摘要：新型冠状病毒肺炎(Coronavirus disease 2019,COVID⁃19)所引发的全球大流行已导致上亿人确诊,但至今尚无安全有效的治疗药物。膜蛋白(Membrane protein,M)作为冠状病毒颗粒中最丰富的结构蛋白,在同其它结构蛋白间相互作用、病毒粒子的组装释放和机体免疫应答方面有重要的作用,是抗病毒药物研发和疫苗设计的重要靶点之一。本综述重点介绍了膜蛋白的结构、生物学功能、先天及适应性免疫应答和相关靶向抑制剂,以期加强对新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS⁃CoV⁃2)膜蛋白研究现状的全面了解,助力相关药物的研发和防治新策略的建立。

摘要：一些在组织和细胞分化中起重要作用的蛋白质包含锌指结构域 .为了克隆分离和研究与造血细胞分化和发育成熟相关的蛋白基因 ,利用编码C2H2型锌指蛋白结构域中部分保守氨基酸序列设计简并引物 ,以骨髓cDNA为模板 ,进行PCR扩增 ,得到若干新的锌指蛋白基因EST .用其中一条为探针筛选人骨髓cDNA文库 ,获得了一个新的锌指蛋白基因全长cDNA ,GenBank收录号为AF2 4 6 12 6 ,长 3888bp ,包括一个完整阅读框 ,编码 6 86个氨基酸 ,包括 17个典型的和 2个非典型的C2H2模体 ,命名为HZF2 .RNA印迹、人多组织mRNA斑点杂交分析结果显示 ,其在T淋巴细胞发育和定居的器官组织胸腺、淋巴结中有较高表达 ,在脾脏、胎肝有中度表达 ,在B淋巴细胞发育的骨髓中表达很低 ,在外周血几个淋巴细胞系中仅有极微量的表达 ,提示HZF2可能对于T淋巴细胞发育和增殖有重要功能 .该基因也在脑组织的若干部位、胎盘及肾上腺有较高表达 ,在多种其他组织细胞有微量表达 ,说明其可能对维持这些组织细胞的生理功能也起一定作用 .将编码HZF2读框的DNA顺序克隆到pEGFP N1载体中 ,转染 3T3细胞 ,证明表达的HZF2 GFP融合蛋白定位于细胞核 ,这与根据HZF2蛋白结构推测其可能作为DNA结合蛋白行使调节基因转录的功能是一致的 .

摘要：ＮＯ合酶抑制剂能阻断或逆转μ、δ激动剂耐受和戒断反应，而对κ激动剂无明显作用，其药理效应类似于阿片成瘾治疗的常用药物可乐定。甲基兰抑制鸟苷酸环化酶活性，使ｃＧＭＰ生成减少，对阿片类药物耐受和戒断症状均有阻断作用，提示ＮＯｃＧＭＰ通路在阿片耐受和依赖发生中起重要作用，为寻找和设计治疗阿片类耐受成瘾的药物提供新的策略。

摘要：我们设计了一种新型的能够在线和离线分析Morris水迷宫过程的图像追踪系统。该系统以电荷耦合器件 (CCD)和赛扬 4 0 0微型计算机为基础 ,实验过程中不需要对实验动物作特殊标记 ,识别算法采用了轨迹预测、局部和全局相结合的搜索技术 ,从而使得追踪和记录实验动物 (大鼠 )的速度达到 18帧 /s ,空间分辨率达到2cm。该系统提供了丰富的参数 ,并具有对任意点和任意时间段进行参数分析和轨迹显示的功能。实验结果可以保存为文本文件 ,方便地利用Excel等工具软件作进一步分析。

摘要：将大鼠脑原生型一氧化氮合酶（cNOS）全长cDNA定向插入pRC／CMVpolylinker区，获得真核细胞表达载体pCMVcNOS。以pCMVcNOS为模板，cNOS内部基因序列设计的引物进行PCR扩增，证明cNOS基因的存在。经酶切检测进一步证实插入方向完全正确。用磷酸钙共沉淀法和LipofectinTM法将pCMVcNOS转染NG108-15细胞，用含600mg／LG418培养基筛选和增殖抗性单克隆细胞，通过3H-精氨酸转化3H-胍氨酸法测定各细胞克隆可溶相和颗粒相cNOS活性，筛选高效稳定表达的细胞株。从42株抗G418单克隆细胞林中筛选到3株稳定高效表达细胞，在表达的cNOS活性中，可溶相增加更为明显。本实验结果证实，得到高效表达原生型一氧化氮合酶的神经细胞株。

