摘要：survivin基因有4个外显子和3个隐含外显子（2α、2B和3B），同一个基因的转录产物通过选择性剪接方式产生多种成熟mRNA。目前发现人类存在5种不同剪接变体。我们分别设计了5种survivin剪接变体特异引物，即时荧光定量检测其在胃癌中的表达，同时分析各种变体之间以及其表达水平与临床病理资料之间的相关性。

摘要：[目的]提高代谢综合征病人出院后的遵医行为,改善疾病控制相关各项指标。[方法]将240例代谢综合征病人随机分为观察组和对照组各120例。对照组病人出院后给予电话和短信回访,不适随诊。观察组设计代谢综合征病人智能手机应用程序,将疾病相关知识、用药指导、健康指导内容融入其中,用图文并茂的方式对病人进行健康指导,实施动态管理,评价使用后的效果。[结果]病人出院6个月后,观察组病人饮食、运动、限酒、心理状态改善效果均优于对照组(P<0.05或P<0.01);观察组干预后病人的收缩压、舒张压、体重指数、空腹血糖、三酰甘油下降程度均优于对照组(P<0.05)。[结论]代谢综合征病人应用智能手机应用程序进行延伸护理,可提高病人出院后的遵医行为,改善疾病控制相关各项指标。

摘要：目的:优选菝葜中总皂苷的微波萃取工艺。方法:以萃取物中皂苷的含量为指标,采用均匀设计法优选微波萃取菝葜有效成分的最佳工艺。结果:微波萃取菝葜有效成分的最佳工艺条件为原料粉碎度20目,萃取时间1min,萃取温度100℃,液固比12倍,溶剂为30%乙醇。结论:通过验证实验表明,所建立的模型合理。微波辅助萃取具有萃取率高、萃取时间短等优点。

摘要：[目的]探讨智能化手术室教学培训与考评软件系统的临床应用效果,旨在提高手术室护理人员在职培训质量。[方法]采用整群抽样、随机分组、同期培训考评方法,试验组应用智能化手术室临床教学培训与考评系统,对照组应用传统人工培训与考评方法,评价两组在培训内容完成率、出卷耗费时长、考评时间、考评空间选择、阅卷时间、成绩汇总方法、问题分析、资料保存方法、考核执行率方面是否存在差异。[结果]两组培训内容完成率、出卷耗费时长、考评空间、阅卷时间、成绩汇总、问题分析、资料储存、考核执行率各项指标均具有统计学差异(P0.05)。[结论]智能化手术室临床教学培训与考评系统的应用,有机结合了手术室工作特点,实现了临床培训与考评形式的多样化、考试空间自由化、考试时间便利性、阅卷评价智能化,有效地提高了临床在职人员教学培训质量。

摘要：目的探讨本研究设计的扩大耳后带蒂肌骨膜瓣-耳道皮瓣复合瓣,结合骨粉乳突术腔填塞术,应用于开放式改良乳突根治术治疗胆脂瘤型中耳炎的临床疗效和意义。方法 2003年4月至2005年3月间胆脂瘤中耳乳突炎患者71例(71耳)施行在开放式改良乳突根治术基础上,应用扩大耳后带蒂肌骨膜瓣-外耳道皮瓣复合瓣,结合骨粉乳突术腔填塞术,同期行鼓室成形术。结果术后随访≥2年。手术后术腔完全上皮化时间为3周～1.5个月,平均29 d。全部乳突术腔获干耳。结论扩大耳后带蒂肌骨膜瓣-耳道皮瓣复合瓣,结合骨粉行乳突术腔填塞术,应用于开放式改良乳突根治术,治疗胆脂瘤型中耳炎具有以下优点:乳突术腔愈合时间短,上皮修复覆盖好;可避免乳突术腔植皮;术后干耳率高,基本无需术后乳突术腔清理。

摘要：目的对比容积调强弧形治疗(VMAT)和射波刀六维颅骨追踪(CK-6D Skull)技术治疗多发脑转移瘤的立体定向放疗(SRT)方案的综合差异,探索颅内多靶点采用何种技术更具优势。方法回顾性分析2017-2018年间,≥2个脑转移灶接受SRT患者42例,分别对每例患者选择CK-6D Skull技术和VMAT技术设计放疗计划;通过统计靶区梯度指数、剂量跌落体积和危及器官等参数比较VMAT与CK-6D Skull的计划质量;记录总机器跳数和单次治疗时间比较两种技术执行效率。结果颅内2靶点与3靶点计划的梯度指数CK-6D Skull技术优于VMAT技术(P0.05);两种技术对于危及器官最大剂量的贡献差别不大(P>0.05),但VMAT技术治疗时间更短(P<0.05)。结论两种技术均能满足临床开展SRT多发脑转移瘤的要求,单从治疗计划和执行的角度,建议颅内<4个转移瘤患者考虑采用CK-6D Skull技术实施SRT,≥4个转移瘤考虑采用VMAT技术实施SRT;体质状况差,不易长时间保持固定体位的患者优先考虑VMAT技术。对于两种技术在实施颅内多发脑转移瘤SRT更多的差异,有待更多的病例资料进行统计研究。

