摘要：本文以新疆白葡萄籽为研究对象,利用微波、酶法双辅助提取葡萄籽中原花青素,并研究其抑菌性。在单因素实验的基础上,利用Box-Behnken原理设计响应面实验,研究了料液比、微波时间、微波温度及纤维素酶添加量4个因素对葡萄籽原花青素提取率的影响,经过AB-8型大孔树脂纯化后,得到的原花青素纯度为95.6%,探究其抑菌性。实验表明,在微波温度60℃、料液比1:14.6(g:m L)、微波时间9 min、纤维素酶添加量量0.56 mg/m L的条件下,得到的原花青素提取率最大为5.72%。经纯化后的原花青素能有效抑制金黄色葡萄球菌,抑菌圈直径达19.2 mm,最低抑菌浓度(MIC)为2.5 mg/m L,最低杀菌浓度(MBC)为5 mg/m L。经原花青素作用后的细菌,细胞膜通透性增加,细胞壁遭到破坏,扫描电镜照片显示细菌细胞表面凹陷褶皱,细胞大小不一。

摘要：壳聚糖及其衍生物在酶固定化领域有着广泛的应用。了解酶与壳聚糖衍生物在分子水平上的相互作用机制,对相关生物催化剂的设计和应用具有重要意义。本研究采用分子动力学模拟方法研究南极假丝酵母脂肪酶B(CaLB)与壳寡糖(OCTS)的相互作用,并对脂肪酶与催化底物进行分子对接研究脂肪酶催化活性中心和底物结合构象和结合亲和力。结果表明,脂肪酶与OCTS之间的静电和L-J相互作用在自组装过程的初始阶段起着重要的作用。模拟过程结束后,CaLB-OCTS组装体共包含14个OCTS分子和1个CaLB分子。CaLB与OCTS之间存在静电相互作用和氢键相互作用,在模拟过程中,L-J势能和库仑势能分别降低了约1480 kJ/mol和2324.0 kJ/mol,两者间的平均氢键数从0增加到约17,CaLB与OCTS的可及面积均因为相互作用而降低了20 nm2。二级结构表明,与游离酶对照相比,CaLB-OCTS的β折叠含量从9.78%增加至12.62%,无规卷曲loop从49.21%下降至46.50%,CaLB-OCTS的β折叠的含量更高,而无规卷曲含量更低。此外,CaLB-OCTS保留了其原有的蛋白骨架结构以及活性位点口袋的构象。

摘要：许多微生物是以非核糖体方式合成生物活性肽。生物活性肽的合成以及它们的序列专一性是由一定数目按顺序排列的蛋白质模板所决定的。因此可以构建一种编码肽合成酶系的杂交基因,从而改变肽合成酶系对底物专一性。这里介绍一种两步重组法(two-stepmethod)在基因水平取代相应的蛋白质模板中的一个氨基酸激活功能域。这种技术显示了将基因工程方法用于肽类抗生素生物合成的潜力。