摘要：目的研究体内核转录因子KLF4是否与血管内皮生长因子(VEGF)启动子上游DNA序列相互作用。方法采用染色质免疫沉淀法鉴定人胃癌AGS细胞内KLF4与VEGF启动子上游DNA序列的相互作用,通过检索VEGF基因序列,发现在VEGF基因转录起始位点上游存在3个KLF4结合位点,针对这3个KLF4结合位点核心DNA序列(CACCC)设计3对PCR引物,利用KLF4抗体进行染色质免疫沉淀,PCR扩增。结果针对VEGF上游启动序列3个潜在的KLF4结合位点设计的引物,以KLF4特异性结合的DNA片段为模板,能够扩增出目的条带,与阴性对照组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论体内KLF4可能与VEGF启动子上游DNA序列相互作用。

摘要：目的研究射波刀治疗计划系统的不同剂量算法应用于肺部肿瘤计划剂量计算结果的差异,分析肿瘤体积、位置等因素对计算结果的影响。方法选取2017年肺部肿瘤病例32例,针对每一病例使用射波刀VSI系统配备的MultiPlan 5.2.1计划系统设计计划,分别采取射线追踪算法和蒙特卡罗算法计算剂量分布,比较两种算法剂量计算结果。结果据现有病例,两种算法剂量计算结果显示:计划靶区的处方覆盖率、适形指数、新适形指数、均匀性指数的偏差范围分别为0.93%~68.80%、O.87%~17.21%、-212.38%~8.27%、0%~15.17%。结论射波刀治疗计划系统设计肺部肿瘤计划,肿瘤体积、位置对不同算法剂量计算结果的差异性有较大影响,越小的肿瘤体积、越长的射束异质性路径易于产生更大的差异性,应采用或参考蒙特卡罗算法的计算结果开展治疗。

摘要：目的以高表达脑源性神经营养因子（BDNF）的宫颈癌细胞系HeLa细胞为模型，筛选针对BDNF基因的有效干扰RNA序列，并观察BDNF基因沉默对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法设计和构建两个针对人BDNF基因的siRNA真核表达载体，经酶切鉴定和DNA序列分析鉴定后用脂质体Lipofectamine 2000介导转染，将空载体质粒pGenesil-1和两个重组质粒pGenesil—shRNA—BDNF1、pGenesil—shRNA—BDN心分别转染人人HeLa细胞（依次命名为P0、P1和R组）；采用RT—PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测BDNF表达的变化；四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞的增殖水平；流式细胞仪和Hoechest33258染色检测细胞凋亡。结果成功构建了针对BDNF的siRNA真核表达载体。P1组与未转染、P0、P2组相比，BDNFmRNA表达水平（F=48．19，P〈0．01）和BDNF蛋白表达水平（F=13．74，P〈0．01）均明显降低，P2组则未达实验预期的干扰目的（P〉0．05）。通过MTr实验，发现P．组细胞生长速度明显减慢，增殖高峰后移；流式细胞术检测证实早期凋亡率P1组[（53．4±4．2）％]明显高于未转染组[（0．8±0．4）％]、P。组[（5．1±1．8）％]和P2组[（7．9±2．4）％；F=269．77，P〈0．01]。结论BDNF基因高表达于宫颈癌细胞系HeLa细胞，BDNF基因沉默能明显增加HeLa细胞的凋亡并抑制其增殖，提示BDNF基因可能成为恶性肿瘤治疗的新靶点。

摘要：改革公立医院薪酬制度,对增强公立医院公益性、激发医务人员工作积极性、推动高质量发展,有正向激励作用。笔者介绍了华中科技大学同济医学院附属协和医院自2018年以来分步推进医、护、技、管分序列薪酬制度改革探索,包括基于医疗组的医师绩效改革、以护理垂直管理为基础的护理绩效改革、以资源边际效益为主的医技绩效改革、基于岗位职责和360°考评的管理绩效改革。实践显示,薪酬制度改革可促进医疗服务能力提升,提高护士满意度,缩短医技检查等待时间,保障绩效"国考"成绩及医院综合排名稳中有升。各医院在研究落实薪酬制度改革政策要求时,需因地制宜,以精准、安全的信息系统为支撑,重点考量分配模式、薪酬结构和资金来源等。

