摘要：为了证明苏云金芽胞杆菌以色列亚种２０ｋＤｅ蛋白质对ＣｙｔＡ蛋白溶细胞作用的影响， 根据２０ｋＤｅ蛋白质和ｃｙｔＡ蛋白基因的核苷酸序列，用ＡＭＰＬＩＦＹ程序设计了一套带有酶切位 点的引物，经ＰＣＲ扩增分别获得了２０ｋＤｅ蛋白质和ｃｙｔＡ蛋白基因。将其基因与表达载体 ｐＵＨＥ２４连接并转化到大肠杆菌ＸＬＩ和ＤＨＳ 分别获得含２０ｋＤａ蛋白质基因的克隆子 ＬＺ２９；含ｃｙｔＡ基因的克隆子ＬＺｃｙｔＡ和含有二者基因的重组子ＬＺ２０Ａ．在ＩＰＴＧ诱导下，测定 了不同克隆株基因表达产物对大肠杆菌细胞生长的影响。结果表明：ＬＺ２０的细胞生长不受影 响；ＬＺｃｙｔＡ的细胞被杀死；ＬＺ２０Ａ的细胞生长也不受影响。这表明２０ｋＤａ蛋白质基因与ｃｙｔＡ 蛋白基因重组后，２０ｋＤａ蛋白质基因表达产物可保护ＣｙｔＡ蛋白对大肠杆菌的溶细胞作用，而 巳这种作用并不因不同大肠杆菌受体而改变。

摘要：利用PCR方法 ,设计相应的扩增引物 ,以pHT/ 2 72up -pSGMU质粒DNA为模板 ,扩增得到缺失相应序列的上游片段 ,然后将其连接到pHT -pSGMU穿梭载体的BtI启动子前 ,再将这些缺失部分cry1A上游区的重组质粒转入苏云金杆菌中 ,观察它们对BtI -lacZ融合基因表达的影响。结果表明 ,缺失反向重复区 ,保留弯曲区 (PCRA) ,对BtI-lacZ融合基因在库斯塔克亚种菌株 80 - 2 1中的表达与完整上游区的增强作用相一致 ,而在鲇泽亚种中 ,BtI -lacZ基因表达量明显比未缺失体低。这一结果也证明cry1A上游弯曲区在转录调控上的重要作用。