染知信行问卷"终稿。结果:形成的体检人群幽门螺杆菌感染知信行问卷包含3个维度、28个条目，累计方差贡献率为56.271%。问卷I-CVI为0.75~1.00，S-CVI为0.94。问卷知识、态度、行为维度Cronbach α系数分别为0.862、0.901、0.798。问卷总体Cronbach α系数为0.890，折半信度为0.698。问卷的重测信度为0.919，各维度重测信度为0.924、0.917、0.845。 结论:体检人群幽门螺杆菌感染知信行问卷具有良好的信效度，可用于体检人群幽门螺杆菌感染知信行水平的测定。

摘要：目的:构建并鉴定大鼠谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)RNA干扰表达载体,并检测GS对星形胶质细胞黏附的影响。方法:利用软件根据GS mRNA序列设计特异性siRNA序列,与GS真核表达载体GS-EGFP以LipofectamineTM2000试剂联合转染Hela-G细胞,以GFP为指标鉴定其有效性;体外合成该siRNA插入序列,将其定向克隆至真核表达载体pRNATH1.l/Neo中并转染至大鼠星形胶质细胞中,以免疫细胞化学方法鉴定GS的表达;通过免疫化学法对actin特异性染色分析GSRNA干扰后对星形胶质细胞黏附的影响。结果:GS siRNA能有效抑制GS-EGFP在Hela-G细胞中的表达;DNA测序证实合成并被克隆入真核表达载体pRNAT HI.1/Neo的siRNA插入序列完全正确,GS siRNA表达载体可特异性抑制星形胶质细胞中GS的表达;GS RNA干扰导致细胞黏附力显著降低。结论:成功构建大鼠GS siRNA真核表达载体,初步表明GS影响星形胶质细胞的黏附,为后期研究GS在中枢神经系统损伤后反应性星形胶质细胞中的功能奠定了基础。

摘要：目的建立基于PCR反向斑点杂交技术(PCR-RDB)的32型生殖道人乳头瘤病毒(HPV)基因分型方法。方法设计并合成基于MY09/11的HPV型特异性引物和探针;以HPV载体和临床样本为模板,用自建的PCR-RDB法对300例临床宫颈脱落细胞进行HPV分型检测,并与商品化的PCR-RDB法检测结果进行比较。结果自建的PCR-RDB法的特异性、准确性和重复性良好,其对39和51型HPV的最低检测限为50拷贝/反应,其余各型别HPV最低检测限为5拷贝/反应。用自建的PCR-RDB法对300例临床样本进行HPV分型的总阳性率、单一感染率和多重感染率分别为18.67%(56/300)、12.33%(37/300)、6.33%(19/300),与商品化试剂的检测结果均无统计学意义(χ2分别为0.744,0.597和0.118,P均>0.05)。两法一致性检验的Kappa值为0.889(P<0.01)。结论成功建立了灵敏度、特异性高,重复性良好,适合临床上对32型HPV分型的PCR-RDB法。

摘要：多肽核酸(peptide nucleic acid,PNA)是DNA类似物,其生物性质稳定,不被核酸酶和蛋白酶消化降解。PNA遵循Watson-Crick规则和Hoogsteen规则与单链DNA(RNA)以序列特异性形成极其稳定的杂交二聚体或三聚体。根据PNA的生物特性,以PNA为基础的PNA探针和PCR钳制技术在肿瘤和老化研究以及染色体畸形、细菌和DNA点突变诊断等方面的应用日益增多。PNA协助的携带非天然氨基酸的氨基酰化tRNA的改造已获得成功,并且合成了人工蛋白。作为反义抑制药物,PNA在抑制细菌和病毒的基因表达以及蛋白质翻译方面也取得了初步成果。基于PNA的由RNA触发的药物释放系统设计巧妙,是十分有希望的靶向治疗药物。