摘要：目的检测抗凋亡因子 XIAP 与 PED/PEA-15在前列腺癌细胞(PC-3)中的表达,探讨二者对前列腺癌细胞凋亡的影响。方法应用半定量 RT-PCR 法检测前列腺癌细胞(PC-3)中PED/PEA-15和 XIAP 的表达。设计并构建 PED/PEA-15和 XIAP 特异的 siRNA 载体,以脂质体法转染二者的 siRNA 载体至前列腺癌细胞(PC-3)中,半定量 RT-PCR 法检测特异 siRNA 载体对PED/PEA-15和 XIAP 转录的影响:光镜观察细胞形态改变;流式细胞法检测细胞凋亡的变化。结果半定量 RT-PCR 显示 PED/PEA-15和 XIAP 均在前列腺癌细胞(PC-3)中高表达。酶切和 DNA测序证实 XIAP 和 PED/PEA-15 siRNA 载体构建成功。共转染 XIAP 和 PED/PEA-15 siRNA 载体人 PC-3细胞,可导致 XIAP 和 PED/PEA-15的转录抑制,并增加 PC-3细胞对阿霉素的敏感性,凋亡明显增加,处理组凋亡率为79%,对照组为46%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PED/PEA-15和 XIAP 在前列腺癌的凋亡中可起重要作用。

摘要：目的　探讨反义技术阻断雄激素受体 (AR)基因表达对前列腺癌细胞生长的影响。　方法　设计、合成针对AR基因反义寡核苷酸 (ASODN) ,在脂质体介导下转染前列腺癌细胞。采用RT PCR方法检测AR基因表达 ;MTT比色法检测细胞增殖活性 ;透射电镜、TUNEL检测细胞凋亡 ;流式细胞术分析细胞周期时相。　结果　 0 .5～ 2 .0 μmol LASODN作用 12～ 36h ,癌细胞ARmRNA水平降低 10 .45 %～ 82 .10 %(P <0 .0 5 ) ,细胞增殖活性抑制 11.8%～ 5 6 .9%(P <0 .0 5 ) ,细胞周期阻滞于G2 M期 ,部分细胞呈现典型凋亡形态学改变 ,凋亡比率为 34.2 5 %(P <0 .0 1)。　结论　应用ASODN封闭AR基因表达能抑制前列腺癌细胞体外生长活性 ,有望成为前列腺癌基因治疗的有效策略。

摘要：目的　探讨反义技术阻断人类端粒酶催化亚单位 (hTRT)基因表达对前列腺癌细胞生物学行为的影响。方法　设计、合成异硫氰酸荧光素标记的hTRT基因反义寡核苷酸 (ASODN) ,在脂质体介导下转染前列腺癌细胞系PC3 M ,运用荧光显微镜观察ASODN在癌细胞内的分布 ,MTT比色分析、流式细胞仪、克隆形成实验检测癌细胞体外生长活性 ,RT PCR和PCR ELISA法检测hTRT基因表达及端粒酶活性。结果　 0 5～ 2 0 μmol/LASODN转染 12～ 36h后 ,ASODN逐渐聚集于细胞核 ,PC3 M细胞增殖活性抑制 34 1%～ 79 6 % (P <0 0 1) ,细胞周期阻滞于G0 /G1期 ,克隆形成能力抑制 6 1 2 6 % (P <0 0 1) ,hTRTmRNA水平降低 2 4 4 8%～ 86 73% (P <0 0 1) ,端粒酶活性抑制 2 4 74 %～ 76 72 % (P <0 0 1)。结论　运用ASODN阻断hTRT基因表达 ,降低端粒酶活性 。

