摘要：目的:构建Cyr61靶向siRNA重组表达载体,为探讨抑制Cyr61基因表达对机械通气所致肺损伤的研究奠定基础。方法:根据GenBank数据库提供的Cyr61基因核苷酸序列,选择设计3条能转录siRNA的DNA序列,命名Cyr61-1 siRNA,Cyr61-2 siRNA,Cyr61-3 siRNA,同时设计1条非特异性序列作为阴性对照。据此设计合成各自的寡核苷酸链,退火后连接入pGenesil1.1载体,转化扩增后进行序列测定。4种重组表达载体转染肺癌A549细胞,逆转录RT-PCR和Western blot法分别在mRNA和蛋白水平检测Cyr61的表达。结果:经酶切鉴定和测序结果证实Cyr61靶向siRNA重组表达载体构建成功,它对大肠癌细胞Cyr61 mRNA和蛋白的表达抑制率分别为60.54%和52.97%。结论:Cyr61靶向siRNA重组表达载体构建成功并能显著抑制Cyr61基因的表达。

摘要：目的了解湖北省麻醉护理发展现况,为规范化管理提供参考。方法采用自行设计的调查问卷对湖北省76所二级及以上医院麻醉护士工作及相关现况进行调查。结果 76所医院中27所设置了麻醉护理单元,20所在筹备中;52所设置了麻醉护理岗位,共有麻醉护士264人(三级医院222人,二级医院42人),三级医院麻醉护士学历分布显著优于二级医院(P<0.01);麻醉科护理单元设护士长及护理组长管理12所,手术室护士长代管15所;业务范围包括麻醉苏醒室观察、麻醉前后访视及麻醉中管理等;麻醉护士反映的主要问题为人员过少、机制不完善,继续教育欠缺。结论湖北省麻醉护士达到一定规模,但发展水平不均衡;应特别重视二级医院的麻醉护理建设,明确麻醉护士职责,加强继续教育,提升麻醉护士队伍水平,促进麻醉护理的发展。

摘要：临床研究是医学研究的一个重要组成部分,并在整个医药发展过程中起到关键作用。临床研究按照其目的和设计,常见的主要包括以下几类。(1)干预性研究,这是最为常见的临床研究类型,主要为临床试验,其目的是测试药物、治疗或医疗设备的有效性和安全性。临床试验通常分为4个阶段,从初步的安全性试验到广泛的有效性评估。临床试验也分为几种类型,如交叉设计研究(受试者在不同时点接受不同处理,以比较效果)、转化研究(这类研究旨在将基础科学研究快速转化为临床应用,缩短了基础医学研究和临床实践之间的差距)。

摘要：背景:脑海马作为边缘系统的重要组成部分,参与情绪、感觉活动、学习记忆功能,麻醉状态下对其产生影响。目的:利用异丙酚靶控输注精确控制麻醉深度,观察不同麻醉深度下兔脑海马不同区域c-fos基因的表达水平,了解异丙酚发挥中枢抑制的作用位点。设计:随机对照观察。单位:深圳市第二人民医院麻醉科,华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科。材料:实验于2000-05/2001-06在华中科技大学同济医学院神经生物学实验室完成。选取日本大耳兔30只,随机分为空白对照组、浅麻醉组、深麻醉组,10只/组。方法:全部动物行颈外静脉、股动脉穿刺置管。以相应靶控血药浓度进行靶浓度控制输注,严格控制各组麻醉深度。浅麻醉组给予异丙酚靶控血药浓度为(9.28±0.12)m g/L,深麻醉组给予异丙酚靶控血药浓度为(11.63±0.29)m g/L,达到所需麻醉状态30m in 后两组动物断头处死,空白对照组行耳缘静脉注射空气造成空气栓塞后处死。各组常规进行连续冠状切片,片厚7μm ,每隔100μm 取1张,进行原位杂交检测脑海马CA1区、CA3区和齿状回区的c-fos m RNA 表达水平。每只兔随机取5张切片,光镜下分别选取各区15～20个视野进行拍摄,计算平均吸光度与平均灰度值。灰度分为256个等级,阳性率越高,灰度值越低。主要观察指标:①不同麻醉深度下兔脑海马CA1区及齿状回区原位杂交检测结果。②不同麻醉深度下兔脑海马CA1区、CA3区和齿状回区的平均灰度值。结果:30只兔全部进入结果分析。①不同麻醉深度下兔脑海马CA1区原位杂交检测结果:空白对照组可见深浅不一、疏密不等的c-fos阳性细胞,染色呈棕色,分布稀疏;浅麻醉组可见中等着色的c-fos阳性神经元,分布密集;深麻醉组锥体细胞胞浆染色明显加深,分布也更密集。②不同麻醉深度下兔脑海马齿状回区原位杂交检测结果:浅麻醉组阳性细胞染色呈深棕褐色,染色强烈,细胞核无色透明,呈空泡状;深麻醉组出现大量密集的c-fos阳性表达。③不同麻醉深度下兔脑海马各区的平均灰度值:与空白对照组CA1区及齿状回区比较,浅麻醉组和深麻醉组均明显降低犤(168±5),(80±7),(59±5)%,P 均<0.05;(163±8),(103±15),(67±6)%,P <0.05,P <0.01犦,并且深麻醉组均比浅麻醉组下降显著(P <0.01);各组CA3区基本相似。结论:①异丙酚麻醉随深度的增加,其兔脑海马c-fos基因表达升高。②麻醉后兔脑海马CA1区及齿状回区的平均灰度值明显下降,深麻醉时更为显著,但CA3区无明显变化。提示异丙酚的中枢抑制作用部位存在区域性差异,由此推断脑海马CA3区可能不是异丙酚中枢作用的位点。

