摘要：目的:设计构建重组体为转染肿瘤细胞,观察癌基因的沉默效果,为探索肿瘤基因治疗的新途径打好基础。方法:以c-myc为靶基因,以pEGFP-C1/U6质粒为载体,设计构建重组体,根据c-myc癌基因cDNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pEGFP-C1/U6中,转化DH5а菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析。结果:经酶切鉴定筛出的重组体测序结果与目的序列相同,重组载体构建成功。结论:利用RNAi技术可成功构建小干扰RNA重组体。

摘要：目的探讨循证护理干预方案在ICU压疮预防中的作用。方法将227例Braden评分≤12分的压疮高危患者按照入院的顺序分为对照组102例和观察组125例。对照组采用常规护理方法。观察组进行循证护理干预，予每2h翻身1次，左右30°侧卧位交替进行；平卧位时抬高患者床头不超过30°，足跟处垫软枕；对Braden评分〈7分、颈椎骨折及病情限制翻身的患者必须使用气垫床；在受压皮肤处及可能发生压疮的皮肤区域喷赛肤润；在皮肤受压部位应用康惠尔透明贴；根据患者营养状况给予肠内外营养；保持肛周皮肤干燥。比较2组的压疮发生情况。结果观察组的压疮发生率明显低于对照组，发生时间延迟，压疮严重程度轻。结论在ICU压疮高危患者中应用循证护理干预方案，能体现护理工作的科学性和艺术性，更有效地分配有限的护理资源，减少压疮的发生。

摘要：目的探讨游离股前外侧KISS皮瓣修复头皮缺损的方法及效果。方法2016年3月至2017年6月，对11例头皮恶性肿瘤患者行肿物扩大切除，根据术前穿支探测结果在大腿外侧设计2个梭形皮瓣，术中解剖为共血管蒂或不共血管蒂的形式，以KISS方式对合后覆盖创面。结果11例患者皮瓣均完全成活，供区未出现并发症，术后头部形态满意。结论股前外侧KISS皮瓣具有供区损伤小，修复效率高，皮瓣血供可靠的优点，在修复头皮缺损中有一定的临床应用推广价值。

摘要：目的　研究siRNA对肝癌细胞株HepG2中Survivin基因表达的抑制作用。方法　设计、合成一对Survivin编码基因的反向重复序列 ,中间间隔 9个核苷酸序列 ,通过定向克隆至载体Psilencer2 1,构建siRNA真核表达载体 ,经稳定转染HepG2细胞后应用RT PCR及流式细胞术检测肝癌细胞中Survivin基因mRNA及蛋白质表达的抑制情况。结果　测序证实siRNA真核表达载体构建成功。通过RT PCR及流式细胞术检测 ,siRNA在mRNA及蛋白质水平抑制Sur vivin基因表达分别达 73%和 75 %。结论　构建的Psilencer (+) Survivin重组质粒能有效抑制Survivin基因在肝癌细胞株HepG2中的表达。为肿瘤的生物学治疗提供了新的方法和材料。

摘要：目的制备纳米级磁性多柔比星脂质体(DOX-MLP)。方法用反相蒸发法制备纳米级DOX-MLP,以正交实验设计确定最佳制备工艺。电镜观察脂质体形态,zetapal粒度分析仪测量其粒径,紫外sephadex G-50法测定其包封率,磁测仪测量其磁响应性。结果DOX-MLP呈圆形或椭圆形,粒径为(293.4±20.6)nm,包封率为30.8%±3.27%,磁响应性(50.28±7.8)emu。结论用反相蒸发法制备的磁性多柔比星脂质体平均粒径小,磁响应性高,达到纳米级标准。

摘要：目的　探讨核酶 (RZ)在细胞水平调节雄激素受体 (AR)基因表达的作用。方法　设计并合成针对AR的锤头状核酶序列 ,分子克隆技术构建活性核酶和无活性核酶表达载体 ,脂质体介导下转染雄激素受体表达阳性细胞株T47D。转染第 1～ 3天 ,应用免疫组织化学和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测细胞内AR基因表达水平。结果　AR活性核酶表达载体转染后 ,T47D细胞ARmRNA水平降低 2 2 .4%～ 50 .7% (P 0 .0 5)。结论　成功构建AR锤头状核酶表达载体 ,能特异性切割ARmRNA 。

