摘要：设计并构建了一个小型人工芦苇床，分析生长了１８个月的芦苇床系统处理污水的效能。结果表明，芦苇床系统处理生活污水的效果，在１ｄ内的ＢＯＤ５去除率达８５％以上、ＣＯＤ达８０％以上、ＳＳ和总大肠菌群的去除率达９０％以上，该系统对ＮＨ３－Ｎ和Ｏ－ＰＯ４－Ｐ的去除效果较差，尤其是对Ｏ－ＰＯ４－Ｐ的去除率很低。去污的最佳滞留时间ＢＯＤ５和ＣＯＤ为２ｄ、ＳＳ为１．５ｄ、总大肠菌群为５ｄ、ＮＨ３－Ｎ为６ｄ、Ｏ－ＰＯ４－Ｐ为１０ｄ。

摘要：以毛木耳Auricularia cornea杂交子APM2-16的亲本单核体APP7和M2S16为研究材料,经同源序列比对,从单核体APP7的基因组中获得了A交配型位点序列,并定位了mip基因的位置。根据APM2-16的转录组和单核体APP7基因组的相关信息设计引物,通过PCR扩增和克隆测序的方式获得单核体APP7和M2S16中的HD基因序列,通过生物信息学分析发现两者在核苷酸序列上没有同源性,都编码同源结构域转录因子。通过对毛木耳交配型位点的研究有助于进一步开展该物种的遗传学基础研究,为菌种遗传改良奠定基础。

摘要：在有益细菌与宿主植物的相互作用过程中,引入细菌能否在根部定殖至关重要。因此,测量细菌在根部定殖的水平已成为根圈微生物学研究的常规内容。但在测量细菌根部定殖时,必须首先给予根部定殖一个明确的概念和定义。真正意义上的根部定殖者是指那些在竞争性环境中(如自然田间土壤中)能在根部定殖的细菌。所以选择的模式检验系统应是非灭菌的。引入细菌的回收方法决定于实验目的。测量根外定殖、根内定殖或是全部,要求采用不同的取样方法和样品处理方式。要将引入菌株与土著根圈微生物区系中的同类成员区分开还必须有标记系统,自发抗生索抗性、免疫学方法、外源DNA顺序和各类标记基因均属于已在应用之中的标记系统,但每种方法各具优缺点。测量根部定殖的试验设计还需要注意几个统计学上的问题,如样本单位的组成、所测报圈定殖者群体数量的最佳表达方式、方差分析的基本条件、均值主算中"零值"的外理等。上述方法及其涉及的问题本文都作了介绍和讨论。

摘要：　从全国十多个省市送检的疑似患多发浆膜炎与关节炎猪的病料中分离到 32株细菌,进行了细菌形态观察、培养特性和生化特性鉴定;根据副猪嗜血杆菌 16SrRNA序列设计引物进行PCR扩增, 将 822bp扩增片段连入T 载体后测序, 再与GenBank(M75065 )中的序列进行比对,表明其与国外副猪嗜血杆菌菌株 16SrRNA序列的同源性为 97%以上,确定为副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis, Hps)。将其中的 15株按Kieletein Rapp Gabriedson(KRG)琼脂扩散血清分型方法进行血清型鉴定,结果为血清 5型 3株、血清 4型 4株、血清 13型2株、血清 12型 2株,另外有 4株不能进行分型。该结果表明副猪嗜血杆菌在我国广泛存在。

摘要：目的本文旨在建立一种能快速鉴定结核分枝杆菌复合群不同成员的多重PCR方法。方法针对结核分枝杆菌复合群4个特异性基因16sRNA、IS6110、RV2652、RV3873设计引物,通过筛选优化引物浓度、退火温度、Mg2+浓度和dNTP浓度,确定了最佳反应条件。结果扩增产物的大小分别为824bp、621bp、418bp和254bp,能特异性检测并鉴别出非结核分枝杆菌(824bp 1条带)、卡介苗(824bp和621bp 2条带)、牛分枝杆菌(824bp、621bp和254bp 3条带)和结核分枝杆菌(4条带)。检测灵敏度达到125fg。对42份牛结核菌素皮内变态反应阳性牛的肺淋巴结样本和115份肺结核病人的痰液样品进行了检测,其检出率或准确率明显高于传统方法。结论成功建立了多重PCR方法,能快速、准确地对结核分枝杆菌群进行种、型鉴别。