摘要：多药耐药性的产生是导致肿瘤化疗失败的重要原因。多药耐药基因MDR1及其所编码的细胞膜P糖蛋白（P-gp）表达增加介导的耐药在化疗中最为主要、最为常见。在过去20多年中，学者们探求各种逆转多药耐药的方法，如反义寡核苷酸技术、核酶技术等，取得了一定的成果。RNA干扰（RNAi）技术抑制MDR1基因表达是研究逆转多药耐药的新途径。本研究设计并构建针对人MDR1基因特定位置的短发夹状RNA（shRNA）质粒pEGFP-H1／MDR1，观察其对卵巢上皮性癌（卵巢癌）紫杉醇耐药细胞株MDR1基因和P-gP表达的抑制作用，探索耐药肿瘤基因治疗的有效方法。

摘要：目的探讨应用游离腓肠内侧动脉穿支皮瓣修复足部小面积溃疡的临床效果。方法2010年1月至2013年2月，采用吻合血管的腓肠内侧动脉穿支皮瓣修复足部小面积溃疡12例，男8例，女4例。其中胫神经损伤后足底溃疡3例，外伤后足部局部瘢痕磨损后溃疡5例，其他外伤后溃疡4例。5例溃疡位于足底跖趾关节处，3例溃疡位于第一跖趾关节内侧，4例溃疡位于足跟。皮瓣设计区域为同侧小腿。皮瓣切取大小3．0cm×4．0cm-5．0cm×9．0cm，供区创面直接闭合。结果12例皮瓣全部成活，1例术后发生伤口不愈合，经换药后逐渐愈合，所有病例随访8个月～3年，供区无明显功能障碍，瘢痕不大，足部外形满意，恢复了一定触觉及痛觉。结论带吻合血管的腓肠内侧动脉穿支皮瓣可用来修复足部小面积溃疡，供区创面可直接闭合，受区手术创面小，获得较为满意的临床效果。

摘要：目的　探讨我国眼科领域的临床疗效研究水平 ,为循证医学 (EBM)研究提供可靠证据。方法　按照EBM标准 ,对中华眼科杂志 1983～ 2 0 0 2年间 ,发表的全部涉及临床疗效的论文进行检索和分析。结果　临床疗效研究论文共 15 2篇 ;其中属于随机对照试验 35篇 ,临床对照试验 8篇 ,共计4 3篇 ,占临床疗效研究论文的 2 8 1% ,且在随机分组、对照设置、盲法、基线资料、随访、失访、并发症报告及统计分析等方面均存在较多问题。在属于对照实验的论文中 ,有 10篇 (2 3.3% )论文描述了随机或半随机分组的具体方法 ;采用安慰剂对照和开放对照的文章分别是 3篇 (7.0 % )和 9篇 (2 0 .9% ) ;盲法研究性论文 7篇 (16 .3% ) ;有随访结果 ,并提供较为详细随访资料的论文 2 5篇 (5 8 1% ) ;未见分析混杂、偏倚、干扰和沾染等因素影响临床疗效研究质量的论文 ;未见在项目设计时进行了样本含量估算的论文 ;15篇 (34 9% )论文中的部分或全部数据未标明显著性检验方法 ,仅有P值。结论　我国眼科领域的部分临床科研设计方法不够严谨 ,从而影响研究结果的真实性和可靠性。重视对眼科医师进行临床科研设计方法的培训 ,严格控制研究质量 ,对提高我国的临床疗效研究水平至关重要。