摘要：目的 观察草酸降解酶对肠源性高草酸尿症大鼠模型肾草酸钙结石形成的影响.方法 2014年5-6月,以8只健康大鼠为空白对照组（A组）,将24只肠源性高草酸尿症大鼠按完全随机设计随机分为阳性对照组（B组）、低剂量酶灌胃组（C组）和高剂量酶灌胃组（D组）,每组8只.其中A组采用牛理盐水3 ml/d灌胃,B组采用4％草酸铵溶液3 ml/d灌胃,C、D组分别在B组的基础上加用20、40 U/d草酸降解酶灌胃.4组大鼠连续观察28 d,第0、7、14、21、28天测定24 h尿草酸盐浓度,第0及28天检测肾功能及尿Ca^2＋、血Ca^2＋浓度.第28天对A、B、D组大鼠行肾脏能谱CT扫描后,取4组大鼠肾组织切片染色观察草酸钙结晶形成情况.结果 第0天,A、B、C和D组大鼠尿草酸盐浓度分别为（0.61±0.06）、（1.58±0.15）、（1.59±0.10）、（1.64±0.20） mmol/L,后3组组间差异无统计学意义（P＞0.05）,且均高于A组（P＜0.01）.开始灌胃干预后,C、D组大鼠尿草酸盐浓度呈明显下降趋势,且D组下降更明显.第28天,4组大鼠尿草酸盐浓度分别为（0.61±0.11）、（1.64 ±0.12）、（1.17±0.12）、（0.87 ±0.11） mmol/L,C组和D组较B组均明显降低,D组较C组下降更明显,组间差异均有统计学意义（P＜0.01）.各组大鼠肾功能及血Ca^2＋浓度均未明显改变（P＞0.05）.大鼠肾脏影像结果经CT后处理工作站数据分析提示,B组CT值明显高于D组（P＜0.01）,且两组均高于A组（P＜0.01）,3组的差异在低千伏能量条件下更明显.肾切片染色结果显示,B、C、D3组大鼠肾小管内均见草酸钙结晶沉积,B组最多,C组较少,D组更少,A组无明显结晶形成.结论 草酸降解酶能有效减少肠源性高草酸尿症大鼠肾草酸钙结石的形成.

摘要：目的:应用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制大鼠基因Ppif的表达,探讨其对大鼠肾细胞(NRK)增殖和凋亡的影响。方法:体外化学合成针对Ppif基因的siRNA序列,在脂质体介导下转染NRK细胞,RT-PCR检测Ppif mRNA表达水平,Western blot检测Ppif蛋白表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡状况,MTT法检测细胞增殖活性。结果:Ppif siRNA转染NRK细胞24 h后,所设计的3对针对不同靶点的siRNA与对照组相比,起始于405、556位点的siRNA在基因水平对Ppif无明显抑制效应(P>0.05);起始于198位点的siRNA在基因和蛋白水平均有明显的抑制效应,基因水平下降75.25%(P<0.05);蛋白水平下降72.13%(P<0.05)。MTT结果显示NRK细胞增殖能力显著增加,转染24 h后,siRNA1～siRNA4细胞抑制率分别为(68.6±3.6)%、(5.3±4.3)%、(7.6±6.3)%和(4.1±4.5)%,凋亡率明显下降。结论:体外化学合成的Ppif siRNA(起始于198位点)可以有效地抑制NRK细胞Ppif的表达,从而抑制细胞凋亡,促进细胞增殖。

摘要：目的:探讨应用专利设计的经皮肾微造瘘吸引碎石清石鞘(简称专利鞘)治疗上尿路结石的临床疗效和安全性。方法:回顾性分析2008年8月～2009年10月应用专利鞘行微创经皮肾镜取石术(MPCNL)治疗上尿路结石患者198例的临床资料,其中肾结石138例,输尿管上段结石46例,单侧肾结石并同侧或对侧输尿管结石12例,双肾结石并双侧输尿管上段结石2例。均应用专利鞘进行MPCNL,并对手术时间、肾盂内压、清石率、手术并发症等进行分析。结果:198例均一期建立通道。采用单通道取石192例,双通道取石5例,三通道取石1例。平均手术时间(46±10.8)min,术中监测肾盂内压力平均(0.28±0.068)kPa(1 mmHg=0.133 kPa);术后血红蛋白含量较术前平均下降(4.2±1.5)%,术中输血5例,术后2例出血严重者经高选择性肾动脉栓塞治愈。一期清石率为95.95%。术后3天出现体温≥38.5 C者3例。结论:应用专利鞘行MPCNL治疗上尿路结石安全、高效,临床效果显著。