摘要：目的:在大肠杆菌中表达ULBP4重组蛋白,并制备其特异性的单克隆抗体(mAb),为γδT细胞对ULBP4的识别机制研究奠定基础。方法:根据GenBank中ULBP4的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR方法从HO-8910细胞中扩增得到ULBP4片段,构建重组原核表达质粒pET22b(+)/ULBP4(前225aa胞外段),在Rosetta-gamiTMB(DE3)大肠杆菌中获得表达且主要位于包含体中,经纯化透析复性后,分析其对NK细胞IFN-γ细胞因子分泌的影响。以ULBP4为抗原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次经HAT选择培养、间接ELISA法、克隆化培养、荧光免疫检测和流式细胞术以及Western blot筛选和鉴定抗ULBP4 mAb的杂交瘤细胞株。结果:构建了pET22b(+)/ULBP4(225aa)原核表达体系,并检测到重组蛋白的有效表达;纯化的重组蛋白在体外培养体系中可以刺激NK细胞IFN-γ细胞因子的分泌。此外,还获得了4株可稳定分泌抗人ULBP4 mAb的杂交瘤细胞株。结论:成功地构建并表达了具有生物活性的ULBP4,为γδT细胞的识别机制研究建立抗原制备平台,同时所制备的抗人ULBP4 mAb,为后续研究奠定了基础。

摘要：目的分离、克隆一种新的恶性疟原虫PDZ结构域包含蛋白(PfPCP)编码区基因,并初步研究其红内期表达。方法分析恶性疟原虫基因组3号染色体数据库,设计特异的引物,利用RT-PCR从恶性疟原虫海南株红内期mRNA扩增PfPCP编码区基因利用生物信息学相关软件分析所扩增的基因;利用Western印迹法分析PfPCP在红内期的表达。结果从恶性疟原虫mRNA扩增到的PfPCP编码区基因长度为2076bpcDNA克隆,编码蛋白长为691氨基酸,具有典型的PDZ结构域。Western印迹显示,该基因在红内期裂殖体期特异性表达。结论获得新的恶性疟原虫PfPCP编码区基因,该基因在恶性疟原虫红内期裂殖体期特异性表达。

摘要：介绍一组重要的转录因子、NF-κB(nuclear factor kappa B)的组成与分子结构,NF-κB抑制蛋白IκB、NF-κB激酶IKK对其活性的调节,NF-κB的激活机制,NF-κB对相当多数量的基因发挥中心性转录调节作用及其在免疫、炎症、细胞的生存、增殖分化和凋亡等方面的重要作用,NF-κB与疾病发生及疾病治疗的关系;展望NF-κB作为新靶点在新药设计与相关疾病治疗新策略方面的应用前景。

摘要：目的了解3个县（市）城乡居民对公共场所完全禁止吸烟的态度，探讨影响城乡居民控烟态度的主要因素。方法2004年以四川省绵竹市、江西省安义县、河南省新安县为研究现场，每个研究现场均采用三阶段分层随机抽样方法，抽取18～69岁城乡居民作为调查对象。由经过培训的调查员运用统一设计的调查表，以面对面询问方式进行人户调查。采用岔检验和非条件logistic回归模型，分析城乡居民对公共场所完全禁烟的态度及其影响因素。结果3个县（市）调查对象的现在吸烟率为44．3％，在现在吸烟者中80．7％（1379／1709）报告经常或有时在公共场所吸烟；有工作者中9．6％（479／4983）报告工作场所有室内完全禁烟的规定；调查对象对公共场所完全禁止吸烟的赞成率是43．5％。多因素logistic回归模型结果显示，地区、城乡、年龄、性别、文化程度、吸烟状况、掌握被动吸烟的健康危害知识、通过广播接受过控烟宣传与居民对公共场所完全禁烟态度的关系有统计学意义。居住在城区的调查对象比居住在农村者更支持在公共场所完全禁烟（OR=1．29）；女性支持高于男性（OR=1．27）；高年龄组较低年龄组更赞成公共场所完全禁烟（30～49岁洮18～29岁：OR=1．46；50～69岁伽．18～29岁：OR=1．71）；文化程度与控烟态度间呈正关联，文化程度越高，赞成率越高；与吸烟者相比，戒烟者、非吸烟者更支持存公共场所完全禁烟，OR值分别为1．90和2．01；掌握被动吸烟健康危害知识的调查对象对公共场所完全禁烟的赞成率高于未掌握知识者（OR=2．26）；通过广播接受过控烟宣传者较未接受者更赞成公共场所完全禁烟（OR=1．43）。结论3个县（市）人群已有一定的禁烟基础，应尽快制定并推广在公共场所完全禁止吸烟的规定。

