摘要：目的　研究反义寡聚核苷酸 (asONs)能否抑制人膀胱肿瘤T2 4细胞系端粒酶活性和增殖活性。方法　设计并合成 2条针对端粒酶RNA模板区的asONs片段 ,在其作用于T2 4细胞第 5天时 ,用 7复孔法用聚合酶链反应 酶标法 (PCR ELISA )检测其对端粒酶活性的影响 ;分别在实验的第 1、3、5、7天 ,用 7复孔四唑盐比色试验 (MTT)法检测其对细胞增殖活性的影响。结果　经不同浓度 (0、5、10 μmol/L)处理 5d后T2 4细胞端粒酶活性受到抑制 ,吸光度 (A )值分别为0 .79± 0 .10、0 .2 4± 0 .14 ;经 10 μmol/L处理 1、3、5、7d ,T2 4细胞的增殖活性逐渐下降 ,A值分别为 0 .5 9± 0 .11、0 .3 9± 0 .0 9、0 .2 1± 0 .0 2、0 .19± 0 .0 7,各组分别比较差异有非常显著性(P <0 .0 0 1)。结论　asONs能够同时抑制人膀胱肿瘤T2 4细胞系端粒酶及细胞增殖活性 ,提示asONs可能通过抑制端粒酶活性达到抑制人膀胱肿瘤T2

摘要：目的提升泌尿外科健康教育管理质量。方法将359例手术患者按时间段分为对照组182例、干预组177例。对照组实施常规围手术期健康教育;干预组设计并实施健康教育管理流程,即在成立健康教育管理小组、制定健康教育培训手册基础上,设计并实施健康教育管理流程。结果干预组患者健康教育知识知晓率、健康教育管理满意度显著优于对照组(均P<0.01);健康教育管理流程实施后护士健康教育能力及专科理论知识显著提高(均P<0.01)。结论健康教育管理流程的实施提高了患者健康教育知识掌握度及健康教育管理满意度;有利于规范护士健康教育行为,提升护士健康教育能力及专科理论水平。

摘要：目的提高泌尿外科临床实习护生人文关怀能力。方法将本科护生106人按进入泌尿外科实习时间分为对照组52人和观察组54人。对照组按实习计划进行常规专科护理与人文关怀临床带教,观察组对人文关怀教学内容进行专项设计,包括激发兴趣、角色扮演、角色体验、深入交流、反馈讨论、调整优化6种形式,并融入4周专科临床教学中。结果实习结束时观察组护生专科理论及操作考核成绩、人文关怀能力得分显著高于对照组,对教学模式认可度显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论将人文关怀内容融入专科临床教学中,可有效提高护生实习成绩和人文关怀能力,教学模式获得护生认可。

摘要：目的总结常态化新型冠状病毒肺炎疫情防控下泌尿外科护理线上实习教学经验,为应对特殊情形下的临床教学提供参考。方法对2020年7~8月入泌尿外科毕习实习轮转1周的127名护生,采取线上直播教学,包括成立线上教学小组、线上课程设计,多形式线上授课与考核等。结果护生课堂签到率100%;综合考核成绩(82.41±6.53)分,达标率100%;教学质量评分(95.51±3.03)分,达标率100%。结论常态化疫情防控下实施线上实习教学效果良好,为线下临床实习打好了基础,有效减少疫情带来的负面影响。

摘要：目的:构建产生缺氧诱导因子1α(HIF-1α)特异性短发夹状RNA(shRNA)的载体并检测其抑制作用,探讨该技术在前列腺癌治疗中的应用前景。方法:设计、合成针对HIF-1α的特异性shRNA模板序列,将其插入含有U6启动子的psilencerTM2.1-U6载体中,得到shRNA表达载体psilencer-HIF,在脂质体介导下转染前列腺癌细胞株PC-3M,应用绿色荧光蛋白质粒pEGFP共转染评价转染效率,RT-PCR及Western印迹检测其对HIF-1α表达的影响。结果:重组质粒psilencer-HIF经测序分析证实与设计的完全一致,共转染24 h后质粒转染效率为(89.26±4.72)%,其产生的shRNA在PC-3M细胞中能诱导RNA干扰(RNAi),转染后48 h HIF-1αmRNA和蛋白水平分别下降82.09%和81.61%(P0.05)。结论:成功构建了HIF-1α基因shRNA表达质粒,其可有效抑制前列腺癌细胞中的HIF-1α的表达,为前列腺癌的基因治疗提供了新思路。