摘要：目的探讨aneSIM虚拟现实教学系统在麻醉专业临床危机思维培训中的应用效果。方法选取2020年在华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科规范化培训的住院医师40名进行临床危机思维培训,以数字表法随机分为对照组和观察组,各20名。对照组采用理论授课+以问题为中心的病例讨论的教学方法;观察组采用aneSIM虚拟现实教学系统进行教学。比较2组培训前后的理论及技能考试成绩,同时对2组医生进行问卷调查进行教学设计和效果评价。结果观察组培训后理论及技能成绩均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);同时观察组的住培医师认为所接受的教学方法更新颖,具有创新性,更有助于提高麻醉临床危机思维能力。结论aneSIM虚拟现实教学系统有助于提高麻醉专业临床危机思维能力,该系统为麻醉临床危机管理培训提供了新的教学方法。

摘要：目的观察不同浓度胰岛素对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)形态和细胞活性的影响,用以筛选内皮细胞胰岛素抵抗模型。方法应用含不同浓度胰岛素(50,40,30,20,10,1,0.1,0.01U/L)的DMEM培养基与HUVEC共同培养6、12、24、36、48、72h;观察细胞形态学变化;四甲基偶氮唑盐比色法(tet-razolium colormetric assay,MTT)测定细胞活性。结果①细胞形态学变化:当胰岛素浓度小于10U/L,HUVEC生长加速;当胰岛素浓度为30U/L时,HUVEC出现核固缩;当胰岛素浓度达到50U/L时,HUVEC出现核碎裂和核溶解。②MTT法测定细胞活性:与0.01U/L组比较,当胰岛素浓度为50U/L时,细胞活性显著下降(P0.05)。当作用时间超过36h,残留细胞数明显下降,细胞活性显著降低(P<0.01)。③析因设计资料的方差分析结果:不同胰岛素剂量组间差异有统计学意义(P<0.01);不同用药时间(胰岛素作用时间)组间差异有统计学意义(P<0.01);胰岛素剂量和用药时间之间交互效应有统计学意义(P<0.01);模型拟合效果理想,R2=0.928。交互效应轮廓图也提示胰岛素给药剂量和作用时间存在交互效应。结论胰岛素对人脐静脉内皮细胞的生长发育具有双向调控作用,胰岛素浓度30U/L、作用时间48h的有可能成为血管内皮细胞胰岛素抵抗的细胞模型。

摘要：改良的无隆突钩Carlen氏双腔气管导管克服了传统Carlen氏双腔气管导管进入声门的困难,但左侧支气管导管往往不易一次定位于左侧,无疑引起的气道损伤机会增多.我科设计了一种简便易行的牵引法,提高了一次定位于左侧支气管成功率.