摘要：目的观察骨架调节蛋白CIP4（Cdc42 interacting protein 4）对转化生长因子β1（TGF—β1）诱导的人肾小管上皮细胞-间充质转分化（EMT）的影响，并探讨其产生的机制。方法10μg／L TGF—β1刺激72h诱导人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）向间充质转分化。Western印迹法检测各组细胞内E—cadherin和α-SMA蛋白的表达。倒置显微镜观察细胞形态的变化。根据GenBank人CIP4的完全cDNA序列，设计1条特异性干扰CIP4表达的RNA片段（CIP4-siRNA）和含野生型CIP4的重组真核表达质粒（pcDNA3．1-hCIP4），利用lipofactamine2000将其转染HK-2细胞。Western印迹法检测对照组、TGF—B1刺激组、CIP4-siRNA转染组、pcDNA3．1-CIP4转染组细胞内CIP4、E—cadhefin和α-SMA蛋白的表达，共聚焦显微镜观察E—cadhefin和仪．SMA蛋白的分布改变；用P13K—Akt特异性抑制剂渥曼青霉素（wortmannin）1panol／L干预TGF—β1刺激的HK-2细胞48h，Western印迹法检测对照组和干预组CIP4表达的变化。结果TGF一[31干预后HK一2细胞E—cadhefin蛋白表达显著减少（P〈0．05），α—SMA蛋白表达显著增多（P〈0．05），细胞形态由典型的上皮细胞向肌成纤维细胞转变，表明TGF-β1诱导。肾小管上皮细胞EMT模型成功。CIP4-siRNA抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞表达CIP4后，E—cadhenn蛋白表达显著增多（P〈0．05），α—SMA蛋白表达显著减少（P〈0．05），部分逆转了上述TGF—β1诱导的肾小管上皮细胞EMT。pcDNA3．1-hCIP4转染使CIP4高表达后，HK-2细胞E—cadhefin蛋白表达显著减少（P〈0．05），α-SMA蛋白表达显著增多（P〈0．05），诱导了肾小管上皮细胞EMT。用渥曼青霉素干预TGF—β1刺激的HK-2细胞48h，CIP4可能蛋白表达显著减少（P〈0．05）。结论TGF—β1通过P13K—Akt途径上调CIP4表达，CIP4可能进一步参与TGF—β1诱导的肾小管上皮细胞EMT过程。