摘要：目的研究HJURP基因对肾癌细胞生物学功能的影响。方法利用TCGA肾癌数据库分析HJURP基因在肾癌中的表达及对预后的影响,qPCR进一步检测HJURP基因在20例肾癌组织,肾癌细胞株CAKI-1、786O、A498及正常化肾小管细胞HK2中的表达。分别设计HJURP特异性siRNA(si-HJURP组)和对照序列(NC组)转染CAKI-1细胞株,采用细胞克隆形成实验和MTT法检测HJURP基因对肾癌细胞增殖活性影响,流式细胞术检测肾癌细胞周期变化,Transwell实验检测肾癌细胞迁移能力,Western blot检测上皮间质转化(EMT)及AKT通路相关蛋白的表达变化。结果(1)TCGA数据库中HJURP在肾癌组织中显著高表达,且随着肿瘤分期的升高而增高(P<0.05)。HJURP高表达组患者总生存率和无病生存率明显较HJURP低表达组患者降低。(2)肾癌组织及肾癌细胞株中HJURP表达均高于癌旁组织及正常肾小管细胞。(3)细胞学实验结果显示,与NC组相比,si-HJURP组CAKI-1细胞增殖活性明显受抑制,G2期细胞比例增高,细胞迁移数量明显下降,EMT相关蛋白N-cadherin表达下降,E-cadherin表达升高,同时AKT通路关键蛋白p-AKT及p-GSK3β明显下调(P<0.05)。结论HJURP基因在肾癌中高表达,促进肾癌细胞的增殖及迁移,其可作为肾癌的潜在临床诊治靶点及预后标志物。

摘要：目的:研究沉默丙酮酸激酶M2型(PKM2)对藤黄酸(GA)诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的影响,并探讨其潜在的作用机制。方法:设计并合成针对PKM2的3条特异性siRNA及阴性对照siRNA(si-NC)。利用脂质体将PKM2 siRNA和si-NC转染至人前列腺癌PC3细胞并检测PKM2 siRNA的沉默效率。MTT和吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双重染色法分别检测沉默PKM2后GA对PC3细胞生长活性和凋亡的影响。采用实时荧光定量PCR和Western印迹法分别检测c-myc和cyclin D1的mRNA和蛋白表达水平。结果:与si-NC组比较,3条PKM2 siRNA都能够有效下调PKM2的mRNA和蛋白表达水平,其中PKM2 siRNA-1的沉默效率最高。转染PKM2siRNA-1 24 h后,PC3细胞中PKM2 mRNA和蛋白表达水平分别下调70%和85%(P<0.05)。转染PKM2 siRNA-1后给予0.5μmol/L的GA处理24 h,PC3细胞生长活性明显受到抑制(对照组的68%)且凋亡诱导增加,而且c-myc和cyclin D1基因的mRNA和蛋白的表达水平显著下调(c-myc分别为对照组的50%和35%;cyclin D1分别为对照组的60%和20%,P<0.05)。结论:抑制PKM2能够提高GA诱导人前列腺癌PC3细胞凋亡的敏感性,PKM2可能成为GA治疗前列腺癌的有效增敏靶点。