摘要：目的构建凋亡因子Caspase-12的短发夹状RNA(siRNA),观察其在体外对鼠粒单系白血病细胞WEHI-3细胞对凋亡的抵抗作用。方法设计并合成一对针对Caspase-12编码基因的siRNA,构建表达此siRNA的重组质粒psiRNA-Caspase-12,转染入WEHI-3细胞。检测胞内Cas- pase-12的mRNA和蛋白的表达。并检测转染后WEHI-3细胞的抗凋亡能力。结果酶切分析和测序证实构建成功,siRNA对Caspase-12的表达均有明显的抑制作用。染后WEHI-3细胞的抗凋亡能力增加。结论构建的重组质粒能有效抑制Caspase-12基因在白血病细胞株WEHI-3中的表达。并对内质网应激性凋亡具有抵抗能力。

摘要：目的:构建携带针对靶基因DNA甲基转移酶3b(DNA methyltransferase 3b,DNMT3b)mRNA的shRNA真核表达载体,并从构建成功的重组质粒中筛选出沉默效应最强的干扰质粒。方法:以基因DNMT3bmRNA为靶序列设计三条shRNA序列,应用基因重组技术将其克隆到真核表达载体pG-ensil-1中,构建重组质粒pGensil-1-DNMT3b-shRNA1、pGensil-1-DNMT3b-shRNA2、pGensil-1-DNMT3b-shRNA3;经酶切鉴定和测序分析后,将重组质粒分别转染T_(24)细胞中,应用RT-PCR和Western-blot检测各组质粒对DNMT3bmRNA和蛋白的表达抑制情况,并筛选最有效的干扰序列。结果:各重组质粒经酶切鉴定和测序分析显示插入完全正确。RT-PCR结果经图像分析,shRNA1、shRNA2和shRNA3对DNMT3bmRNA的抑制率分别为20.44%、79.91%和54.48%;Western blot结果经图像分析,shRNA1、shRNA2和shRNA3对DNMT3b蛋白的抑制率分别为17.27%、77.74%和56.79%。结论:成功构建了质粒pGensil-1-DNMT3b-shRNA(1,2,3),并筛选出pGensil-1-DNMT3b-shRNA2为沉默效应最强的质粒。

摘要：目的降低肾移植患者术后尿管相关性感染的风险。方法将2016年1~6月行肾移植手术的60例患者作为对照组,7~12月行肾移植手术的68例患者作为观察组。对照组给予肾移植术后常规留置尿管护理,观察组自行设计肾移植术后留置尿管感染重点控制环节监测表,由责任护士依据监测表执行相关护理操作。结果观察组留置尿管时间以及尿培养阳性率显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论应用肾移植术后留置尿管感染重点控制环节监测表能有效降低患者术后尿管相关性感染发生率,缩短尿管留置时间,促进肾移植患者术后康复。

摘要：背景:干细胞特异性基因Oct-4在维持干细胞功能和调节干细胞的分化过程中起着关键性作用,了解前列腺癌干细胞中Oct-4的表达,对前列腺癌的预后、复发和耐药的评估具有重要意义。目的:观察Oct-4在激素非依赖性前列腺癌干细胞中的表达。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-02/10在南昌大学第一附属医院中心实验室完成。材料:取12例前列腺癌患者手术后组织标本,其中6例在手术前没有经过化疗和激素治疗,另外6例患者经过激素治疗出现抵抗而手术。方法:制备前列腺癌组织单细胞悬液,流式细胞仪分选未经治疗前列腺癌和治疗后出现耐药的前列腺癌干细胞,RT-PCR和Western blot检测激素非依赖性前列腺癌Oct-4基因和蛋白的表达。主要观察指标:激素依赖和非依赖性前列腺癌CD133+/CD44+以及CD133-/CD44-细胞的比例;Oct-4基因和蛋白在激素非依赖性前列腺癌CD133+/CD44+、CD133+/CD44-、CD133-/CD44+、CD133-/CD44-细胞的表达。结果:流式细胞仪检测显示未经过治疗的前列腺癌CD133+/CD44+细胞占(0.83±0.21)%,而CD133-/CD44-细胞多达(95.62±1.35)%;治疗出现激素抵抗的前列腺癌CD133+/CD44+细胞为(54.62±0.86)%,而CD133-/CD44-细胞为(9.56±0.47)%;与其他亚群细胞相比,激素非依赖性前列腺癌CD133-/CD44-细胞Oct-4基因和蛋白显著降低(P0.05)。结论:Oct-4在激素非依赖性前列腺癌干细胞中高表达,可能与前列腺癌的预后和耐药有关。