摘要：背景:P27是近年来在肾脏疾病研究中受到广泛关注的一种细胞周期激酶抑制剂,它通过影响细胞周期这一细胞生命活动的基本过程来调节细胞的生长。已证实p27蛋白对肾脏细胞增殖、肥大、分化、凋亡等多种生长反应均具有重要的调控作用。目的:探讨肾组织p27蛋白的表达与糖尿病肾病细胞增殖、凋亡之间的相互关系。设计:完全随机分组设计,对照动物实验。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院肾病实验室。材料:实验于2004-09/2005-01在华中科技大学同济医学院附属同济医院内科肾病实验室及同济医学院超微病理中心完成。选用清洁级成年雄性SD大鼠48只,随机将大鼠分为2组:实验组和对照组,每组24只。方法:①建立糖尿病模型:实验组按60mg/kg剂量腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型。48h后,测定血糖和尿糖。将实验组随机血糖≥16.7mmol/L且尿糖为誔～誒誒者视为模型成功。②模型成功后第3熏7熏14熏28天分别处死实验组和对照组动物各6只。处死前测定血肌酐、尿肌酐,计算内生肌酐清除率;用ELISA法测定尿视黄醇结合蛋白;作十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分析尿蛋白。③肾组织切片,光镜下观察病理学改变。部分皮质作超微结构检查。④用免疫组化染色法检测肾组织切片p27及增殖细胞核抗原蛋白的表达;原位末端标记法检测细胞凋亡。分别用肾小球p27、增殖细胞核抗原、原位末端标记法阳性细胞数/肾小球细胞总数表示肾小球p27、增殖细胞核抗原表达的阳性率及凋亡率。⑤组间差异用未配对资料t检验,数据间相关性处理采用Spearman相关分析。主要观察指标:实验组大鼠造模后第3,7,14,28天肾功能,尿蛋白,肾小球细胞p27,增殖细胞核抗原表达阳性率和凋亡率与对照组比较结果。结果:大鼠48只均进入结果分析。①病理学改变:造模后第7天,光镜下开始出现肾小球直径增大,电镜下开始出现脏层上皮细胞足突融合;第14天时电镜下出现肾小球系膜区轻度节段性增宽;第28天时光镜下始见肾小球系膜区轻度节段性增宽。②实验组造模后第7,14,28天内生肌酐清除率及尿视黄醇结合蛋白水平明显高于对照组(t=2.143～3.004熏P<0.05)。尿圆盘电泳提示,从第3天起,每组均有部分标本出现中、低分子蛋白。③实验组造模后第3天大鼠肾小球细胞p27蛋白的表达阳性率明显低于对照组(t=2.536熏P<0.05),第7,14,28天表达阳性率依次增加,明显高于对照组(t=2.704～2.823熏P<0.05)。实验组造模后第3天大鼠肾小球增殖细胞核抗原的表达阳性率最高,第7,14天表达依次减少,但仍明显高于对照组(t=2.681熏2.525熏P<0.05),造模后第28天与对照组比较,差异不明显。造模后第3天大鼠肾小球细胞凋亡率明显高于对照组(t=2.764熏P<0.05),第7,14,28天大鼠肾小球细胞凋亡率均明显低于对照组(t=2.096～2.627熏P<0.05)。④肾小球p27蛋白表达阳性率与肾小球增殖细胞核抗原表达阳性率呈显著负相关(r=-0.446熏P<0.05),与凋亡率呈显著负相关(r=-0.517熏P<0.05)。结论:糖尿病早期肾近曲小管损害引起的重吸收功能障碍和肾小球的高滤过基本同步发生。p27蛋白在糖尿病早期可能通过抑制肾脏细胞增殖和凋亡而参与糖尿病肾病的发生、发展。

摘要：目的构建针对NG2基因的小发夹结构RNA（shRNA）真核表达载体，观察该shRNA诱导的RNA干扰（RNAi）对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞（RMC）增殖的影响。方法体外培养RMC，高糖（30mmol／L）刺激24h，观察NG2基因表达的变化。设计两条针对NG2mRNA不同靶序列的干扰序列，构建针对NG2基因的shRNA表达载体Pgenesil—siNG21和Pgenesil-siNG22；选择不与任何基因同源的序列NC作为阴性对照。运用脂质体将3种质粒分别转染RMC，24h后荧光倒置显微镜观察转染效率，即增强绿色荧光蛋白（EGFP）表达率，荧光定量PCR法和Western印迹法观察NG2的干扰效率。以高糖刺激转染的RMC，用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTY）和流式细胞仪（FCM）检测RMC增殖的变化。结果与低糖和甘露醇对照组比较，高糖刺激RMC后NG2表达水平明显升高，分别增高（65±32）％和（63±28）％，差异有统计学意义（P〈0．01）。质粒转染RMC24h后，EGFP的表达率为（50±10）％。高糖刺激后，干扰质粒转染组RMC增殖缓慢，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论针对NG2基因的shRNA对高糖诱导的RMC增殖有明显的抑制作用。

摘要：目的:研究RNA干扰法对人近端肾小管上皮细胞(HKC)中Toll样受体4(TLR4)表达的抑制作用。方法:将针对TLR4分子设计的采用体外转录生物合成的特异性短发卡RNA(shRNA)双链分子用脂质体转染的方法导入体外培养的HKC;应用免疫荧光染色在共聚焦显微镜下观察TLR4的分布及表达强弱;半定量RT-PCR和免疫蛋白印迹检测TLR4及内参照-βactin在mRNA水平和蛋白水平的表达量。结果:干扰组TLR4的荧光强度显著低于对照组,其mRNA和蛋白的表达量分别下降了67%和62%。同时观察到TLR4主要分布于HKC细胞的胞膜及胞质区。结论:采用生物体外转录的方法成功合成针对TLR4的shRNA双链分子,并有效地转入HKC细胞中使TLR4的表达下调。