摘要：【目的】构建炭疽芽孢杆菌A16R株eag基因缺失突变株,为研究eag基因的功能奠定了基础。【方法】本研究以我国人用炭疽杆菌活疫苗A16R株中eag基因为目的缺失基因,根据炭疽芽孢杆菌Ames株基因组序列,利用软件设计了扩增上下游同源臂以及抗性基因引物,构建了重组质粒,将该重组质粒电击转入炭疽杆菌A16R感受态细胞中,利用同源重组原理筛选到炭疽杆菌A16R株eag基因缺失突变株。在分子水平及蛋白质组学方面对基因缺失突变株进行验证。【结果】成功构建了重组质粒,经同源重组后获得eag基因缺失突变株。PCR鉴定表明目的基因已经丢失;SDS PAGE表明野生株与突变株在93 kDa处有差异蛋白条带,经质谱鉴定分析该条带为目的基因所表达的EA1蛋白;双向电泳结果显示突变株与野生株比较明显缺失3个蛋白点,经质谱分析后确定这3个点都是EA1蛋白。【结论】成功获得炭疽芽孢杆菌A16R株eag基因缺失突变株,为深入研究eag基因的功能奠定了基础,同时也为炭疽芽孢杆菌重要基因功能的研究建立了一个良好的技术平台。

摘要：对1 432株海洋和极地来源的细菌进行抗南方根结线虫的离体筛选,并对其中活性较好的一株菌进行菌种鉴定并通过盆栽实验验证其在实际生防中的效果.设计诱导系统抗性实验,测定植物防御酶活的变化,初步研究细菌的抗虫机制.结果显示,从1 432株细菌离体筛选得到了9株具有抗南方根结线虫的细菌,其中南极土壤来源的菌株1A00316在离体和活体中均表现出较好的抗性,其生防效果达到71.67%,经鉴定该菌株为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida).诱导番茄系统抗性实验结果显示,经菌株1A00316发酵液处理后的番茄3种防御酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)以及过氧化物酶(POD)的酶活均显著提高,分析数据认为该菌株的菌体可诱导番茄系统抗性.本研究表明恶臭假单胞菌1A00316抗南方根结线虫效果较好,可作为微生物制剂应用于实际生防中;该菌不仅有直接抗虫作用,还存在间接抗虫机制,其多重抗虫机制也具有进一步的研究价值.

摘要：用响应面法对富硒金针菇菌株液体发酵培养基进行优化。在供试的碳、氮源中,以单因子方法筛选出玉米淀粉和豆饼粉作为最适碳源和氮源。采用全因子试验法,对KH2PO4、MgSO4·7H2O、玉米淀粉和豆饼粉等4个影响因素的效应进行评价,确定主要影响因子为玉米淀粉和豆饼粉。再用最陡爬坡实验逼近以上2个因素的最大响应区域,最后采用中心组合设计法及响应面分析法,确定了主要影响因素的最佳浓度为玉米淀粉28.8g/L,豆饼粉14.2g/L。

摘要：旨在预测羊口疮病毒(ORFV)ORF125蛋白结构及其在真核表达质粒转染细胞中的定位。设计引物PCR扩增ORF125基因,并将其定向克隆至pEGFP-N1真核表达载体,经酶切鉴定及序列测定后得到阳性重组表达质粒pEGFP—ORF125。利用DNAStar和MEGA4.0元件分析不同毒株间ORF125基因的遗传进化关系,接着通过在线Expasy工具预测其二级结构并与Bcl-2家族成员进行比较。利用脂质体介导法转染山羊皮肤成纤维细胞(GSFs),经DAPI染色后在激光共聚焦显微镜下观察ORF125的亚细胞定位。结果显示:本次克隆的ORFV ORF125基因与国外公布的其他羊口疮毒株核苷酸水平相似性为97.1%~98.1%,与同属另外2株羊伪牛痘病毒相比,核苷酸相似性分别为84.1%(GQ329669)和85.6%(GQ329670);蛋白二级结构预测分析发现ORF125与Bcl-2家族成员α-螺旋位置相近,预测空间结构有很大的相似性;激光共聚焦显微镜观察发现ORF125在GSFs细胞质中呈弥散性分布。结果提示,羊口疮病毒ORF125基因非常保守,预测与Bcl-2蛋白有着相似的功能,重组质粒pEGFP-ORF125构建成功,ORF125基因在GSFs中得到表达,定位于细胞质中。

摘要：以从水稻根部分离到的1株解淀粉芽孢杆菌WH1为材料,通过红外吸收光谱对其发酵液中的抗菌活性物质进行了鉴定,并通过平板抑制试验和离体叶片防治试验,研究其发酵液对油茶炭疽病的抑制作用。结果表明:WH1发酵液中的抗菌活性物质为脂肽,该成分能够使油茶炭疽病菌丝畸形,高稀释倍数的发酵液对离体油茶叶片上的炭疽病仍然有显著的防效。以WH1作为防治油茶炭疽病的生物农药,通过Plackett-Burman设计和田口设计对WH1的发酵条件进行了优化,使抗菌脂肽产量大幅上升。在3、20、500 L的发酵罐上进行放大,控制溶氧在30%以上,成功的完成250 mL摇瓶到500 L罐的放大。500 L罐上培养48 h后发酵液10倍稀释液在PDA平板上的抑菌率为50.8%,对发酵液进行喷雾干燥后药效存留率为86.2%。