摘要：目的:调查呼吸科护士对雾化吸入治疗知信行现状及其影响因素,为构建雾化吸入的规范化使用策略提供参考。方法:采用自行设计的呼吸科护士雾化吸入治疗知信行调查问卷对便利选取的湖北省654名呼吸科护士进行调查。结果:湖北省呼吸科护士知识、信念及行为维度得分分别为(50.19±9.73)分、(22.43±3.26)分、(46.28±7.26)分;Logistic回归分析显示,年龄、医院等级和是否接受过规范化培训是呼吸科护士雾化吸入治疗知信行得分的影响因素(P<0.05)。结论:呼吸科护士对于雾化吸入治疗的态度积极,但知识相对缺乏,行为指导尚不规范,护理管理者应根据年龄和医院等级完善培训体系,提升雾化吸入的护理质量。

摘要：白血病细胞表面可高表达FasL ,诱导表达Fas的T细胞凋亡 ,从而降低其抗白血病的作用 .以高表达Fas的小鼠淋巴瘤细胞系Yac 1作为模型 ,设计并合成了针对FasmRNA 5 96位点的锤头状核酶基因 ,用T7/SP6体外转录系统检测了该核酶对FasmRNA的体外切割效率 ,通过电穿孔转染法将其导入Yac 1细胞 ,通过RT PCR、Western印迹法检测细胞上Fas的表达 .细胞经抗Fas的抗体作用后 ,通过MTT法测细胞的增殖 ,annexin Ⅴ凋亡检测试剂盒测细胞凋亡 .该核酶体外切割活性达6 0 % ,且能有效降低细胞表面Fas的表达 ;细胞经抗Fas的抗体作用后 ,转染核酶的细胞增殖活性较对照增高 ,而凋亡率明显降低 .结果表明 ,构建的切割FasmRNA核酶在体内外均具备良好的切割FasmRNA的活性 ,使细胞免于Fas途径的凋亡 ,为研究抑制T细胞的凋亡从而增强其抗白血病效应提供实验基础 .

摘要：目的探讨纳米级磁性阿霉素脂质体的制备及其体外细胞毒性。方法用反相蒸发法制备纳米级磁性阿霉素脂质体,以正交实验设计确定最佳制备工艺;电镜观察其形态,Zetapal无机粒度分析仪测量其粒径分布,利用紫外-Sephadex G-50法测定其包封率,利用磁测仪测量其磁响应性。用比色法分析其对人胃癌细胞的体外细胞毒作用。结果磁性阿霉素脂质体在电镜下为圆形或椭圆形,平均粒径为(293.4±20.6)nm,包封率为(30.8±3.3)%,磁响应性50.28emu,其体外抑制肿瘤细胞生长的能力与阿霉素无显著差异。结论用反相蒸发法制备的磁性阿霉素脂质体平均粒径小,达到纳米级,磁响应性高,抑瘤效果好。

摘要：目的评价2种固定剂量的瑞格列奈盐酸二甲双胍复方片人体药代动力学特征。方法用两制剂、双周期、自身对照交叉试验设计,12名健康受试者分别单次口服瑞格列奈盐酸二甲双胍复方片1 mg/500 mg和2 mg/500 mg,用HPLC-MS/MS法同时测定瑞格列奈和二甲双胍的血药浓度,DAS 3.0软件计算其药代动力学参数。结果口服瑞格列奈盐酸二甲双胍复方片1mg/500 mg和2 mg/500 mg,主要药代动力学参数如下。瑞格列奈:Cmax分别为(18.71±5.26),(29.50±9.57)μg·L-1;tmax分别为(0.06±0.20),(0.83±0.39)h;t1/2分别为(0.98±0.29),(1.11±0.38)h;AUC0-∞分别为(25.60±9.97),(56.90±20.31)μg·L-1·h。二甲双胍:Cmax分别为(1241.00±186.32),(1167.00±197.77)μg·L-1;tmax分别为(1.88±0.80),(1.88±0.64)h;t1/2分别为(4.03±1.05),(4.31±0.86)h;AUC0-∞分别为(8089.20±1703.92),(7407.32±1653.25)μg·L-1·h。瑞格列奈和二甲双胍的血药浓度-时间曲线符合二室模型。在试验过程中未发生与瑞格列奈和二甲双胍相关的不良反应。结论瑞格列奈的Cmax和AUC显示良好的剂量相关性,2种规格复方片中二甲双胍药代动力学参数基本一致。