摘要：目的对腹膜透析管进行保护设计,解决腹膜透析导管在临床使用过程中的打折破损问题。方法选择2016年1月至2017年12月在华中科技大学同济医学院附属同济医院肾病内科新开管行腹膜透析治疗的终末期肾病患者94例为研究对象。按开管的时间排序,将序数为单数的接受治疗的47例患者设为对照组,将序数为双数的接受治疗的47例患者设为观察组。对照组采用传统的腹膜透析管进行护理;观察组采用防折损腹膜透析管进行护理。观察比较2组腹膜透析患者透析期间的透析导管松脱及破损的发生情况及患者对其所使用腹膜透析管的总满意度。结果观察组患者的导管折痕变形0例,明显低于对照组的12例,差异有统计学意义(χ2=13.610,P0.05)。结论经过改进的防折损腹膜透析管给予长期腹膜透析患者的护理更简便、安全、有效,它能减少腹膜透析导管相关性腹膜炎的发生率,值得临床推广应用。

摘要：目的了解综合医院住院患者的整体康复护理需求,为综合医院制订康复护理计划提供参考和依据。方法采用方便抽样的方法,运用自行设计的“综合医院住院患者康复护理需求调查表”对武汉市某三甲综合医院的住院患者进行调查,并进行统计分析。结果共发放问卷280份,有效问卷264(94.29%)份。综合医院住院患者整体康复护理需求的得分为(54.45±14.22)分,需求程度处于中等水平。年龄、文化程度、居住地是住院患者整体康复护理需求的影响因素(P<0.05)。结论综合医院住院患者整体康复护理需求程度处于中等水平,应该更加关注高龄、文化程度低和住在偏远地区的住院患者的整体康复护理需求。

摘要：针对静态词向量模型语义表示质量不高,深度学习模型无法聚焦关键特征等问题,提出了基于ChineseBERT-BiSRU-AT的医疗文本分类模型。预训练模型ChineseBERT融入字形和拼音特征,通过参考词的具体上下文语境,学习到词的动态语义表示。BiSRU模块提取文本高维序列特征,软注意力机制赋予关键词更高权重。在影像报告文本数据集进行实验,结果表明Chinese-BiSRU-AT模型取得了最高的F1分数,BiSRU模块训练效率更优,ChineseBERT模型应用效果更佳。

摘要：目的调查分析临床医学专业高年级本科生对科研的需求、参与科研的情况和实际的科研能力,并提出相应解决对策。方法随机抽取武汉某高校临床医学五年制专业完成基础阶段学习的100名学生为研究对象,发放调查问卷并回收统计。结果有82名学生(82.00%)希望在本科阶段参与科研,33名(33.00%)参与过学校安排的科研活动,其中28名学生(84.85%)不满意科研安排,本科生课题设计、查找文献、统计分析、撰写论文等方面的能力都较差。结论临床医学专业本科生科研热情较高,但缺乏参与科研的平台,科研能力普遍较差,可尝试"本科生导师制",提高学生科研兴趣,帮助高年级本科生建立科研思维,培养创新能力。

摘要：设计制作医疗废物分类标志和封袋标志,应用于不同区域的医疗废物暂存地。在标志使用前,医疗废物分类和废物封袋的合格率及员工操作合格率分别是44.85%、13.80%及60.80%,使用后分别提高到72.10%、93.40%及85.80%,差异有统计学意义(P<0.05),显著提高了医疗废物分类和废物封袋的合格率及员工操作合格率,将安全提升到最优先地位。

摘要：目的　探讨肾病综合征患者对激素药物的疗效、副作用、注意事项的认知情况。方法　采用自行设计的问卷对 12 6例肾病综合征且正在使用糖皮质激素治疗的患者进行激素相关知识认知情况调查。结果　不同年龄、不同文化程度的患者在激素的治疗作用、副作用、注意事项三方面认知程度高低不一 ,31～ 4 5岁年龄段、小学及以下文化程度的患者为认知的弱势人群。结论　医护人员应采取多种形式进行针对性、全面性、渗透性的健康教育 ,以减少、减轻激素药物的副作用 ,提高治疗质量。