摘要：运用四元二次回归旋转组合设计法研究了温度、时间、水料比、pH值对苦瓜粗多糖提取率的影响,建立了具有提取条件的数学模型,确定了最优提取条件。试验结果表明,对苦瓜粗多糖提取率影响作用大小的顺序为:温度、pH值、水料比、提取时间。最优提取工艺条件为:温度96℃,时间230min,水料比27,pH值7.5,在该条件下苦瓜粗多糖提取率高达13.29%。

摘要：细菌素是细菌代谢过程中合成的具有抑菌性质的多肽类物质,它可以广泛地抑制革兰氏阳性菌,尤其是抑制单增李斯特菌等腐败菌和病原菌,大部分细菌素对热稳定,与食品一起在加热处理时使用依然能够稳定存在,并可在人体内进行生物降解和消化,对健康无害。利用分子克隆的方法在大规模筛选细菌素中具有快速准确的特点,根据已知的细菌素DNA序列设计保守的PCR引物,在从杏鲍菇子实体中分离得到56株乳酸菌中,有22株克隆出目的条带,其中只有一个样品稳定性好,经鉴定该样品的乳酸菌株为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)。对克隆的细菌素Nisin-like基因测序结果表明该基因序列全长174bp。生物信息学分析显示该基因编码57个氨基酸,分子量大小5924.93 Da,等电点9.23,二级结构主要由α-螺旋和β-折叠股组成,与报道的有所不同,可能是新的细菌素。

摘要：目的:从杏鲍菇子实体与海带中分离的63株乳酸菌中鉴定出产细菌素Lcn972A的菌株,并对细菌素编码基因进行克隆与基因序列分析。方法:采用生物信息学手段对已报道的细菌素Lcn972A编码基因进行分析比较,设计引物,分别以各乳酸菌基因组DNA为模板,利用PCR克隆技术克隆出细菌素Lcn972A的基因,利用生物信息学工具对其核酸序列和预测的蛋白序列进行分析。结果:在63株乳酸菌的基因组样品中有15组被克隆出目的条带,其中杏鲍菇乳酸菌A15与海带乳酸菌CX2样品PCR产物条带清晰稳定性好,经鉴定两样品的乳酸菌株为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)。对克隆的细菌素Lcn972A基因测序结果表明该基因序列全长276 bp。生物信息学分析显示该基因编码91个氨基酸,分子量大小22843.3 u,等电点5.33,氨基酸序列为亲水性,二级结构主要由α-螺旋、无规卷曲和延伸链组成。结论:从分离自杏鲍菇子实体乳酸乳球菌A15与海带乳酸乳球菌株CX2的细菌素编码基因及氨基酸序列与报道的有所不同,可能是新的细菌素,该细菌素的抗菌特点有待进一步的研究。

摘要：目的:类胡萝卜素双加氧裂解酶(CCD)是类胡萝卜素生物合成途径中的一个关键酶。旨在鉴定并克隆蛹虫草中的CCD酶,通过相关生物信息学分析和荧光定量PCR探究其结构、功能聚类以及表达调控。方法:用GenBank登录的CCD酶基因序列与蛹虫草基因组比对,在保守区域设计1对引物,以蛹虫草基因组的DNA为模板对CCD酶基因进行扩增,扩增产物命名为car-TC。car-TC基因连接载体后由生物公司测序;序列通过多种生物信息学软件和在线工具分析;表达量随生长情况的变化关系通过实时荧光定量PCR进行测定。结果:克隆了car-TC基因,该基因长1784bp,编码一个577aa的蛋白质,该蛋白质含有CCD酶活性必需的4个组氨酸残基,系统发育进化分析表明该蛋白和棒束菌、白僵菌的同源蛋白聚在同一簇,实时荧光定量PCR结果表明该蛋白的表达量随生长时间的延长而减少。结论:获得一个类胡萝卜素合成途径中的关键酶——双加氧裂解酶基因car-TC,该基因的表达主要受时序调控,随生活周期的进行有逐渐降低的趋势。

摘要：α-葡萄糖基转移酶(α-GTF)是一类可以利用麦芽糖,异麦芽糖,O-甲基葡萄糖苷等为底物合成低聚糖的多功能性酶,因其功能多样性和独特性而备受关注。本文利用本团队测序的植物乳杆菌(FMNP01)全基因组信息,采用生物信息学方法分析获得α-葡萄糖基转移酶基因(α-gtf),同时根据NCBI中上传的乳酸菌全基因组信息中的α-GTF的DNA序列设计引物,利用PCR技术分别从植物乳杆菌、干酪乳杆菌和短乳杆菌中克隆得到3个α-gtf基因,其编码的氨基酸序列相似性分别为42%、29%和29%;将克隆得到的3个基因分别与表达载体pET-32a连接构建成表达质粒,转入大肠杆菌BL21表达宿主菌中进行诱导表达,产物经SDS-PAGE分析表明,在75 ku处都有一明显条带,与预期蛋白分子量一致,表明这3个基因成功获得了表达。同时对诱导剂浓度、诱导时间和温度进行优化,可望为以后相关研究奠定了基础。

摘要：在单因素比较的基础上采用二次旋转正交组合设计法优化了苦瓜皂苷的超声-微波协同提取工艺条件,结果表明:以含水量13%的苦瓜干为原料,超微粉碎成苦瓜粉,在超声-微波协同处理(70℃,50W,20 khz)下,最佳提取工艺条件为乙醇体积分数74.6%、原料粒度74μm,料液比1∶18、提取时间973 s,在此最佳工艺条件下苦瓜皂苷的提取率达2.51%。

摘要：根据已报道的gpd启动子的序列设计合成了一对引物,以草菇菌丝的基因组DNA为模板,采用PCR扩增的方法克隆出一条长1367bp的DNA特异片段gpd-vv。gpd-vv序列用Promoter Scan Ⅱ和Promoter Predictions软件进行分析,结果表明,其序列上有6个核心启动子区,而且除了具有一般启动子的CAAT-box、TATA-box等基本顺式作用元件外,还含有几个重要的元件如G-box,GC-motif,CTrich-motif等。经Tfsitescan Service分析,gpd-vv序列还包含多个转录因子的结合位点,包括GCR1,GCN4,AFT1,Repressor of CAR1等。

摘要：以总蛋白质损失率、脂肪损失率、可溶性蛋白质损失率为指标,通过卤制时间与卤制温度2因素3水平全因素试验设计,用方差分析和极差分析考察其对卤鸡腿品质的影响,以物性(质构)指标来评价干燥温度对卤鸡腿品质的影响。结果表明:在试验范围内,卤制时间和卤制温度对卤鸡腿总蛋白质损失率、脂肪损失率、可溶性蛋白质损失率差异不显著。随着干燥时间的增加,卤鸡腿硬度与弹性逐渐增加,但黏聚性呈先增大后减小的趋势。