摘要：目的构建细胞周期性激酶抑制剂p27Kip1的小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达质粒,并观察其对牛角膜内皮细胞增殖能力的影响。方法设计有发夹状结构的3条p27Kip1-shRNA对应模板DNA序列,并构建无关序列HK-shRNA作为阴性对照。转入带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的pGenSil-1质粒,构建重组质粒pGenSil-1/p27Kip1-1、pGenSil-1/p27Kip1-2、pGenSil-1/p27Kip1-3、pGenSil-1/HK。转化DH5α菌株,提取质粒行酶切及测序鉴定。以脂质体法将4个重组质粒分别导入牛角膜内皮细胞。转染后48h以Western blot法检测p27Kip1蛋白水平及MTT法检测各实验组和对照组细胞增殖情况。结果酶切及测序证实4个重组质粒均构建成功。3个实验组p27Kip1蛋白水平分别下降了66.41%、61.51%、71.32%,shRNA可显著促进牛角膜内皮细胞增殖。结论成功构建了针对p27Kip1的RNA干扰表达载体。

摘要：背景:研究表明,吲哚胺2,3二氧化酶的表达可以降低机体的免疫应答反应,保护细胞和组织移植物,参与同种异体移植免疫耐受。细胞毒T细胞相关抗原4可以抑制T细胞的活化,在维持周边免疫耐受的过程中起着关键性的作用,但其作用机制尚不清楚。目的:观察转染细胞毒T细胞相关抗原4基因前后树突状细胞上吲哚胺2,3二氧化酶表达水平及其活性对T淋巴细胞增殖的影响。设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,于2005-09/2007-02在华中科技大学同济医学院附属协和医院普外科实验室和眼科实验室完成。材料:成年雌性Lewis大鼠和F344大鼠购自北京维通利华实验动物种子中心,体质量180～200g。方法:采用脂质体转染的方法将质粒pG/细胞毒T细胞相关抗原4转入F344大鼠髓源性树突状细胞中,将转染前、转然后24,48,72h树突状细胞分为4组,反转录-聚合酶链反应检测转染前后骨髓源树突状细胞中吲哚胺2,3二氧化酶mRNA的表达,反相高效液相色谱法检测吲哚胺2,3二氧化酶活性。以Lewis大鼠T淋巴细胞为反应细胞,丝裂霉素C灭活的转染前后不同时间F344大鼠骨髓源树突状细胞为刺激细胞建立混合淋巴细胞培养体系。有或无L-色氨酸存在下,CCK8试剂盒检测T淋巴细胞增殖率,AnnexinV/PI双染色流式细胞仪检测T淋巴细胞凋亡。主要观察指标:①树突状细胞吲哚胺2,3二氧化酶mRNA的表达及吲哚胺2,3二氧化酶活性。②混合淋巴细胞培养CCK8及AnnexinV-FITC细胞凋亡检测结果。结果:转染细胞毒T细胞相关抗原4后树突状细胞中吲哚胺2,3二氧化酶的表达较转染前高(P<0.01),且转染后48h树突状细胞的吲哚胺2,3二氧化酶活性最高(P<0.01)。高表达吲哚胺2,3二氧化酶的树突状细胞在体外能诱导同种异体T细胞凋亡,抑制T细胞增殖,混合淋巴细胞培养体系中加入L-色氨酸后T淋巴细胞的凋亡率明显下降(P<0.01)。结论:树突状细胞上的吲哚胺2,3二氧化酶表达水平与T淋巴细胞的增殖密切相关,树突状细胞在体外可能通过吲哚胺2,3二氧化酶活性发挥免疫抑制作用。

摘要：目的:观察异形羟基磷灰石义眼台植入术并发症及手术效果,探讨异形义眼台的适应证及其临床应用价值。方法:设计不同体积的异形羟基磷灰石义眼台,治疗眼球萎缩、眼内容物摘除及眼球摘除术后患者共30例。对照组植入常规圆球形羟基磷灰石义眼台共30例。异形义眼台组与对照组间性别、年龄、眼部情况相似。手术后随访时间6mo以上,观察患者义眼台植入术后球结膜愈合时间、义眼台暴露、感染等并发症、义眼台活动度、位置以及与义眼片适合程度的差异。结果:异形羟基磷灰石义眼台组没有发生义眼台暴露、感染等严重并发症,球结膜愈合时间短,义眼台植入后前表面呈圆弧形,能与义眼片很好的吻合,义眼台活动度及位置均好于对照组。对照组有2例(7%)发生早期球结膜裂开的并发症,经过治疗后均愈合。结论:异形义眼台可以降低义眼台植入后引起的并发症,可以有效适应患者眼部病变的情况,获得良好的手术效果,适应证更广,安全性更好。

摘要：目的提高眼科病区住院患者护理服务满意度。方法将530例眼科住院患者按时间段分为对照组和观察组各265例;两组均遵医嘱行常规护理,对照组行常规沟通,观察组根据自行设计的眼科护理人文关怀沟通记录表进行沟通。结果观察组对护士关怀护理服务的满意度显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论按照护理人文关怀沟通记录表要求进行护患沟通,可提高患者对护士关怀护理服务的满意度。