摘要：目的 研究电离室灵敏体积对射波刀计划绝对剂量验证的影响.方法 CT扫描固体水模体后将影像导入计划系统,选用可变孔径准直器分别设计单野照射、多野等中心照射和非等中心适形计划.使用灵敏体积为0.007 cm3（ExradinA16）、0.240 cm3（ExradinA12s）和0.600 cm3（PTW30013）的电离室在固体水中分别测量各计划的绝对剂量,并计算相对误差.结果 单野照射计划的相对误差随准直器孔径缩小而增加,相对误差在±2%内的最小准直器孔径分别为12.5 mm （ExradinA16）、25.0 mm （ExradinA12s）和30.0 mm （ExradinPTW30013）;多野等中心照射计划测量中的相对误差为（0.26±3.9）%（ExradinA16）、（-6.28±14.33）%（ExradinA12s）和（-9.41±14.10）%（PTW30013）;使用15.0 mm和7.5 mm准直器设计的非等中心适形计划相对误差分别为（0.79±1.43）%和（2.01±8.39）%.临床计划的绝对剂量验证中3种电离室测量的数据差异无统计学意义（P=0.985）.结论 在较大准直器孔径情况下,若处方剂量完全包绕电离室灵敏体积则灵敏体积对测量结果影响不大.

摘要：目的研究单次静脉滴注尼扎替丁(抗胃及十二指肠溃疡药)在健康人体的药代动力学。方法按照平行设计方法,将健康志愿者36名随机分为3组,分别单次静脉滴注尼扎替丁注射液100、200和300mg后,用高效液相色谱法测定血浆尼扎替丁浓度,用DAS软件计算其药代动力学参数。结果血药浓度-时间曲线符合二房室开放模型,主要药代动力学参数:t1/2β分别为(1.43±0.64)、(1.32±0.35)和(1.27±0.24)h;Cmax分别为(2392.21±451.81)、(4052.25±1188.84)和(6315.62±1140.08)μg.L-1;AUC0-t分别为(1840.01±345.56)、(3511.41±865.35)和(5365.29±948.14)μg.h.L-1;AUC0-∞分别为(1901.50±347.96),(3627.98±931.21)和(5586.76±1024.53)μg.h.L-1。3组的β、t1/2β、CL无显著性差异,与给药剂量无关;而Cmax、AUC0-t、AUC0-∞随给药剂量增加而成比例增加。结论单次静注尼扎替丁100～300mg,在健康人体内过程符合线性药代动力学特征。

摘要：目的研究培养Hep-2细胞中,靶向血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的小干扰RNA表达框架(smallinterferenceRNAexpressioncassettes,SECs)对肿瘤细胞生长的影响,检测VEGF基因表达的情况,筛选最佳干扰序列,探讨RNAi技术在肿瘤基因治疗中的应用前景。方法根据siRNA靶序列设计原则,设计出VEGF4个位点的干扰序列,然后进行合成,即为siRNA表达框架的下游引物。由于干扰试剂盒中采用RNA介导的U6聚合酶Ⅲ启动子和改良的终止序列,从而在靶细胞内可以高水平及精确地表达siRNA。我们将4个位点的PCR产物分别转染指数生长期的Hep-2细胞,48h开始观察和检测所产生的RNA干扰的效果。结果形态学检测:转染后的1366位点的细胞可见皱缩、变圆并开始脱落,而其他三个位点的细胞形态学上未见明显的改变;逆转录-聚合酶链反应产物进行琼脂糖凝胶电泳,与对照组相比,1366位点细胞VEGFmRNA明显被抑制,吸光度为0·05,而其他三个位点的抑制效果不显著,吸光度分别是0·25、0·30和0·18。Westernblot分析表明:与其他三个位点相比,1366位点的VEGF蛋白表达明显减弱;流式细胞仪检测表明:1366位点转染细胞的凋亡率为43%,而其他三个位点转染细胞的凋亡率改变不明显,分别为8·9%、6·5%和11·2%;本实验重复性强,同样的实验重复三次结果一致。结论研究表明靶向VEGF的1366位点的siRNA表达框架能高效抑制喉癌细胞株Hep-2细胞的生长。