摘要：21世纪人口的老龄化对人类社会是一个重大的挑战。我国目前已经步入老年型社会。随着社 会性人口的衰老，与人口衰老相关疾病的发生急剧增加，特别是阿尔采默痴呆(AD)、帕金森 病(PD)、骨质疏松和II型糖尿病为代表的老年性疾病引起的智能衰退、行动障碍、骨折和肾 功能衰竭等严重地影响老人的生活质量，为社会和家庭带来沉重负担。老年性疾病并非简单 地由机体老化所致，也非疾病在老年期的明显表现，但是以老化为其发病基础的。同时，遗 传因素和体内外环境因素在老年性疾病的发生与发展方面起一定作用。然而，目前大多数老 年性疾病研究尚处于资料的积累阶段，迫切需要有科学创意假说的提出，从多个角度全方位 地对老化和老年性疾病的发生机制进行研究，进而为临床提供有效的手段用于老年性疾病的 防治。 衰老或老化（senescence）是机体代谢过程中的一个必然阶段，主要表现为机体对环境刺激 的适应能力减弱以至丧失。老化的机制颇为复杂，有关老化的理论假说也颇多，如氧化损伤 学说、遗传控制学说、体细胞突变学说、衰老符合途径假说等。美国病理学家Wolford在60年代首先提出老化的免疫学假说，认为免疫系统从根本上参加了正常脊椎动物的老化过程 ，是老化过程的主要调节系统之一。老化免疫学旨在研究免疫老化（Immunesenescence）的 发生与发展机制，研究正常脊椎动物免疫系统功能与结构的增龄性变化规律，为高等生物生 命活动研究提供全程性（尤其生命处于衰退阶段时）免疫系统方面的信息，并且探讨免疫老 化对机体抗感染和抗肿瘤机能及其自身免疫病易感性等方面的影响，为解决衰老所致的免疫 相关性疾病的诊断、预防和治疗提供策略与方法。 T淋巴细胞功能降低与数量减少是增龄性免疫系统的主要改变，其中胸腺增龄性萎缩（退化 ）表现尤为明显。T细胞与免疫老化的关系是老化免疫学机制研究的核心内容，其中至少有 以下6项研究为研究者们所关注：其一，T细胞来源于骨髓的前体T细胞，因此老化对T细胞 的影响的第一个证据应在老龄动物或老年人造血发生的研究之中来寻求，老化时干细胞缺陷 受到重视；其二，胸腺是T淋巴细胞发育与成熟的场所，对于成年个体来说，胸腺似乎为 T细胞发育成熟的特殊目的而存在。然而，胸腺随增龄而发生退化，即便是年轻成熟的 个体，其胸腺功能和T细胞产生也随着胸腺退化而表现低下，因此胸腺退化机制的澄清对老 化免疫的深刻理解至关重要；其三，静止成熟的T淋巴细胞在外周是长寿命的,其人类T细胞 一般认为可存活几十年。在此期间，它们也将受到老化过程的影响；其四，T淋巴细胞介导 的免疫应答表现为特异性T细胞克隆的迅速扩增性增殖。此外，记忆性反应也是少数T细胞克 隆增殖的结果。这些增殖性淋巴细胞与老化的关系受到研究者的重视；其五，老化时T细胞 与抗原呈递细胞的关系有待于澄清；其六，老化时T细胞活化时信号传导异常目前引起关注。