摘要：目的设计构建Livin的shRNA真核表达载体,并转染宫颈癌HeLa细胞,进一步研究该表达载体对目的基因Livin的沉默效果,为宫颈癌基因治疗探索新方法。方法以Livin为靶基因,以Pgenesil-1质粒为载体,构建重组体,根据Livin基因cDNA序列,设计shRNA寡核苷酸序列,退火后克隆到空载体Pgenesil-1中,转化DH5α菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析。将构建好的真核表达载体转染宫颈癌HeLa细胞。结果经酶切鉴定出的重组体测序结果与目的序列相同,重组载体构建成功,并被成功转入宫颈癌HeLa细胞,可见绿色荧光蛋白表达,48 h转染效率最高。结论利用RNA干扰技术可成功构建小干扰RNA重组体,为进一步研究宫颈癌基因治疗奠定基础。

摘要：目的通过动物实验和病例观察两方面的结果探讨腹腔镜扩大肝门埋入空肠吻合术预防吻合口狭窄的可行性和有效性。方法动物实验部分遵循相关的实验设计原则,构建巴马小型猪模型,并将其随机分为2组接受不同的干预方案。两组胆总管直径均<6mm。A组(n=12)行胆总管套入式吻合,模拟肝门包入空肠吻合术;B组(n=12)行胆总管空肠吻合,模拟经典肝管空肠吻合术;比较两组吻合口局部组织学特点。病例观察部分选取2012年1月至2018年1月于华中科技大学同济医学院附属协和医院小儿外科接受腹腔镜肝门扩大埋入空肠吻合术的肝门胆管狭窄胆总管囊肿患儿47例并进行随访,初步总结手术治疗经验。结果A组实验动物术后无一例发生吻合口狭窄,B组中有5只小型猪出现狭窄;B组狭窄吻合口组织表现为炎性细胞浸润严重、粗大的胶原纤维排列紊乱以及遍布吻合口全层,促纤维化因子表达水平较A组显著增高(P<0.05)。47例患儿腹腔镜肝门扩大埋入空肠吻合手术过程均顺利,手术时长(165±15)min,住院时间(9±2)d。随访(31±18)个月,无一例并发胆管炎、胆管结石及吻合口狭窄。结论对于肝门胆管直径<6mm的胆总管囊肿,腹腔镜肝门扩大埋入空肠吻合术能有效地预防术后吻合口狭窄的发生。

摘要：目的 优化新型靶向性非病毒基因载体——含RGD肽K16GRGDSPC介导转化生长因子β1（TGF-β1）基因转染骨髓基质细胞的转染条件。方法 固相合成法合成K16GRGDSPC寡肽并用质谱仪和高压液相色谱仪进行检测。在保持其它因素一致的条件下，通过变化单一因子来筛选某个最佳参数。结果 合成肽与设计肽的分子量一致，纯度为94％～95％，满足实验要求。在寡肽载体介导转染的过程中，溶酶体抑制剂氯喹起着不可或缺的作用，而且在氯喹溶液中的暴露时间至少应维持在8h以上；在载体／DNA复合物中暴露时间过短（〈4h）或过长（〉24h）对转染都有不利影响；血清对载体／DNA复合物与细胞的结合有明显抑制作用；质粒含量在2～4μg时转染效果最佳；质粒／载体质量比为1：2～1：4时有较高的转染效率；加入转铁蛋白也能显著提高基因的转染和表达，且在25μg时转染效率达到最大。结论 通过优化转染条件可提高寡肽载体的转染效率，可为下一步进行骨基质材料表面基因修饰研究提供基础。

摘要：目的构建由人MDR1启动子调控CD∷upp融合基因表达的重组腺病毒,为对耐药肿瘤体内外靶向基因治疗奠定基础。方法自行设计一对含XhoⅠ和HindⅢ酶切位点的MDR1引物,从外周血中提取人类基因组DNA,通过PCR扩增MDR1启动子并插入PGL3-enhancer载体上,获得PGL3-MDR1质粒。从PORF-CD∷upp质粒中切下CD∷upp基因,插入PGL3-MDR1中MDR1启动子下游,并从中切下目的基因MDR1-CD∷upp,克隆到腺病毒穿梭质粒中,将带目的基因的穿梭质粒pAdTrack-MDR1-CD∷upp。与含有pAdeasy-1的BJ5183菌电转化,筛选提取>30 kb的阳性克隆,经线性化后转染293细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR扩增出重组腺病毒中的目的基因MDR1、CD∷upp等方法加以鉴定。结果成功构建了含MDR1-CD∷upp靶向自杀基因的重组腺病毒载体Ad-MDR1-CD∷upp,病毒滴度为3.0×1010pfu/ml。结论该重组腺病毒的构建为下一步研究其对MDR1耐药细胞系的特异性杀伤作用和对耐药肿瘤模型的靶向基因治疗提供基础。