摘要：目的:对比经尿道钬激光切除术(En bloc)与经尿道膀胱肿瘤电切术(TURBT)治疗非肌层浸润性膀胱肿瘤的临床疗效差异。方法:设计回顾性对照研究,选取麻城市人民医院泌尿外科2013年1月到2016年1月期间收治的非肌层浸润性膀胱肿瘤患者187例,根据患者手术方式将予以TURBT术治疗的患者标记为对照组(n=82),将予以En bloc术治疗的患者标记为观察组(n=105)。回顾分析两组患者手术时间、术中膀胱冲洗例数等围术期指标差异,比较闭孔神经反射、膀胱穿孔等术中不良事件的发生率以及术后复发率差异,采用Kaplan-Meier生存曲线分析两组患者术后生存周期差异。结果:观察组患者术后导尿管留置时间、术后膀胱冲洗总时间及住院时间均明显短于对照组(P0.05),观察组患者术后2年、术后3年复发率均明显小于对照组(P<0.05)。Kaplan-Meier分析提示,观察组患者术后3年总生存期(OS)高于对照组,低度恶性潜能的乳头状尿路上皮肿瘤(PUNLMP)及低分级尿路上皮细胞癌(LGC)患者肿瘤特异性生存率(CSS)明显高于高分级尿路上皮细胞癌(HGC)患者,Log-rank检验提示比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:与TURBT术相比,En bloc术治疗非肌层浸润性膀胱肿瘤的临床疗效更显著,可有效缩短患者恢复时间,降低术后复发率和不良事件发生率,提升总生存率,值得在临床推广应用。

摘要：目的探讨针对p21基因启动子序列不同转录起始位点设计的小双链RNA（dsRNA）对p21基因表达的正向调控作用。方法针对p21基因启动子DNA序列设计合成4对dsRNA分子dsP21．382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21—625，转染人体外培养的人膀胱肿瘤细胞株5637细胞及T24细胞中，并以具有激活功能的dsRNA分子dsP21—322作为阳性对照，以未转染的5637和T24细胞为空白对照，以dsControl为阴性对照。采用实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）和Westernblot等观察各dsRNA转染后，细胞内p21基因mRNA及蛋白表达量的差异，以及dsRNA转染对肿瘤细胞株生长的影响。结果PCR结果显示，与空白对照组比较，dsP21—382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21-625分别上调5637细胞中p21mRNA的表达1．56、1．88、2．41和1．74倍（P〈0．05），dsP21-382、dsP21-436、dsP21-484、dsP21-625分别上调T24细胞中021mRNA的表达1．71、1．69、2．62和1．85倍（P〈0．05）。Westernblot结果显示，与空白对照组比较，p21蛋白表达的升高与021mRNA水平的升高一致。4对dsRNA均能显著抑制膀胱肿瘤细胞株的生长。结论dsRNA对基因表达正向调控作用可能是一种普遍现象。

摘要：目的人工合成与微小RNA（miRNA，TniR）-1236所作用的p21基因启动子靶序列完全互补配对的4对小分子双链RNA（dsRNA）：dsP21-242、dsP21-243、dsP21-244和dsP21-245（dsP21-243序列配对程度最高），分别观察其与miR-1236在激活人膀胱癌细胞株T24和EJ细胞中抑癌基因p21表达能力的差异。方法参照小激活RNA（saRNA）的设计原则设计合成4对dsRNA。分别转染阴性对照组（dsContr01）、阳性对照组（miR-1236）和实验组（dsRNA）至T24和EJ细胞，通过实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）、反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblot分别检测p21mRNA和蛋白表达的水平。结果FQ-PCR检测结果显示实验组中仅dsP21-245能明显促进两种细胞中p21mRNA水平的升高；且与阴性对照组比较，dsP21-245分别上调T24和EJ细胞中p21mRNA的表达至2．32倍（P〈0.01）和2．84倍（P〈0．01）；与阳性对照组比较，两种细胞株中p21mRNA的表达差异均没有统计学意义（P〉0．05）。RT-PCR检测结果证实了p21mRNA表达变化的趋势。Westernblot结果显示在两种细胞株中p21蛋白表达水平的升高与p21mRNA水平的上调一致。其余3对dsRNA均未能显著上调两种细胞株中p21基因的表达（P〉0．05）。结论人工合成的dsP21-245能显著促进膀胱癌细胞中p21的高表达，且与miR-1236激活p21表达的能力差异无统计学意义。