摘要：目的观察无灌注前段玻璃体切割术处理超声乳化手术中出现晶状体不全脱位的效果及安全性。设计回顾性病例系列。研究对象20例（20眼）超声乳化手术中出现晶状体不全脱位患者。方法手术中应用黏弹剂注入晶状体下的玻璃体腔内及晶状体核裂缝内,用无灌注20 G玻璃体切割头从透明角膜主切口进入,在囊袋内切割、抽吸晶状体核、皮质及脱入前房的玻璃体;其间在晶状体下及囊袋内补充黏弹剂,直至完全清除晶状体核、皮质及脱出的玻璃体。17眼脱位范围超过2个象限,行折叠三片式后房型人工晶状体（PC-IOL）双襻睫状沟固定术;3眼脱位范围在2个象限以内,行囊袋张力环植入并后房型人工晶状体（CTR＋PC-IOL）植入。主要指标眼压,视力,并发症。结果 20例患者术中未出现核下坠、眼内明显出血等严重并发症,均植入PC-IOL。术后第1天7例患者眼压升高,应用降眼压药物治疗后恢复正常。术后1个月患者视力较术前提高2~8行,10例（50%）患者视力≥0.5。结论无灌注前段玻璃体切割术可较好地处理超声乳化手术中出现的晶状体不全脱位,为术中处理此类并发症提供了一个新的选择。

摘要：目的观察磷酸肌酸钠治疗Leber遗传性视神经病变(LHON)的有效性。设计回顾性病例系列。研究对象2014年1月至2016年1月武汉同济医院眼科确诊的LHON患者19例。根据患者是否同意住院治疗分为两组,10例住院者为治疗组,9例门诊观察未做治疗者为对照组。方法对治疗组的10例LHON患者进行磷酸肌酸钠治疗,每日2次,每次1 g,加入250 ml生理盐水中静脉滴注,共7天。观察患者治疗前后的视力、视野变化。对照组的9例患者未治疗。19例患者随访观察1年。主要指标视力、视野。结果与治疗前视力相比,治疗7天后,治疗组患者中3例患者(1号右眼,6号右眼,7号左眼)视力提高,分别提高0.3 LogMAR、0.4 LogMAR、0.7 LogMAR。随访1年后,1号右眼视力下降,6号和7号视力无变化。3例患者中14484位点突变的有2例(6号和7号),11778位点突变的有1例(1号);另外7例视力无显著改变。10例患者的视野(VFI和MD)治疗前后无显著差异(P=0.167,0.20)。未经治疗的9例患者随访观察1年,视力无变化。结论磷酸肌酸钠治疗Leber遗传性视神经病变或许对14484位点突变患者的视力提高或稳定有一定的疗效。

摘要：目的探讨预防及减轻青光眼滤过术后并发症的有效加压包扎固定方式。方法将100例青光眼滤过术后患者随机分为对照组和观察组各50例。对照组创面采用传统单眼手术后绷带加压包扎,观察组创面采用自行设计的单眼加压包扎带加压包扎固定。结果观察组术后渗液程度、疼痛程度、水肿程度、舒适程度优于对照组(均P<0.01)。结论使用自行设计的医用单眼加压包扎带加压包扎固定方式能均匀施压,患者舒适,并能有效减少青光眼滤过术后并发症的发生。

摘要：目的:探讨用短发夹RNA表达质粒抑制人U937细胞的蛋白激酶C-ζ(PKC-ζ)表达后,对基质细胞来源的因子-1刺激的U937细胞VEGFmRNA表达的影响。方法:设计合成一对针对人PKC-ζ的mRNA的寡核苷酸序列,退火后将其连入载体。对重组质粒pSIRENp进行酶切鉴定。用脂质体介导的方法分别将质粒pSI-RENp和对照质粒转染U937细胞,用RT-PCR检测PKC-ζ和U937细胞VEGFmRNA。结果:酶切证实目的寡核苷酸片段已经被克隆到pSIRENp,转染后几乎完全抑制U937细胞的PKC-ζ表达;VEGF mRNA表达在SDF-1作用前后均明显低于对照。结论:shRNA方法可成功抑制U937细胞的PKC-ζ表达。PKC-ζ可能参与调节U937细胞VEGF的表达。

摘要：目的基于CDIO模式设计护理创新培训内容,探讨其对护士创新能力培训的效果。方法组建研究团队,在开展创新培训内容需求调查和文献检索的基础上,借鉴CDIO教育模式的教学目标与大纲,构建护理创新培训内容,并在创新导师的带领下开展理论和实践教学,对133名护理创新团队护士进行培训。培训前及结束后6个月,对创新团队队员进行创新行为调查。结果培训结束后6个月护理创新团队队员的创新行为程度及得分显著优于培训前(P<0.05,P<0.01)。结论基于CDIO理念的护理创新培训内容的设计,打破了传统的在职培训内容和教学模式,促进了创新思维的产生,通过护理创新内容的学习,护士的创新能力得到提高。

摘要：目的探讨先天性白障后囊膜的特征,总结各种后囊膜的处理方式。设计回顾性病例系列。研究对象广州市妇女儿童医疗中心眼科2012年2月至2014年6月治疗的先天性白内障患儿70例(118眼)。方法回顾患者的病例资料,结合手术录像视频对先天性白内障后囊膜术中可见情况及处理方式进行回顾性分析。主要指标后囊膜的形态、颜色、性状等特征,后囊膜的处理方式及术后并发症。结果 118眼中91眼(77.11%)后囊膜透明,27眼(22.88%)后囊膜异常。其中12眼(10.17%)后囊膜中央混浊、2眼(1.69%)后囊膜后突菲薄、2眼(1.69%)后囊膜中央缺损、2眼(1.69%)后囊膜混浊并血管伴行、9眼(7.63%)后囊膜与前囊膜相贴。后囊膜的处理需单独或联合运用电子撕囊仪、前部玻璃体切割头及撕囊镊等。56眼植入IOL,均未发生夹持,4眼IOL偏位。15眼(12.71%)出现后囊膜混浊,需要二次手术。结论先天性白内障后囊膜异常约占五分之一,其中以中央部混浊较常见。对异常后囊膜的处理需要联合使用电子撕囊及玻璃体切除等各类操作技术。